XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search Systemexpanded
美国救援计划两周年对加州的影响 • 推动加州经济强劲复苏，失业率降至 4.1%：加州失业率从 2021 年 1 月的 8.7% 降至 2022 年 12 月的 4.1%，因为该州增加了 175 万个就业岗位，现在的就业岗位比疫情前还多。 • 推动加州创纪录的 100 万份新小企业申请：2021 年和 2022 年，加州人申请创办 100 万份新企业，创下两年来最高纪录。 • ARP 向加州所有 539 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支，并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。 • 向加州 870 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：加州 870 多个学区获得了资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。 • 加州 15,280 个儿童保育项目获得支持，以帮助它们继续开放，影响了多达 379,000 名儿童。 • 通过扩大儿童税收抵免为 460 万加州家庭（拥有 750 万名儿童）提供工作家庭税收减免：在加州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使估计有 460 万个家庭（拥有 750 万名儿童）受益。 • 扩大加州 180 万名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划的
美国救援计划两周年对加州的影响 • 推动加州经济强劲复苏，失业率降至 4.1%：加州失业率从 2021 年 1 月的 8.7% 降至 2022 年 12 月的 4.1%，因为该州增加了 175 万个就业岗位，现在的就业岗位比疫情前还多。• 推动加州新增 100 万份小企业申请：2021 年和 2022 年，加州人申请创办 100 万份新企业，创下两年来最高纪录。• ARP 向加州所有 539 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支，并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向加州 870 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：加州 870 多个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 加州 15,280 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 379,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为 460 万加州家庭（拥有 750 万名儿童）提供工作家庭税收减免：在加州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使约 460 万个家庭（拥有 750 万名儿童）受益。• 扩大加州 180 万工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大后的劳动所得税抵免为加州约 180 万无受抚养子女的工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。• 每年为 180 万加州人节省数百美元的医疗保健费用：2022 年，180 万加州人通过美国救援计划节省了数百美元的健康保险费。随着《通胀削减法案》延长这些节省，170 万加州人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。• 向加州数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在加州，州和地方政府支付了 139,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 517,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。• 仅在 2021 年，就有 170 万加州大学生通过高等教育紧急救济计划获得了直接经济救济：2021 年，463 所加州学院和大学向 170 万大学生直接提供了经济援助，帮助他们继续入学并支付账单。• 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 1447,000 名加州学生的家庭作业问题：为学生提供约 1459,000 台联网设备（包括热点）。• 15,977 家加州餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
美国救援计划两周年对阿肯色州的影响 • 推动经济强劲复苏，阿肯色州失业率降至 3.4%：阿肯色州失业率从 2021 年 1 月的 4.9% 降至 2022 年 12 月的 3.4%，因为该州增加了 58,000 个工作岗位，现在的就业岗位比疫情前还多。 • 导致阿肯色州创纪录地新增 79,000 份小企业申请：2021 年和 2022 年，阿肯色州人申请创办 79,000 家新企业，创下有记录以来的两年最高总数。 • ARP 向阿肯色州所有 555 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。 • 向阿肯色州 230 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿肯色州 230 多个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。 • 阿肯色州 1,670 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 153,000 名儿童。 • 通过扩大儿童税收抵免为 378,000 个阿肯色州家庭（拥有 639,000 名儿童）提供工作家庭税收减免：在阿肯色州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使约 378,000 个家庭（拥有 639,000 名儿童）受益。 • 扩大阿肯色州 183,000 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为约 183,00 人提供了高达 1,500 美元的税收减免
美国救援计划两周年对阿肯色州的影响 • 推动经济强劲复苏，阿肯色州失业率降至 3.4%：阿肯色州失业率从 2021 年 1 月的 4.9% 下降到 2022 年 12 月的 3.4%，因为该州增加了 58,000 个工作岗位，现在的就业岗位比疫情前还多。• 导致阿肯色州创纪录的 79,000 份新的小企业申请：2021 年和 2022 年，阿肯色州人申请创办 79,000 家新企业，创下有记录以来的最高两年总数。• ARP 向阿肯色州所有 555 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向阿肯色州 230 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿肯色州 230 多个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 阿肯色州 1,670 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 153,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为 378K 个阿肯色州家庭（拥有 639K 名儿童）提供工作家庭税收减免：在阿肯色州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使约 378,000 个家庭（拥有 639,000 名儿童）受益。• 扩大阿肯色州 183K 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为约 183,000 名没有受抚养子女的阿肯色州工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。• 平均每年为 88,000 名阿肯色州人节省 872 美元的医疗保健费用：2022 年，88,000 名阿肯色州人从美国救援计划中平均节省了 872 美元的健康保险费。随着《通货膨胀削减法案》延长这些节省，创纪录的 100,000 名阿肯色州人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。• 向阿肯色州数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在阿肯色州，州和地方政府支付了 59,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 44,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。• 仅在 2021 年，就有 124,000 名阿肯色州大学生通过高等教育紧急救济计划获得直接经济救济：2021 年，70 所阿肯色州学院和大学向 124,000 名大学生直接提供经济援助，帮助他们继续入学并支付账单。• 通过美国救援计划的资本项目基金，35,000 多个阿肯色州家庭和企业将获得负担得起的高速互联网。• 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 28,000 名阿肯色州学生的家庭作业问题：为学生提供约 122,000 台联网设备（包括热点）。• 507 家阿肯色州餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
美国救援计划两周年对亚利桑那州的影响 • 推动亚利桑那州失业率降至 4% 的强劲复苏：亚利桑那州的失业率已从 2021 年 1 月的 6.4% 降至 2022 年 12 月的 4%，因为该州增加了 213,000 个工作岗位，现在的就业岗位比疫情前还多。 • 导致亚利桑那州创纪录地新增 228,000 份小企业申请：2021 年和 2022 年，亚利桑那州人申请创办 228,000 家新企业，创下有记录以来的两年最高总数。 • ARP 向亚利桑那州所有 106 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。 • 向亚利桑那州 210 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：亚利桑那州 210 多个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。 • 亚利桑那州 2,570 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 239,000 名儿童。 • 通过扩大儿童税收抵免，为 859K 个拥有 150 万名儿童的亚利桑那州家庭提供工作家庭税收减免：在亚利桑那州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使约 859,000 个拥有 150 万名儿童的家庭受益。 • 扩大亚利桑那州 379K 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为亚利桑那州约 379,000 名工人提供了高达 1,500 美元的税收减免
美国救援计划两周年对亚利桑那州的影响 • 推动强劲复苏，亚利桑那州失业率降至 4%：亚利桑那州的失业率已从 2021 年 1 月的 6.4% 降至 2022 年 12 月的 4%，因为该州增加了 213,000 个工作岗位，现在的工作岗位比疫情前还多。• 导致亚利桑那州创纪录的 228,000 份新的小企业申请：2021 年和 2022 年，亚利桑那州人申请创办 228,000 家新企业，创下有记录以来的最高两年总数。• ARP 向亚利桑那州所有 106 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向亚利桑那州 210 多个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：亚利桑那州 210 多个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 亚利桑那州 2,570 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 239,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为拥有 150 万名儿童的 859K 个亚利桑那州家庭提供工作家庭税收减免：在亚利桑那州，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使约 859,000 个家庭和 150 万名儿童受益。• 扩大亚利桑那州 379K 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为亚利桑那州约 379,000 名没有受抚养子女的工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。随着《通货膨胀削减法案》延长这些储蓄，创纪录的 235,000 名亚利桑那州人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。• 平均每年为 200,000 名亚利桑那州人节省 830 美元的医疗保健费用：2022 年，200,000 名亚利桑那州人通过美国救援计划平均节省了 830 美元的健康保险费。• 向亚利桑那州数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在亚利桑那州，州和地方政府支付了 158,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 120,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。• 仅在 2021 年，就有 297,000 名亚利桑那州大学生通过高等教育紧急救济计划获得了直接经济救济：2021 年，60 所亚利桑那州学院和大学向 297,000 名大学生直接提供了经济援助，帮助他们继续入学并支付账单。• 通过美国救援计划的资本项目基金，亚利桑那州将有 128,000 多个家庭和企业获得价格实惠的高速互联网。• 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 91,000 名亚利桑那州学生的家庭作业问题：为学生提供约 423,000 台联网设备（包括热点）。• 1,326 家亚利桑那州餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
美国救援计划两周年对阿拉斯加的影响 • 推动强劲复苏，阿拉斯加失业率降至 3.7%，2022 年失业率创历史新低：阿拉斯加失业率从 2021 年 1 月的 7.1% 下降到 2022 年 12 月的 3.7%，因为该州增加了 14,000 个工作岗位。事实上，阿拉斯加 2022 年的平均失业率为 2.9%，是有记录以来的最低水平。 • 导致阿拉斯加有 17,000 份新的小企业申请：2021 年和 2022 年，阿拉斯加人申请创办 17,000 家新企业。 • ARP 向所有 158 个阿拉斯加城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。 • 向阿拉斯加的 51 个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿拉斯加的 51 个学区获得了资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。 • 阿拉斯加的 420 个儿童保育项目获得了支持，以帮助它们继续开放，影响了多达 16,000 名儿童。 • 通过扩大儿童税收抵免为 90,000 个阿拉斯加家庭和 163,000 个儿童提供工作家庭税收减免：在阿拉斯加，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使估计有 90,000 个家庭和 163,000 名儿童受益。 • 为阿拉斯加的 41,000 名工人扩大劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的 EITC 为估计 41,000 名阿拉斯加工人提供了高达 1,500 美元的税收减免
美国救援计划两周年对阿拉斯加的影响 • 推动强劲复苏，阿拉斯加失业率降至 3.7%，2022 年失业率创历史新低：阿拉斯加失业率从 2021 年 1 月的 7.1% 下降到 2022 年 12 月的 3.7%，该州增加了 14,000 个工作岗位。事实上，阿拉斯加 2022 年的平均失业率为 2.9%，是有记录以来的最低水平。• 导致阿拉斯加有 17,000 份新的小企业申请：2021 年和 2022 年，阿拉斯加人申请创办 17,000 家新企业。• ARP 向所有 158 个阿拉斯加城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向阿拉斯加 51 个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿拉斯加 51 个学区获得资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 阿拉斯加 420 个儿童保育项目获得支持，以帮助其继续开放，影响了多达 16,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为拥有 163,000 名儿童的 90,000 个阿拉斯加家庭提供工作家庭税收减免：在阿拉斯加，美国救援计划的历史性儿童税收抵免使估计有 90,000 个家庭和 163,000 名儿童受益。• 为阿拉斯加 41,000 名工人扩大劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为估计有 41,000 名没有受抚养子女的阿拉斯加工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。• 平均每年为 23,000 名阿拉斯加人节省 1169 美元的医疗保健费用：2022 年，23,000 名阿拉斯加人通过美国救援计划平均节省了 1169 美元的健康保险费。随着《通货膨胀削减法案》延长这些节省，创纪录的 26,000 名阿拉斯加人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。• 向阿拉斯加数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在阿拉斯加，州和地方政府支付了 70,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 19,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。• 仅在 2021 年，就有 12,000 名阿拉斯加大学生通过高等教育紧急救济计划获得直接经济救济：2021 年，9 所阿拉斯加学院和大学向 12,000 名大学生直接发放了经济援助金，帮助他们继续入学并支付账单。• 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 9,000 名阿拉斯加学生的家庭作业缺口：为学生提供约 23,000 台联网设备（包括热点）。• 384 家阿拉斯加餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
美国救援计划两周年对阿拉巴马州的影响 • 推动经济强劲复苏，阿拉巴马州失业率降至 2.6%，2022 年失业率创历史新低：阿拉巴马州失业率从 2021 年 1 月的 4.2% 降至 2022 年 12 月的 2.6%，因为该州增加了 85,000 个工作岗位，现在的工作岗位比疫情前还多。事实上，阿拉巴马州 2022 年的年失业率为 2.6%，是有记录以来的最低水平。 • 导致阿拉巴马州新增 146,000 份小企业申请：2021 年和 2022 年，阿拉巴马州人申请创办 146,000 家新企业，创下有记录以来的最高两年总数。 • ARP 向阿拉巴马州所有 511 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向阿拉巴马州 140 个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿拉巴马州 140 个学区获得了资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 阿拉巴马州 1,450 个儿童保育项目获得支持以帮助其继续开放，影响了多达 86,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为阿拉巴马州 608,000 个家庭（拥有 992,000 名儿童）提供工作家庭税收减免：在阿拉巴马州，美国救援计划具有历史意义的儿童税收抵免使约 608,000 个家庭（拥有 992,000 名儿童）受益。 • 扩大阿拉巴马州 287,000 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为阿拉巴马州约 287,000 名没有受抚养子女的工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。 • 平均每年为 219,000 名阿拉巴马人节省 750 美元的医疗保健费用：2022 年，219,000 名阿拉巴马人从美国救援计划中平均节省了 750 美元的健康保险费。随着《通货膨胀削减法案》延长这些节省，创纪录的 258,000 名阿拉巴马人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。 • 向阿拉巴马州数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在阿拉巴马州，州和地方政府支付了 64,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 52,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。 • 仅在 2021 年，就有 238,000 名阿拉巴马州大学生通过高等教育紧急救济计划获得直接经济救济：2021 年，65 所阿拉巴马州学院和大学向 238,000 名大学生直接提供了经济援助，帮助他们继续入学并支付账单。 • 通过美国救援计划的资本项目基金，55,000 多个阿拉巴马州家庭和企业将获得负担得起的高速互联网。 • 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 92,000 名阿拉巴马州学生的家庭作业缺口：为学生提供约 200,000 台联网设备（包括热点）。• 874 家阿拉巴马州餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
美国救援计划两周年对阿拉巴马州的影响 • 推动经济强劲复苏，阿拉巴马州失业率降至 2.6%，2022 年失业率创历史新低：阿拉巴马州失业率从 2021 年 1 月的 4.2% 降至 2022 年 12 月的 2.6%，因为该州增加了 85,000 个工作岗位，现在的工作岗位比疫情前还多。事实上，阿拉巴马州 2022 年的年失业率为 2.6%，是有记录以来的最低水平。 • 导致阿拉巴马州新增 146,000 份小企业申请：2021 年和 2022 年，阿拉巴马州人申请创办 146,000 家新企业，创下有记录以来的最高两年总数。 • ARP 向阿拉巴马州所有 511 个城镇和县提供直接疫情恢复资金——避免削减开支并投资于公共安全、住房、劳动力发展和其他关键领域。• 向阿拉巴马州 140 个学区提供重要教育资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放：阿拉巴马州 140 个学区获得了资金，以支持学业恢复和学生心理健康并安全重新开放。• 阿拉巴马州 1,450 个儿童保育项目获得支持以帮助其继续开放，影响了多达 86,000 名儿童。• 通过扩大儿童税收抵免为阿拉巴马州 608,000 个家庭（拥有 992,000 名儿童）提供工作家庭税收减免：在阿拉巴马州，美国救援计划具有历史意义的儿童税收抵免使约 608,000 个家庭（拥有 992,000 名儿童）受益。 • 扩大阿拉巴马州 287,000 名工人的劳动所得税抵免：美国救援计划扩大的劳动所得税抵免为阿拉巴马州约 287,000 名没有受抚养子女的工人提供了高达 1,500 美元的税收减免。 • 平均每年为 219,000 名阿拉巴马人节省 750 美元的医疗保健费用：2022 年，219,000 名阿拉巴马人从美国救援计划中平均节省了 750 美元的健康保险费。随着《通货膨胀削减法案》延长这些节省，创纪录的 258,000 名阿拉巴马人在 2023 年 ACA 开放注册期间注册了优质、负担得起的医疗服务。 • 向阿拉巴马州数千名陷入困境的租房者提供紧急租金援助：在阿拉巴马州，州和地方政府支付了 64,000 笔款项，帮助家庭支付持续的租金和水电费，并支付了 52,000 笔款项，帮助家庭解决逾期租金和水电费。 • 仅在 2021 年，就有 238,000 名阿拉巴马州大学生通过高等教育紧急救济计划获得直接经济救济：2021 年，65 所阿拉巴马州学院和大学向 238,000 名大学生直接提供了经济援助，帮助他们继续入学并支付账单。 • 通过美国救援计划的资本项目基金，55,000 多个阿拉巴马州家庭和企业将获得负担得起的高速互联网。 • 美国救援计划的紧急连接基金正在解决 92,000 名阿拉巴马州学生的家庭作业缺口：为学生提供约 200,000 台联网设备（包括热点）。• 874 家阿拉巴马州餐厅通过美国救援计划的餐厅振兴基金获得了重要救济。
扩展了综合世界建模理论
集成世界建模理论 (IWMT) 是一种综合意识理论，它使用自由能量原理和主动推理 (FEP-AI) 框架将集成信息理论 (IIT) 和全局神经工作空间理论 (GNWT) 的见解结合起来。在这里，我首先回顾了有助于 IWMT 整合视角的哲学原理和神经系统。然后，我继续描述大脑的预测处理模型及其与机器学习架构的联系，特别强调自动编码器（感知和主动推理）、涡轮码（为多模态集成和推理协同建立共享潜在空间）和图神经网络（空间和躯体建模和控制）。通过探索如何将模块和工作空间评估为集成信息的复合体和迭代贝叶斯模型选择的舞台，考虑了 IIT 和 GNWT 的未来方向。基于这些考虑，我提出了使用概率图模型、流网络和博弈论中的概念来估计集成信息的新方法。针对 IIT 和 GNWT 之间关于不同种类的意识和无意识现象的物理基础的持续争论，我还考虑了机械和计算原理。我进一步探讨了这些想法与“贝叶斯模糊问题”的关系，或者如何从概率建模中产生看似离散的体验，并考虑了量子力学中的类比，认为它可能揭示不同类型的推理动力学。我接着描述了解决基于网络展开的因果结构理论的批评的潜在方法，以及意识扩展图（没有控制论符号基础）的荒谬性。最后，我讨论了以网络展开为中心的未来工作方向。
同种异体和自体膜结合 IL-21 扩增 NK 细胞对慢性淋巴细胞白血病治疗的评估
其他先天免疫细胞在 CLL 治疗中的应用。因此，obinutuzumab（经过改造，改变了 Fc 区的糖基化模式，从而提高了 FcγRIIIa 结合率）已证明可在体外提高 NK 细胞 ADCC 活性，并且在临床试验中优于利妥昔单抗（糖基化正常）。3、4 然而，之前开发基于 NK 的 CLL 疗法的努力受到限制，部分原因是 CLL 细胞具有抑制 NK 细胞的强效免疫抑制作用。这种抑制通过多种机制实现，包括 NK 抑制配体、分泌损害 NK 活化的可溶性配体、免疫抑制细胞因子和低 NK 活化配体表达。5-12 这些特征共同导致广泛的 NK 功能障碍。 12-17 广义上讲，直到最近，NK 细胞疗法也受到细胞数量低以及扩增和激活这些细胞的技术不足的限制。
强直性肌营养不良症 2 型中长度 CNBP 扩增等位基因...
摘要 2 型强直性肌营养不良 (DM2) 是由 CNBP 基因中的 CCTG 重复扩增引起的，该扩增包含 75 至 >11,000 个单位，具有广泛的嵌合性，因此对完全扩增的等位基因进行测序具有挑战性。为了克服这些限制，我们使用无 PCR 的 Cas9 介导纳米孔测序在 9 名 DM2 患者的单核苷酸水平上表征了 CNBP 重复扩增。使用此策略可以精确评估正常和扩增等位基因的长度，与传统方法一致，并揭示了嵌合性的程度。我们还对整个 ~50 kbp 的扩增进行了测序，这在 DM2 或任何其他重复扩增疾病中都是前所未有的。我们的方法精确地计算了重复次数并确定了短中断和不间断等位基因的重复模式。有趣的是，在扩增的等位基因中，只有两个 DM2 样本具有预期的纯 CCTG 重复模式，而其他七个样本在 3 ' 端也呈现出 TCTG 阻断，这在 DM2 患者中以前从未报道过，但在此通过正交方法得到证实。所展示的方法同时确定了重复长度、结构/基序和体细胞嵌合程度，有望改善 DM2 的分子诊断并实现更准确的基因型-表型相关性，从而在临床试验中更好地对 DM2 患者进行分层。
使用合成的同源供体构建体进行 CRISPR 介导的同源重组，为果蝇基因标记提供扩展工具包
摘要 之前，我们描述了大量果蝇菌株，每个菌株都携带一个人工外显子，其中包含一个基于 CRISPR 介导的同源重组插入目标基因内含子中的 T2AGAL4 盒。这些等位基因可用于多种应用，并且已被证明非常有用。最初，基于同源重组的供体构建体具有较长的同源臂（>500 bps），以促进大型构建体（>5 kb）的精确整合。最近，我们表明，供体构建体的体内线性化使得能够使用短同源臂（100-200 bps）将大型人工外显子插入内含子中。较短的同源臂使得商业合成同源供体成为可能，并最大限度地减少了供体构建体生成的克隆步骤。不幸的是，大约 58% 的果蝇基因缺乏适合所有注释异构体中人工外显子的编码内含子整合。在这里，我们报告了新构建体的开发，这些构建体允许用 KozakGAL4 盒替换缺乏合适内含子的基因的编码区，从而产生与目标基因类似地表达 GAL4 的敲除/敲入等位基因。我们还开发了定制载体骨架，以进一步促进和改善转基因。在包含目标基因 sgRNA 的定制质粒骨架中合成同源供体构建体，无需注射单独的 sgRNA 质粒，并显著提高了转基因效率。这些升级将使几乎所有果蝇基因都能靶向，无论外显子-内含子结构如何，成功率为 70-80%。
更新并扩展了小型企业统计数据
本文介绍了 2012 年至 2017 年按行业和企业规模划分的工资、就业和总产出的最新估计值。这些估计值在两个方面扩展了美国经济分析局 (BEA) 以前按企业规模划分的估计值。首先，我们将规模类别分组的数量从 5 个增加到 8 个。具体来说，我们将小型企业类别（员工人数少于 100 人）分为四个子类别：非常小（员工人数为 0-9 人）、小型 1（员工人数为 10-19 人）、小型 2（员工人数为 20-49 人）和小型 3（员工人数为 50-99 人）。我们还扩展了大型企业的详细程度，将该类别分为三个子类别：大型 1（员工人数为 500-999 人）、大型 2（员工人数为 1,000-4,999 人）和非常大（员工人数为 5,000 人或以上）。其次，我们将行业细节从大约 20 个行业（或 2 位北美行业分类系统 (NAICS) 代码）扩展到 63 个行业，与 3 位 NAICS 代码保持一致。完整的估算值可在 BEA 的小型企业网站上找到。