具有人IPSC衍生细胞类型的三维(3D)球体已成为一种有希望的药物筛查和疾病模型的体外模型系统。最近的出版物表明,IPSC衍生的皮质球体具有更大的“大脑般”复杂性,并且是HTS的强大测定平台。A.示意图,用于设计自己的ICELL神经球,用于“脑中的大脑”研究; B.细胞在ULA板上自组装,在24-28小时内形成3D结构; C.来自25K细胞输入的神经球直径约为400 µm。D. 384W中的图像,在incucyte上,带有掩模用于分析(黄色)或cal6染料; E.具有APOE 4/4细胞的AD疾病模型产生峰值计数较低和幅度较高的Ca2+痕迹。已知药物的治疗可以逆转表型。F. GFP-Microglia是优化共培养的有用工具;但是,并非所有条件都支持纳入MGL;一旦进入,该模型对于神经炎症很有用。
小胶质细胞是大脑中的常驻免疫细胞,在驱动神经炎症(神经退行性疾病的标志)中起关键作用。可诱导的小胶质细胞样细胞已被开发为用于分子和治疗假说产生和测试的体外平台。然而,没有系统地评估这些细胞与原代人小胶质细胞的相似性以及它们对大脑原代细胞期望的外部提示的反应。在这项研究中,我们通过散装和单细胞RNA测序对市售人类诱导的多能干细胞(IPSC)衍生的小胶质细胞(IPSC)细胞进行了转录表征,以评估其与原发性人类小胶质细胞的相似性。为了评估其刺激反应性,用肝X受体(LXR)途径激动剂处理IMGL细胞及其以散装和单细胞RNA测序为特征的转录反应。批量转录组分析表明,IMGL细胞具有与新鲜分离的人类原代小胶质细胞相似的总体表达谱,并表达许多关键的小胶质细胞转录因子以及功能和疾病相关的基因。值得注意的是,在单细胞水平上,IMGL细胞表现出不同的转录亚群,代表了正常和患病的原发性小胶质细胞中存在的稳态和激活状态。用LXR途径对IMGL细胞进行处理,激动剂会诱导脂质代谢和细胞周期的牢固转录变化。在单细胞水平上,我们观察到稳态和活化状态和激活状态的细胞亚群之间的响应异质性以及反应散装的表达会变化为其相应的单细胞态。总之,我们的结果表明,IMGL细胞表现出复杂的转录曲线和反应性,让人联想到体内小胶质细胞,因此代表了神经变性中治疗性发育的有希望的模型系统。
1。研究中心,中国518107的深圳市孙子大学第七附属医院; 2。干细胞生物学和组织工程中心,干细胞和组织工程的主要实验室,教育部,孙子森大学,广州,510080,中国; 3。宗山眼科中心,太阳森大学,广州,510060,中国; 4。内分泌学系,中国510080的广州太阳YAT-SEN大学的第一家附属医院; 5。国家 - 古旺冈联合工程实验室,用于诊断和治疗血管疾病,第一家附属医院,太阳Yat-Sen University,广州,中国510080; 6。生命科学学院,科学院科技大学,悉尼大学,ULTIMO,新南威尔士州2007年,澳大利亚。†同等贡献 *通讯副教授,钦朱耶,科学研究中心,中国广东的深圳市孙子森大学第七附属医院。电子邮件:yichj@mail.sysu.edu.cn,王王王博士,中国广东的深圳市太阳Yat-Sen University Sun Yat-Sen大学科学研究中心。 电子邮件:wangjch38@mail.sysu.edu.cn电子邮件:yichj@mail.sysu.edu.cn,王王王博士,中国广东的深圳市太阳Yat-Sen University Sun Yat-Sen大学科学研究中心。电子邮件:wangjch38@mail.sysu.edu.cn电子邮件:wangjch38@mail.sysu.edu.cn
研究文章 | 疾病的神经生物学 来自患有功能获得和丧失的 SCN2A 发育性和癫痫性脑病的患者的 iPSC 衍生神经元中的独特体外表型 https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.0692-23.2023 收到日期:2023 年 4 月 17 日 修订日期:2023 年 11 月 7 日 接受日期:2023 年 11 月 9 日 版权所有 © 2023 作者
图 2:使用核转染提供的 Cas9-mRNA 核酸酶、合成 sgRNA 和 ssDNA 寡核苷酸修复模板对 iPSC 进行基因编辑不会对 iPSC 形态造成干扰,可用于对基因组进行微小改变。A) 核转染后 48 小时拍摄的相位图像。比例尺为 100 μm。BC) 分析 LMNA 基因座 (B) 和 MYH7 基因座 (C) 中具有指定所需编辑 (蓝色) 或不需要的 INDEL (灰色) 的总 NGS 测序读数百分比。
作者:Hiramoto T、Inaba H、Baatartsogt N、Kashiwakura Y、Hayakawa M、Kamoshita N、Nishimasu
摘要Cockayne综合征是一种罕见的遗传性常染色体隐性疾病,其特征是不同的神经系统痛苦。但是,对于CS患者的大脑发育知之甚少。,我们利用Cockayne综合征B蛋白(CSB)产生了神经球和脑类器官,缺乏诱导的多能干细胞,这些干细胞来自两名患者,这些干细胞来自两名患者,具有不同严重性的CS和健康对照。使用RNA-SEQ和生物信息学分析探索了两个发育时间点的转录组,以鉴定两名CS患者常见的生物学失调,与对照相比。CSB缺陷型神经球显示了VEGFA-VEGFR2信号通路,囊泡介导的运输和头部发育的上调。CSB缺陷式脑器官表现出脑发育,神经元投射发育和突触信号的下调。我们进一步确定了对两个时间点共有的类固醇生物合成的上调,特别是胆固醇生物合成分支的上调。我们的结果提供了对CS患者神经发育失调的见解,并加强了CS的理论,即CS不仅是神经退行性的,而且是神经发育障碍。
建议2.2.1:“鉴于人类胚胎文化的进步以及此类研究的潜力提供有益的发现以促进人类的健康和福祉,ISSCR呼吁国家学院,学术社会,研究授予机构和监管机构与社会有关的社会和社会挑战,并在社会中领导社会挑战,并允许在社会中进行社会的挑战,并允许在社会中进行社会挑战。专业的科学和道德监视过程可以检查14天以上的文化是否是必要的,并且在这种情况下,必须保证用于实现研究目标的胚胎的数量