XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search Systemengrafted
Horizon Europe
影响大脑皮层的脑损伤导致神经元不可逆转的神经损失造成神经系统缺陷，但仍然没有任何治疗选择。对这些条件的唯一可能的治疗方法是重建丢失的神经元回路，这原则上可以通过干细胞疗法来实现。但是，当干细胞被植入时，它们仅提供营养作用，并且无法进行大量的组织置换并重新布线受损的组织。在这个项目中，我旨在实施向新的靶向治疗方法进行范式转变，从而可以恢复皮质脑损伤中功能性神经元网络活性。在这种观点中，我的目的是：i）开发一个能够支持皮质脑器官（CBOS）植入的人类特异性水凝胶； ii）通过3维（3D）生物印刷来实现CBO之间功能性神经元连接的体外指导； iii）使用插入式3D生物打印连接CBO和病变的小鼠视觉皮层； iv）通过病变的皮层电路中的CBO积分实现体内功能网络恢复。我已经通过2-光子介导的与植入的CBO相邻的活小鼠皮质大脑的光敏感聚合物的2光子介导的光子敏感聚合物的交联，已经开发了体内制造的3D水凝胶，能够指导CBO的体内生长。拟议的项目有可能为皮质脑病变疗法提供新的最新治疗选择，仅结合属于不同领域的多种能力：神经科学，细胞疗法，生物工程。连接的开创性性质是关于i）创建原位额外的细胞矩阵（ECM）模拟结构以在体内重建神经元网络和丢失的神经功能的模拟结构； ii）使用脑类器官作为具有定义有组织结构的电动单元，以刺激脑可塑性并加强与宿主脑组织的突触连接。
使用鸡蛋绒毛膜膜膜的异种移植模型
背景：非转移性肌肉浸润性尿路上皮膀胱癌（MIBC）的预后较差，护理标准（SOC）包括基于新辅助顺铂的化学疗法（NAC）与膀胱切除术相结合。接受NAC的患者与单独的膀胱切除术相比，总体生存率的最多<10％。这个主要的临床问题强调了我们对抵抗机制的理解和对可靠的临床前模型的需求。鸡肉胚胎绒毛膜膜膜（CAM）代表了免疫功能低下的小鼠的快速，可扩展且具有成本效益的替代方法，用于在体内建立患者衍生的异种移植物（PDX）。cam- PDX利用易于获得的植入支架和富含血管的，免疫抑制的环境，用于植入PDX肿瘤和随后的功能研究。方法：我们使用CAM-PDX模型优化了原发性MIBC肿瘤的植入条件，并在基于顺铂的化学疗法反应之间进行了一致性，对患者的化学疗法反应与使用免疫组织化学标志物相结合的PDX肿瘤对PDX肿瘤进行了匹配。我们还使用肿瘤生长测量方法和对增殖标记物的免疫检测，KI-67测试了CAM-PDX上抗化疗的膀胱癌的精选激酶抑制剂反应。结果：我们的结果表明，在CAM上生长的原发性，耐NAC的MIBC肿瘤具有组织学特征 - 以及基于顺铂的基于顺铂的化学疗法耐药性，可在诊所观察到匹配的父母人类肿瘤标本。结论：我们的数据表明，基于顺铂的化学疗法抗性表型与原发性患者肿瘤和CAM-PDX模型之间的一致性。患者肿瘤标本成功地植入了CAM上，并显示出对双重EGFR和HER2抑制剂治疗的肿瘤生长大小和增殖的降低，但对CDK4/6或FGFR抑制没有明显的反应。此外，蛋白质组知情的激酶抑制剂在MIBC CAM-PDX模型上使用了新型治疗剂的快速体内测试的整合，从而为更复杂的细胞前小鼠PDX实验提供了更为有效的临床试验设计，旨在为具有有限治疗选择的患者提供最佳的精确药物。
原位疫苗加检查点阻断可诱导记忆体液反应
在同源小鼠黑色素瘤 (MEL) 模型中，我们最近报道了对联合放射 (RT) 和肿瘤内 (IT) 注射抗 GD2 hu14. 18-IL2 免疫细胞因子 (IC) 的原位疫苗接种反应。这种联合治疗导致 5 周肿瘤完全消退率达到 71%，且持久消退，肿瘤特异性记忆 T 细胞反应，以及对全身抗 CTLA-4 抗体检查点阻断的反应增强。虽然已经报道了放射能够多样化抗肿瘤 T 细胞反应，但我们假设通过基于 RT 的 ISV 呈现无病 (DF) 的小鼠也可能表现出增强的 B 细胞反应。 C57BL/6 小鼠植入 2 × 10 6 GD2 + B78 MEL，以 ∼ 200 mm 3 的目标肿瘤大小进行治疗，剂量为 12 Gy RT，第 6 天至第 10 天进行 IT-IC，第 3 天、第 6 天和第 9 天进行抗 CTLA-4。在肿瘤注射前、治疗前、治疗期间、成为 DF 后以及在 D90 拒绝皮下 2 × 10 6 B78 MEL 再次挑战后通过面静脉采集血清。流式细胞术证明，在开始治疗后 D90 时，在成为 DF 并拒绝再次用 B78 MEL 挑战的小鼠血清中存在肿瘤特异性 IgG。与适应性内源性抗肿瘤体液记忆反应一致，这些抗肿瘤抗体与 B78 细胞和亲本 B16 细胞 (GD2-) 结合，但不与无关的同源 Panc02 或 Panc02 GD2 + 细胞系结合。我们评估了这种反应的动力学，并观察到在开始治疗后，D22 始终检测到肿瘤特异性 IgG，这对应于肿瘤快速消退的时间。与肿瘤细胞结合的肿瘤特异性抗体量（通过流式 MFI 测量）与宿主动物预后无关。在静脉注射之前，在 DF 血清中孵育 B16 MEL 细胞与在幼稚血清中孵育 B16 MEL 细胞不会延迟 B16 转移的植入，并且显示出相似的总体存活率。使用抗 CD20 或抗 CD19 和抗 B220 进行 B 细胞耗竭不会影响 ISV 治疗的有效性。因此，RT + IC + 抗 CTLA-4 治疗可产生适应性抗肿瘤体液记忆反应。这种内源性肿瘤特异性抗体反应似乎没有治疗效果，但可以作为抗肿瘤 T 细胞反应的生物标志物。
代谢组学与PD-1抑制剂加的关联...
抽象背景癌症免疫疗法（包括免疫检查点抑制剂）仅对有限的癌症患者有效。因此，预计新型癌症免疫疗法的发展。在初步研究中，我们证明了四环素增强了T细胞反应。因此，我们在这里研究了四环素对人外周T细胞，鼠模型和非小细胞肺癌患者（NSCLC）患者的抗肿瘤T细胞反应的疗效，重点是T细胞中的信号途径。使用双特异性T细胞Engager（Bite）技术（咬合分析系统）评估外周和肺肿瘤浸润的人T细胞对肿瘤细胞的细胞毒性。与抗编织细胞死亡1（PD-1）抗体Nivolumab相比，使用咬合测定系统检查了健康供体血液和NSCLC患者肿瘤组织T细胞的影响。通过流式细胞仪，ELISA和QRT-PCR分析 T细胞信号分子。为了研究四环素的体内抗肿瘤作用，在存在或不存在抗小鼠CD8抑制剂的情况下，将四环素口服给植入鼠肿瘤细胞系的BALB/C小鼠。结果获得的结果表明，四环素随着颗粒酶B的上调增强了抗肿瘤T细胞毒性，并增加了人外周T细胞中干扰素-γ的分泌，而NSCLC患者的肺肿瘤组织则增强。在相同条件下用抗PD-1抗体处理的T细胞中未观察到这些变化。T-细胞信号传导的分析表明，CD4 +和CD8 + T细胞中的CD69被米诺环素上调。T细胞受体信号传导，ZAP70磷酸化和NUR77的下游也在T细胞激活后的早期阶段被米诺环素上调。在鼠肿瘤模型中，四环素的给药表现出抗肿瘤疗效，CD69的上调和肿瘤抗原特异性T细胞的增加。通过抗小鼠CD8抑制剂的给药取消了这些变化。结论是，四环素通过ZAP70信号传导增强了抗肿瘤T细胞免疫。这些结果将有助于新型癌症免疫疗法的发展。
MDSC 靶向 mTFF2-MSA (mTNX-1700*) 抑制...
目的：肿瘤微环境中的髓系抑制细胞 (MDSC) 是免疫检查点癌症治疗的潜在治疗靶点，但 MDSC 靶向疗法尚未证明可以提高生存率。三叶因子家族 2 (TFF2) 是一种分泌性抗炎肽，可以抑制 MDSC 扩增并激活肿瘤免疫，部分是通过激动 CXCR4 受体 1-3 来实现的。本研究旨在调查新型 TFF2 - 白蛋白融合肽 (TFF2-MSA) 是否可以提高抗 PD-1 治疗的同基因结直肠癌 (CRC) 小鼠模型的生存率。方法：使用皮下移植到小鼠体内的细胞系开发了两种同基因结肠癌小鼠模型。 MC38 CRC 细胞被植入 C57BL/6 小鼠体内，而 CT26.wt CRC 细胞被植入 BALB/C 小鼠体内。我们生成了一种重组融合蛋白，称为 mTFF2-MSA，它包含与鼠血清白蛋白 (MSA) 融合的鼠 TFF2，目的是增加半衰期并减少给药频率。小鼠随后接受 mTFF2-MSA 或抗 PD-1 抗体（克隆 29F.1A12）或两者，并测量肿瘤体积和存活率。在终点，进行流式细胞术以检查治疗对免疫特征的影响。结果：在 MC38 模型中，施用 mTFF2-MSA 可抑制肿瘤生长（TGI 50%），mTFF2-MSA 和抗 PD-1 的组合具有附加作用并显着抑制肿瘤生长（TGI 87%）。该组合还显示 50 天后的存活率为 90%，而载体和单一 mTFF2-MSA 疗法分别为 20% 和 50%。通过流式细胞术使用抗 LAG3、TIM3 和 PD-1 抗体测量，联合治疗后引流淋巴结中耗竭的 CD8+ T 细胞百分比显著降低。在 CT26.wt 模型中，单独使用 mTFF2-MSA 效果不大，但抗 PD-1 和 mTFF2-MSA 的组合显示出显著的效果。在 CT26.wt 模型中，mTFF2-MSA 的给药可抑制肿瘤生长（TGI 16%），单独使用抗 PD-1（TGI 40%）以及 mTFF2-MSA 和抗 PD-1 的组合（TGI 60%）。结论：在晚期和转移性同基因小鼠结直肠癌模型中，使用 mTFF2-MSA 融合蛋白靶向 MDSC 与 PD-1 阻断疗法具有良好的协同作用。在另一篇摘要中，在单独的 ACKP（Atp4b-Cre；Cdh1-/-；LSL-KrasG12D；Trp53-/-）胃癌模型中也证明了 mTFF2-MSA 和抗 PD-1 抗体之间的附加效应，这表明联合治疗也可能适用于胃癌。