已经表明,单甲基化的帽结构在核事件中起着重要作用。盖结构与增强前mRNA剪接有关。最近,还建议这种结构促进RNA从细胞核到细胞质的转运。我们先前已经从HELA细胞核提取物中鉴定出并纯化了8OKD核盖结合蛋白(NCBP),这可能会介导这些核活性。在本报告中,我们描述了编码NCBP的互补DNA(cDNA)的克隆。确定了NCBP的部分蛋白质序列,并从HELA cDNA文库中分离出NCBP的全长cDNA。该cDNA编码了790个氨基酸的开放阅读框,其计算的分子质量为91,734 daltons,其中包含大多数确定的蛋白质序列。但是,蛋白质序列与任何已知蛋白质都没有显着同源性。转染实验表明,在HELA细胞中瞬时表达的表位标记的NCBP仅在核质中定位。使用截短的NCBP cDNA进行的类似实验表明,这种核定位活性由N末端70氨基酸区域赋予。
1。t 2024数字反映了截至2024年12月31日的年度提供的资源。2。2025个数字是准的,反映了我们签订的权力。实际数字可能会根据资源可用性而有所不同。我们每年将在明年8月1日之前以历史性产品内容的形式向您报告您购买的电力的实际资源组合。3。新的可再生能源来自过去15年中首次开始商业运营的一代设施。该产品包括从过去15年内开始商业运营的工厂的生成,或者被Green-E Energy批准用于扩展使用。
我们感谢Ben Humphreys,Gaya Amarasinghe,Daisy Leung和Ting Wang的评论和建议,Robert Fulton,Catrina Fronick,Paul Cliften提供了技术帮助。这项工作得到了Siteman Cancer Center的共享资源投资计划的部分支持。
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图1。城市峡谷的概念示意图代表CLMU中的城市景观(改编自Oleson等,2008a)。特性是颜色编码的:蓝色用于辐射,橙色用于热和绿色的形态学。请注意,屋顶和壁厚(尽管与城市形态相关)被认为是热特性,因为它们主要用作加权因素,以计算CLMU中峡谷表面的传导通量(Lawrance等,2018; Oleson等人,2010年)。165
摘要对第三极的当前和未来水周期的准确理解至关重要,因为该地区作为下游人口稠密地区的水塔起着作用。在复杂地形区域进行熟练气候评估的一种新兴而有希望的方法是公里尺度的气候建模。作为迈向第三极上此类模拟的基本步骤,我们提出了2019年10月至2020年9月的水文年度的千里规模区域模拟的多模型和多物理合奏。该合奏由由10个研究小组的国际联盟进行的13个模拟组成,配置了覆盖所有第三极区域的水平网格间距,范围为2.2至4 km。这些模拟是由ERA5驱动的,并且是协调的区域气候缩减实验旗舰试验研究的一部分。将模拟与可用的网格和原位观测和遥感数据进行了比较,以评估模型集成的性能和传播,与寒冷和温暖的季节的驾驶重新分析相比。尽管在该区域的网格降水数据集之间的巨大差异使整体评估受到阻碍,但我们表明,与ERE5相比,许多温暖的季节降水指标改善了合奏,包括大多数湿日和小时统计数据,并且在两个季节的湿法范围内都增加了价值。因此,合奏将为对该遥远但重要区域的氢化气候的过程的未来改进提供宝贵的资源。
我们现有的输电线没有足够的容量来容纳所有新能源,主要是海上风能,这些能源将在未来十年及以后接入电网。我们的切斯特菲尔德至威灵顿计划将允许清洁能源接入电网并输送到需要它的家庭和企业。
是作者/资助者,他已授予Medrxiv的许可证,以永久显示预印本。(未通过同行评审证明)预先印刷此版本的版权持有人于2023年11月30日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.09.19.19.23295806 doi:medrxiv preprint
1 CRISP-HR Therapeutics,加利福尼亚州圣卡洛斯 94070 摘要 CRISPR 支持的细胞和基因疗法有可能彻底改变遗传医学领域。然而,由于当前工具和技术的局限性,绝大多数罕见病仍然无法治愈。到目前为止,大多数矫正治疗方法仅限于逐个突变的方法,其中 HDR 或较新的技术(如碱基编辑或主要编辑)一次重写小片段 DNA(~1-100 bp)。虽然这些方法很强大,但短编辑窗口(相对于人类基因的大小)在经济和/或技术上与大多数罕见疾病突变谱不兼容。在这里,我们首次证明 CRISPR/Cas9 可用于通过我们称为“长距离重写”的无选择过程同时“重写”人类基因组的 7kb+ 部分。长距离重写方法与多种核酸酶、细胞类型和基因组位点兼容,并且可以与基于双链断裂 (DSB) 和非 DSB 的方法一起使用。简介 CRISPR 和相关技术已被证明在从基础研发到工业以及最近的治疗应用的各个领域都非常有用。CRISPR/Cas9 系统最基本的用途是针对基因组中的特定 DNA 片段并创建小的插入或删除 (INDEL) 来破坏各种遗传元素(蛋白质编码序列、启动子/增强子、剪接位点等)。1–4 虽然这是一种强大的技术,但由于“破坏”基因可产生治疗益处的疾病非常有限,因此该方法在治疗应用方面受到限制。此外,人们越来越担心通过有害的双链断裂 (DSB) 介导的编辑产生的不良局部和全局副作用。5,6 因此,人们一直在努力开发工具和技术,以实现更可编程和更复杂的编辑,同时减少不良副作用。这些努力促成了各种具有扩展功能的 Cas9 融合蛋白的开发,例如 Base 和 Prime 编辑器 7,8 、CRISPRa 和 CRISPRi 9,10 、旨在操纵内源性修复途径选择的 Cas 蛋白工程 11-13 ,以及无数其他功能 14 。这些努力使得我们能够选择性地替换特定碱基、将任何碱基交换为另一个碱基、在不进行基因组修饰的情况下调节基因表达,以及操纵
真核细胞中当前的基因编辑方法仅限于单基碱基编辑或小的DNA插入和缺失,并且在大型DNA货物的交付时仍会受到意外永久效应和重大挑战的影响。在这里,我们描述了剪接编辑,这是一个可通过可编程插入或替换大RNA段来校正基因转录本的可推广平台。通过将CRISPR介导的RNA靶向与内源性细胞RNA刺激机制相结合,剪接编辑可以有效,精确和可编程的大规模编辑基因靶标,而无需DNA裂解或刺激。RNA测序和剪接蛋白质产物的测量确认,剪接编辑可实现有效的特定靶向RNA和蛋白质校正。我们表明,基于在这项工作中发现和表征的新型微型RNA靶向CRISPR-CAS系统的剪接编辑器可以包装以有效地传递到人类细胞,并影响多个目标和细胞系之间的不同类型的编辑。通过在单个可逆步骤中同时编辑数千个基础,剪接编辑可以扩大具有较大等位基因多样性的单基因疾病的可治疗疾病人群,而无需永久的DNA编辑效应。