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Oreochromis niloticus卵的人工孵育
Oreochromis niloticus卵在其人工孵育过程中的抽象胚胎和幼虫发育阶段在29±0.11°C的透明式水过滤器孵育罐中进行。胚胎开发被监测和捕获，以定义从受精卵以45×放大倍数下在数字显微镜下将蛋黄囊的特征。明亮的黄色椭圆形鸡蛋描述了在第1天观察到刚受肥的鸡蛋。在第3天发育的背侧发现了杆状结构的发展。胚胎的孵化发生在第5天，而在第12天，出现了发达的游泳炸煎炸，嘴巴，眼睛和鳍出现。这项研究对于对遗传操纵技术感兴趣的罗非鱼利益相关者来说很有价值，以改善尼罗花的生产。
果蝇幼虫大脑中高度不稳定的mRNA编码了动态调节的转录因子
每种 RNA 的水平取决于其产生率和衰变率之间的平衡。尽管先前的研究已经测量了组织培养和单细胞生物中整个基因组的 RNA 衰变，但很少有实验是在完整的复杂组织和器官中进行的。因此，尚不清楚在培养细胞中发现的 RNA 衰变决定因素是否在完整组织中保留，以及它们在邻近细胞类型之间是否不同以及在发育过程中是否受到调节。为了解决这些问题，我们通过使用 4-硫尿苷对整个培养的果蝇幼虫大脑进行代谢标记，测量了全基因组的 RNA 合成和衰变率。我们的分析表明，衰变率范围超过 100 倍，并且 RNA 稳定性与基因功能有关，编码转录因子的 mRNA 比参与核心代谢功能的 mRNA 稳定性低得多。令人惊讶的是，在转录因子 mRNA 中，更广泛使用的转录因子与在发育过程中仅短暂表达的转录因子之间存在明显的界限。编码瞬时转录因子的 mRNA 是大脑中最不稳定的。这些 mRNA 的特点是大多数细胞类型中的表观遗传沉默，如其富含组蛋白修饰 H3K27me3 所示。我们的数据表明存在针对这些瞬时表达的转录因子的 mRNA 不稳定机制，从而可以快速高精度地调节它们的水平。我们的研究还展示了一种测量完整器官或组织中 mRNA 转录和衰减率的通用方法，为了解 mRNA 稳定性在调节复杂发育程序中的作用提供了见解。
秀丽隐杆线虫幼虫发育过程中miRNA积累的动力学
抽象在时间和空间控制的积累中是microRNA（miRNA）在各种发育过程中的功能的基础。在秀丽隐杆线虫中，这是通过颞型mirnas lin-4和let-7的e x增强的，但是对于大多数miRNA，d e v elopmental e xpres-sion模式仍然很差。的确，e x ppermimentserv ed long fall liv es ma y限制了可能的动力学。在这里，我们在秀丽隐杆线虫中介绍了高胚胎发育的miRNA表达。我们使用数学模型来探索潜在的机制。对于Let-7，我们可以通过节奏转录和通过RNA结合蛋白LIN-28对前体处理的节奏转录和特定阶段的调节结合来解释并实验确认。相比之下，Se v eral其他miRNA的动态不能仅通过调节生产率来解释。具体而言，示出了振荡转录和miR-235的振荡性转录和rh ythmic deca y rh ythmic积累，这是其他动物中miR-92的直系同源的。我们证明，miR-235和其他miRNA的衰变取决于EBAX-1，以前与目标指导的miRNA降解有关（TDMD）。综上所述，我们的结果提供了对动态miRNA衰变的见解，并建立了研究d v elopmental功能和作用于miRNA的调节机制的资源。
胚胎和幼虫暴露于丙酰亚苯甲酸酯中诱导斑马鱼模型的发育和长期神经毒性
对羟基苯甲酸酯是化妆品，加工食品和药物的防腐剂。最常见的对羟基苯甲酸酯之一（PRP）对中枢神经系统的有害影响尚不清楚，尤其是在发育过程中。在这项研究中，使用综合方法在斑马鱼模型中研究了PRP和长期神经毒性的神经发育作用。暴露于两种不同浓度的PRP（10和1000μg/L）的斑马胚，然后检查幼虫的行为表型（开放式行为，惊厥反应和昼夜节律节奏）和相关的脑标记（CYP19A1B，PAX6A，SHANK3A，SHANK3A和GAD1B）。在30 dpf和60 dpf的少年上还检查了脑功能不对称和thigmotaxis的长期行为和认知对社交性的影响。此外，在60 dpf斑马鱼的大脑中评估了蛋白质组学和基因表达分析。有趣的是，幼虫中的高剂量减少了thigmotaxis，并在少年中增加了低剂量。shank3a和gad1b基因的表达均被PRP浓度抑制，表明PRP对神经发育的可能影响和
探索欧洲鳗鱼幼虫（Anguilla anguilla）细菌群落组成和免疫基因表达与首次喂养饮食的关系
欧洲鳗鱼（Anguilla anguilla）是欧洲渔业和水产养殖中具有重要商业价值的物种，在圈养环境中关闭其生命周期的尝试仍处于开拓阶段。该物种的第一个喂养阶段的特点是孵化后 20 至 24 天之间的关键时期（dph），此时期与死亡有关，表明无法挽回。我们推测这个关键时期可能还与幼虫-细菌相互作用和幼虫的免疫状态有关。为了验证这一点，从内源喂养结束（9 dph）到 28 dph，对三种实验性首次喂养饮食（饮食 1、饮食 2 和饮食 3）的反应，探索了孵化场生产的幼虫的细菌群落组成以及免疫和应激相关基因的表达。还跟踪了水中细菌群落组成的变化。结果表明，幼虫应激/修复机制在此关键时期被激活，以 hsp90 基因表达上调为标志，与所喂食的食物无关。同时，在所有食物组中都观察到向潜在有害幼虫细菌群落的转变。此时，观察到幼虫细菌群落的均匀性显著降低，并且属于潜在有害细菌属的几种扩增子序列变体更加丰富。这表明有害的幼虫-细菌相互作用可能与观察到的死亡率有关。在关键期之后，喂食食物 3 的幼虫的存活率最高。有趣的是，编码病原体识别受体 TLR18 和补体成分 C1QC 的基因在该组中上调，可能表明免疫能力更高，有助于更成功地处理在 22 日龄时主导幼虫细菌群落的有害细菌，最终导致与其他两组相比更好的存活率。
基于系统的基于图像的基于斑马鱼幼虫中复杂性状的遗传筛选
摘要具有数以千计的基因组关联研究对复杂特征鉴定的基因座，需要在体内模型系统中可靠，迅速推断大量候选基因的作用。基于F 0斑马鱼中的基于CRISPR/CAS9的功能屏幕代表这样的系统。然而，到目前为止使用的负面对照 - 包括加扰的指南RNA（GRNA），灭活的CAS9和假注射 - 不会引起与CRISPR/CAS9相同的细胞和有机反应，并且可能会加剧结论。在这里，我们表明，靶向KITA促进了成功的诱变，更高质量的成像数据以及病例和对照的有效分类的有效的光学预筛查。我们鉴定并测试了两个靶向具有类似高诱变效率和对色素作用的kita的GRNA，并且没有对心脏代谢性状的脱靶效应或主要影响。我们提出了几种方法，这些方法将得出有效的，公正的结论。
黑色士兵蝇（Hermetia Illucens）幼虫植物植物生长促进活动
Black Soldier fly ( Hermetia illucens ) larval (BSFL) frass was examined for its nutrient nitro- gen, phosphate and potassium (N:P 2 0 5 :K 2 O), phytohormone and biogenic amine content, its plant growth promoting activity, and screened to test the hypothesis that bacteria charac- teristic of the genus Enterococcus (present in the biome of decaying餐饮废物和幼虫的肠被BSFL排出。FRASS植物促进活性的促进活性是通过比较经过弗拉斯处理的土壤中的冬小麦浆果（Triticum aestivum）与未经处理（对照）土壤的生长的。n：p 2 0 5：k 2 o干物质平均水平，FRASS的生物胺和植物激素含量分别通过标准土壤分析，HPLC和HPLC/GC-MS方法确定。所有的浓度都太低，无法解释其植物生长促进活性。添加到土壤中的FRASS诱导了对照植物的空中质量增加11％，并且芽的长度增加了。在BEA（胆汁蛋白 - 阿戈尔）板上生长的肠球菌的许多菌落在直接从幼虫中检测到的frass板，这证实了可行的肠球菌从幼虫肠道中传递到其菌丝中的假设。由于以前已经将许多根瘤菌（包括肠球菌）确定为幼虫肠生物群的一部分在赋予其植物生长促进活性方面发挥作用。
肯尼亚西部霍马湾县灌溉区和非灌溉区细菌组成和水生栖息地代谢物对疟疾媒介幼虫可用性的影响
妊娠按蚊疟疾媒介依靠化学和物理（包括微生物）线索来选择优选的产卵栖息地。这项研究的重点是评估细菌组成和栖息地代谢物对灌溉和非灌溉潜在幼虫源中疟疾媒介幼虫可用性的影响。从霍马湾县灌溉和非灌溉地区的幼虫阳性和阴性栖息地采集水样。对从水样中培养的细菌进行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 以进行物种鉴定。从菌落中提取 DNA，并进行聚合酶链式反应 (PCR) 和测序。最后，确定幼虫阳性和阴性栖息地的代谢物组成。MALDI-TOF MS 结果显示，芽孢杆菌是从非灌溉区幼虫源中鉴定出的唯一属。在灌溉区，志贺氏菌为优势属（47%），大肠杆菌为丰富种（13/51）。在测序的分离株中，65% 为芽孢杆菌。分离出杀幼虫分离株短芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和深小芽孢杆菌，并将其与莫哈文芽孢杆菌、特基勒芽孢杆菌、粪类芽孢杆菌和农业短芽孢杆菌归为一类。有幼虫的灌溉区与无幼虫的灌溉区相比，粗脂肪（0.01%）和蛋白质含量（0.13%）降低。在灌溉区和非灌溉区，总叶绿素含量高的栖息地（1.12 μ g/g vs 0.81 μ g/g 和 3.37 μ g/g vs 0.82）都有幼虫存在。灌溉和非灌溉地区有幼虫的水生栖息地的糖浓度高于没有幼虫的栖息地；然而，相比之下，有幼虫的非灌溉地区的糖浓度高于灌溉地区的类似栖息地。此外，在灌溉和非灌溉地区含有幼虫的水生栖息地中发现了大量锰、钙和铜的浓度。这些结果允许对潜在的杀幼虫剂或杀虫剂进行前瞻性检查。
肠杆菌NK的杀虫蛋白对Galleria Mellonella幼虫的细胞免疫的影响
肠结核病产生能够在害虫中引起毒性的杀虫蛋白，但这些蛋白质的杀虫机制用于昆虫控制尚不清楚。为了阐明机制，通过腹膜内注射或喂食将纯化的杀虫蛋白来自E. cloacae nk的Mellonella幼虫。分别通过血细胞仪，膜联蛋白V-FITC/PI和UV-VIS SpectroPhotrophotomer计检测到血细胞的数量，免疫细胞中的凋亡和G. mellonella幼虫的多酚氧化酶（PO）活性。随着NK杀虫蛋白的侵袭时间的延长，梅洛尼氏菌幼虫中血细胞的数量显着降低（p <0.05），而血细胞的凋亡率增加。PO的活性显示出峰值下降的趋势，同时加深了黑素化反应。此外，血细胞的吞噬作用和涂料能力降低，腹膜内注射方法比喂养方法更有效。一起，大肠杆菌NK的杀虫蛋白抑制并破坏了梅洛内拉幼虫的细胞免疫反应，这表明在杀死宿主昆虫中起着重要作用。
果蝇中记忆电路的变形揭示了一种进化幼虫脑的策略
成年果蝇的抽象蘑菇体（MB）具有成千上万个肯尼因神经元的核心；早期出生的G类的轴突形成一个内侧叶，而后来出生的α'β”和αβ类形成内侧和垂直叶。幼虫仅用γ神经元孵化，并使用其γ神经元的幼虫特异性轴突分支形成垂直叶“ facsimile”。MB输入（MBIN）和输出（MBON）神经元将Kenyon神经元裂片分为离散的计算室。幼虫有10个这样的隔室，而成年人有16个。我们确定了定义10个幼虫室的32个Mbons和Mbins中的28个命运。随后将七个箱子纳入成人MB；他们的四个Mbins死亡，而12个Mbins/ Mbons重塑以在成人隔室中起作用。其余三个隔间是特定于幼虫的。在变形时，它们的MBIN/MBONS跨不同分化，将MB留给其他成人脑电路。成人垂直裂片是使用从成人特异性神经元池招募的Mbons/Mbins制成的。细胞死亡，隔室转移，跨差异和募集新神经元的结合导致没有通过变质维持幼虫mbin-mbon连接。在这个简单的层面上，我们没有发现从幼虫到成人的记忆痕迹的解剖基板。反差异神经元的成年表型代表其进化的祖先表型，而其幼虫表型是幼虫阶段的衍生象征。这些细胞主要出现在也产生永久MBIN和MBON的谱系中，这表明幼虫指定因子可以允许与出生或同胞身份相关的信息以幼虫的修改方式解释，以使这些神经元获得幼虫表型修饰。变形时这种因素的丧失允许这些神经元恢复其在成年人中的祖先功能。