价格 B0202S—T4 DNA 连接酶反应缓冲液 29.00 美元 27.84 美元 M0319L—耐热 5' App DNA/RNA 连接酶 336.00 美元 322.56 美元 E2610L—5' DNA 腺苷酸化试剂盒 50 次反应 563.00 美元 540.48 美元 M0486L—模板转换 RT 酶混合物 236.00 美元 226.56 美元 E5520S—NEBuilder HiFi DNA 组装克隆试剂盒 212.00 美元 203.52 美元 M0271L—快速加载 Taq 2X 预混液 277.00 美元 265.92 美元 R0176S--DpnI 77.00 美元 73.92 美元 N4040S—M13mp18 单链 DNA 50.00 美元$48.00 M2401S—ET SSB $190.00 $182.40 C3019H—10-beta 感受态大肠杆菌 (H. Eff) $269.00 $258.24 R0507S--ApaLI $77.00 $73.92 E2610S--5' DNA 腺苷酸化试剂盒 10 次反应 $140.00 $134.40 M0251S—T7 RNA 聚合酶 $75.00 $72.00 R0630S--AsiSI $80.00 $76.80 M0492L—Q5 高保真 2X 预混液 $868.00 $833.28 R3133M—SpeI-HF $331.00 $317.76 C3040H—NEB 稳定感受态大肠杆菌 381.00 美元 365.76 美元 M0530S—Phusion 高保真 DNA 聚合酶 131.00 美元 125.76 美元 E5360S—NEBExpress 无细胞大肠杆菌蛋白质合成系统 244.00 美元 234.24 美元 E2621S—NEBuilder HiFi DNA 组装主混合物 180.00 美元 172.80 美元 您可以随时通过 stockroom@utexas.edu 联系我们,查看任何特定商品的价格。
Wyckmans的Annemia贡献者,Judith Borsboom-范·伯登(Van Borden),何塞·罗德里格斯(JoséRodriguez),哈里安(Harian),圣约翰(St. Lyngstad's Ingfrid, Schwai Markus, Youth, Francesco Camilli, Deborah of Navarre, Macha Tomas, Clara Dvorakova, Irene Garophalo, Maria Hansen, Constantine Douka, Marjolein Cremor, Andrew Switzer, Federica Colombo, Leonardo of Cameli, Lantieri, Anna Chiara of Benedetti,塞西莉亚·马佐利(Cecilia mazzoli Janine Verever,Jarnette Deegan,Gerald Walsh,Reeves,Rosie Webb,
6 将 100 μl 或 200 μl 移液器调至 80 μl,然后上下移取整个体积至少 10 次以充分混合。快速旋转以收集管壁上的所有液体 注意:NEBNext Ultra II Ligation Master Mix 粘稠。应注意确保充分混合连接反应,因为混合不完全会导致连接效率降低。少量气泡的存在不会影响性能。
剩余的 pKLAC2 载体 DNA。克隆的基因必须不含 SacII 位点(或 BstXI 位点,如果用 BstXI 消化)才能产生正确的表达片段。无需从剩余的 pKLAC2 载体 DNA 中纯化表达片段
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
NEB 成员包括 Timothy Orton(Nous Group 的执行负责人兼首席执行官)以及来自 Nous Group 的一系列职能领导和负责人。NEB 主要由在 Nous Australia 工作的人员组成,因为 Nous Australia 为 Nous Group 的其他实体履行大部分行政和支持职能,包括提供财务、法律、营销和人力资源协助。但是,NEB 包括来自 Nous UK 和 Nous Canada 的代表。CCG、CS、CC、CCUK、CCC 和 HPA 在 NEB 中的代表是 Nous Group 的执行负责人兼首席执行官。
库由(a)10 ng和(b)200 ng的人gdna(Na19240)用6个PCR循环稀释为1:3,并在挂接的HSD1000屏幕截图上运行。图4.1.b显示了在晚期PCR周期下200 ng样品的非线性扩增阶段导致的上部标记上方的峰(由红色箭头指示)。尽管在非线性扩增阶段产生的分子是可行的,但它们在屏幕映射上的迁移速度的不同迁移速度会导致文库浓度的定量不准确。在这种情况下,我们建议使用400 bp或预期的库大小来测量纳米体或疯子上的库浓度,以将浓度值转换为纳米尔。以下方程可用于将浓度从ng/μl转换为nm:[(ng/μl中的库浓度)/(bp中的660 g/mol x库尺寸)] x 10 6 = nm中的浓度。
a。《发育障碍法院命令的监护权法》,内布拉邦。修订版Stat。§§71-1101至71-1134,概述了DD患者可以根据法院命令的监护权和DDD的要求,以根据法院命令的监护提供服务。 b。 NEB。 修订版 Stat。 §§68-1530至68-1533概述c。 《成人保护服务法》,内布拉斯棒 修订版 Stat。 §§28-348至28-387,以及《 NEB》的《儿童保护与家庭安全法》。 修订版 Stat。 §§28-710至28-727,定义对儿童和弱势成年人的虐待,忽视和剥削,并指定强制性的虐待,忽视和剥削的记者。 d。 NEB。 修订版 Stat。 §§30-2601至30-2628概述了针对未成年人的法律监护权和无行为能力的成年人,包括监护人的职责和权威,需要培训,每年向法院提交的文件以及法院诉讼。§§71-1101至71-1134,概述了DD患者可以根据法院命令的监护权和DDD的要求,以根据法院命令的监护提供服务。b。 NEB。修订版Stat。§§68-1530至68-1533概述c。 《成人保护服务法》,内布拉斯棒 修订版 Stat。 §§28-348至28-387,以及《 NEB》的《儿童保护与家庭安全法》。 修订版 Stat。 §§28-710至28-727,定义对儿童和弱势成年人的虐待,忽视和剥削,并指定强制性的虐待,忽视和剥削的记者。 d。 NEB。 修订版 Stat。 §§30-2601至30-2628概述了针对未成年人的法律监护权和无行为能力的成年人,包括监护人的职责和权威,需要培训,每年向法院提交的文件以及法院诉讼。§§68-1530至68-1533概述c。 《成人保护服务法》,内布拉斯棒修订版Stat。§§28-348至28-387,以及《 NEB》的《儿童保护与家庭安全法》。 修订版 Stat。 §§28-710至28-727,定义对儿童和弱势成年人的虐待,忽视和剥削,并指定强制性的虐待,忽视和剥削的记者。 d。 NEB。 修订版 Stat。 §§30-2601至30-2628概述了针对未成年人的法律监护权和无行为能力的成年人,包括监护人的职责和权威,需要培训,每年向法院提交的文件以及法院诉讼。§§28-348至28-387,以及《 NEB》的《儿童保护与家庭安全法》。修订版Stat。§§28-710至28-727,定义对儿童和弱势成年人的虐待,忽视和剥削,并指定强制性的虐待,忽视和剥削的记者。d。 NEB。修订版Stat。§§30-2601至30-2628概述了针对未成年人的法律监护权和无行为能力的成年人,包括监护人的职责和权威,需要培训,每年向法院提交的文件以及法院诉讼。
未显示。酶以粗体类型显示,并以常规类型显示具有两个限制位点的酶。所有NEB限制酶的位置位置可以在NEB网站上找到(选择技术参考> DNA序列和地图)。限制位点坐标是指每个识别序列中最高链上最高基数的位置。