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神经退行性疾病的治疗方法仍然相当有限,包括额颞叶痴呆 (FTD) 和肌萎缩侧索硬化症 (ALS),这强调了对更深入的机制洞察和疾病相关模型的需求。开发传统的敲除和转基因小鼠需要大量的时间和资金,这阻碍了我们开发遗传风险因素、疾病修饰剂和其他 FTD/ALS 相关靶点的新型疾病模型的能力。为了克服这些限制,我们生成了一种新型 CRISPRi 干扰 (CRISPRi) 敲入小鼠。CRISPRi 使用催化死亡形式的 Cas9,与转录阻遏物融合以敲低蛋白质表达,然后引入针对目的基因的单个引导 RNA。为了验证该模型的实用性,我们选择了 TAR DNA 结合蛋白 (TDP-43) 剪接靶点 stathmin-2 (STMN2)。由于 TDP-43 活性丧失,STMN2 RNA 在 FTD/ALS 中下调,并且 STMN2 缺失被认为在 ALS 发病机制中发挥作用。STMN2 功能丧失与 FTD 的关系尚未确定。我们发现与对照组相比,家族性 FTD 病例中的 STMN2 蛋白水平显著降低,这表明 STMN2 耗竭可能与 FTD 的发病机制有关。在这里,我们提供了概念证明,即我们可以同时敲低 Stmn2 并表达 9 号染色体开放阅读框 72 ( C9ORF72 ) 基因中的扩增重复序列,成功复制 C9 相关病理的特征。有趣的是,Stmn2 的耗竭对二肽重复蛋白 (DPR) 的表达或沉积没有影响,但显著减少了磷酸化 Tdp-43 (pTdp-43) 内含物的数量。我们认为,我们的新型 CRISPRi 小鼠提供了一种多功能且快速的方法来沉默体内基因表达,并提出该模型将有助于了解孤立基因的功能或在其他神经退行性疾病模型的背景下的基因功能。
特别是,最近使用两种理论方法研究了N 2 + O(3 P)系统中的非弹性散射。首先,一种无限级突然(iOS)方法,21,22是一种近似量子方法,用于描述早期实验工作中观察到的散射横截面的振荡。9接下来,量子经典计费理论,其中仅通过量子力学描述了振动运动,而旋转和翻译的自由度则经过经典处理,23,24用于确定振动激发n 2(v = 1)的震荡速率(v = 1)碰撞到地面振动状态,与O(3 p)相撞。这个过程在上层大气中很重要,在上层大气中,原子氧代表了分子氮之后的第二个主要物种,因此在能量传递过程中起着关键作用(例如,在航天器或超音速飞机表面附近的高温冲击波中)。25–27
欧洲议会将于5月II日投票,第二次报告有关影响欧盟国家选举和其他民主进程的外部企图。该报告由第二个外国干预委员会(ING2)编写,遵循外国干预特别委员会在欧盟所有民主进程的特别委员会的工作,包括虚假信息(INGE),并提出建议,以解决在2024年欧洲大选中确定的机构和规范差距。背景外国干预和操纵(包括虚假信息)已被确定为对欧盟及其直接社区(西巴尔干和东部伙伴关系国家)以及全球安全和稳定的迅速发展的政治和安全挑战。在没有普遍同意的欧盟定义的情况下,外国对欧盟的干预被广泛理解为在欧盟和成员国的民主和政治进程中,外国大国的任何非法干预。这意味着在任何级别上影响他们的决策,并对政治过程的价值观,程序和合法性产生负面影响。根据查塔姆众议院的一项研究,包括外国权力在政治或政府制度中的秘密或强制性干预,例如为海外政权工作或在海外政权影响下工作的政客和官员;对政治制度的影响,例如滥用游说体系,腐败,间谍,网络攻击;通过在线虚假信息和操纵运动对公众参与或观点的操纵影响。外国干预可以由州或非国家行为者进行,并在合法性和非法性之间的界面中运作,利用国内和外国参与者之间的模糊界限。虽然外国干预行动一直是地缘政治剧本的一部分,但新技术和互联网文化已经重塑了他们的规模,性质和潜在的影响力,即使是成熟民主国家的风险,正如2016年美国大选,法国的2017年大选和共同的“ Infodemic”所证明的那样。大型语言模型(LLMS)(例如CHAT GPT)的最新开创性人工智能(AI)的发展可能会进一步增强外国干涉操作的覆盖范围和有效性,以指数式(但尚不清楚)的方式。俄罗斯对乌克兰的侵略战争以及随后的地缘政治格局的两极分化提高了赌注,以及对欧盟及其他地区民主进程的威胁水平。“一切的武器化” - 食品,能量,移民,人权,科学和历史记忆 - 已在信息领域转移和利用,成为外国干预工具包的一部分。虽然俄罗斯和中国是最著名的外国干预来源,但它们并不是唯一的。众所周知,超过80个国家通过社交媒体有意和系统地传播虚假信息,俄罗斯准军事瓦格纳集团等非国家参与者在外国干预和虚假信息(尤其是在非洲)中也发挥了重要作用。
构成梭菌属的革兰氏阳性、产芽孢、专性厌氧厚壁菌种具有广泛的原料消耗能力并产生增值代谢产物,但基因操作困难,限制了它们的广泛吸引力。CRISPR-Cas 系统最近已应用于梭菌种,主要使用 Cas9 作为反选择标记与基于质粒的同源重组结合。CRISPR 干扰是一种通过精确靶向核酸酶缺陷型 Cas 效应蛋白来降低特定基因表达的方法。在这里,我们开发了一种基于 dCas12a 的 CRISPR 干扰系统,用于抑制多种中温梭菌种的转录基因。我们表明,与源自其他细菌的 CRISPR Cas 系统相比,由于梭菌种中的 GC 含量低,基于新凶手弗朗西斯菌 Cas12a 的系统具有更广泛的适用性。我们证实,丙酮丁醇梭菌中靶基因的转录水平降低了 99% 以上,巴氏梭菌中靶基因的转录水平降低了 75% 以上。我们还通过使用单个合成 CRISPR 阵列证实了多重抑制,靶基因表达降低了 99%,并阐明了其表达降低的独特代谢特征。总体而言,这项工作为无需基因编辑的高通量遗传筛选奠定了基础,而基因编辑是梭菌群落当前使用的筛选方法的一个关键限制。
1 互联网关闭被定义为“故意破坏互联网或电子通信,使其无法访问或实际上无法使用,对于特定人群或地点,通常是为了控制信息流。”互联网关闭是指某人(通常是政府)故意破坏互联网或移动应用程序以控制人们的言论或行为。参见 Access Now (2020)。不再关闭互联网!让我们#KeepItOn。立即访问。2022 年 5 月 11 日检索自 https://www.accessnow.org/no-internet-shutdowns-lets-keepiton/ 。
抽象动物可以连续学习不同的任务以适应不断变化的环境,因此具有有效应对任务间干扰的策略,包括主动干扰(Pro-I)和追溯干扰(Retro-I)。已知许多生物学机制有助于学习,记忆和忘记一项任务,但是,仅当学习顺序不同任务的理解相对较少时,才涉及的机制。在这里,我们在果蝇中两个连续的关联学习任务之间剖析了Pro-I和retro-I的分子机制。pro-i比retro-i对任务间隔(ITI)更敏感。它们在简短的ITI(<20分钟)中一起出现,而在ITI中只有Retro-I在20分钟以后保持显着。急性过表达的开瓶器(CSW),一种进化保守的蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2,在蘑菇体(MB)神经元中降低了Pro-I,而CSW急性敲低CSW ADACERBATES PRO-I。进一步发现CSW的这种功能依赖于MB神经元的γ子集和下流RAF/MAPK途径。相比之下,操纵CSW不会影响复古I和单个学习任务。有趣的是,调节retro-i的分子对Rac1的操纵不会影响Pro-I。因此,我们的发现表明,学习不同的任务连续触发不同的分子机制来调节主动和追溯干扰。
此预印本的版权所有者此版本于 2023 年 3 月 12 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.03.10.23286967 doi: medRxiv preprint
核苷酸切除DNA修复(NER)去除各种基因组病变。ner可以通过两种不同的途径启动:全局基因组修复(GG-NER)和转录耦合修复(TC-NER)。随后两种途径都将涉及转录因子IIH(TFIIH)复合物和中央支架蛋白XPA募集的通用途径汇入,该途径可实现完整的复合体组装。尽管认为损害识别后的下游步骤是相同的,但我们确定了XPA中相关的疾病突变,该突变严重削弱了与TFIIH复合物的相互作用,从而使TC-NER受到比GG-NER更大的影响。对GG-NER和TC-NER的这种差异影响提出了从病变识别到NER两种途径的双重切口的过渡中意外的机械差异。
I. 目的 A. 所有与解决风力涡轮机雷达干扰问题有关的联邦机构应在有机会时制定共同愿景和框架来协调活动。本协议备忘录 (MOA) 取代了 2014 年的谅解备忘录,即成立风力涡轮机雷达干扰缓解工作组 (WTRIM),并建立了一个总体框架来鼓励签署机构(各方,或单独称为一方)之间的合作与协调。本备忘录的目的是确定和开发减轻风力涡轮机项目对各方管辖范围内(包括近海地区)关键雷达任务的潜在技术和操作影响的方法。跨机构努力的目标包括: