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1。**人类多能性干细胞的生物反应器悬浮液的强度。支持公社。2020; 3：492。如果（2020）：5.3，Q1，引用：20。2。* Johnson AA，NS Torosin，Mn Shockhire，TL Cell。<潜水
人类胚胎的植入前开发
在2017年，Niakan和她的同事发表了一篇具有里程碑意义的论文，报道了在人类胚胎中首次使用CRISPR-Cas9基因组编辑，其唯一目的是理解人类发展的基本原理（Fogarty等，2017）。作为原理证明，Niakan选择专注于胚泡发育，淘汰了多能转录因子Oct4，在小鼠中需要指定内部细胞质量。为了使用尽可能少的人类胚胎，该组在诱导型人ES细胞系统中鉴定了有效的OCT4靶向引导RNA，并使用小鼠Zygotes鉴定了优化的微注射条件。然后，他们能够有效，专门针对受精的人卵中编码OCT4的基因。
人类多能干细胞的细胞培养矩阵
由Nucleus Biologics开发和制造的 VITRONECTIN XF™是一种定义的，无XENO的细胞培养基质，支持HPSC的生长和分化。 Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中，细胞群体和可重复的结果。 人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态，而无需适应步骤（图1）。 与温和的细胞解离试剂（GCDR;目录＃07174）或RELESR™（目录＃05872）搭配以维持高质量的培养物。VITRONECTIN XF™是一种定义的，无XENO的细胞培养基质，支持HPSC的生长和分化。Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中，细胞群体和可重复的结果。人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态，而无需适应步骤（图1）。与温和的细胞解离试剂（GCDR;目录＃07174）或RELESR™（目录＃05872）搭配以维持高质量的培养物。
玛丽亚·皮亚·科斯玛（Maria Pia Cosma）教授的部门研讨会。 ...
在细胞生理学中解剖3D-染色质组织是研究的关键领域。通过使用定量的超分辨率纳米镜检查，我们确定了一种新型的染色质纤维组件及其与幼稚多能性的关系。核小体以各种大小的组（控制基因功能的核小体离合器）排列。我们最近可视化了人类细胞中粘蛋白介导的环的结构，并发现转录依赖性超螺旋控制循环形成和3D基因组组织。此外，通过结合成像和基因组方法，我们设计了MIOS，这是一种强大的综合策略，可以模拟核小体分辨率下关键多能基因的折叠。总体上，超分辨率显微镜结合了基因组和建模方法，使我们能够剖析转录介导的超串联的功能作用和基因的核小体水平结构，这最终是控制基因活性的关键特征。
Cellartis® iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle 和单细胞克隆系统用户手册
一旦 Cas9/sgRNA RNP 复合物通过囊泡递送并恢复细胞，就必须分离单细胞并将其扩增成克隆细胞系，以便分离和筛选目标基因型（图 3）。传统上，从作为菌落生长和传代的 hiPS 细胞建立克隆群效率低、困难且耗时；通常会导致细胞死亡或过早分化。然而，Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 囊泡和单细胞克隆系统的细胞培养组件包含一个确定的培养系统（Cellartis DEF-CS™ 培养系统，由基础培养基、涂层和添加剂组成），可有效进行单细胞克隆和扩增编辑的 hiPSC 克隆。 DEF-CS 培养系统是一种基于单层的培养系统，它通过允许单细胞传代、促进接种单细胞的存活和进一步扩增以及保留这些细胞的多能性，克服了基于菌落的培养所面临的挑战。
研究文章的抑制烤面包酮处理...
乳腺癌是由于复发的高发病率而导致全球妇女癌症死亡率的主要原因之一。常规的乳腺癌治疗包括手术，放疗，化学疗法和荷尔蒙治疗（Ferlay等，2015； Nounou等，2015）。据报道（Al-Ejeh等，2011； Wicha，2008），乳腺癌的复发是由次要癌细胞（称为癌症干细胞（CSC））的少数群体引发的。CSC已被证明具有类似于正常干细胞的特征，例如自我更新，多能性和高存活率。乳腺CSC（BCSC）是异质的，并根据几种表面抗原标记物（例如CD44+，CD24-和ALDH+）鉴定。由于BCSC被认为是造成复发的原因，因此乳腺癌治疗的发展应集中于其消除（Li等，
2025年2月20日克里斯汀·比廷特（Kristin Bittinger）
2025年2月20日，克里斯汀·比廷特（Kristin Bittinger），J.D。通过电子邮件：Kristin_Bittinger@hms.harvard.edu的学术和研究完整性教师和研究诚信办公室院长； ari@hms.harvard.edu尊敬的Bittinger女士：我代表人们为动物的道德待遇（PETA）写信，要求哈佛医学院的学术和研究完整性办公室（ARI）调查迪恩·乔治·迪利（Dean George Q. Daley），以便可能进行研究不当。 近年来，迪恩·戴利（Dean Daley）的《美国国家航空航天局》（NIH）资助的几本出版物引起了科学界的关注，因为它们包括重复或拼接的图像。 Daley实验室在十个单独的数字中撤回了一个出版物1的错误，而原始数据无法支持。 Daley的实验室还需要纠正其他几个出版物2,3,4,5，这是由于重复的图像面板和/或剪接的图像。 此外，他的至少十本出版物提出了对重复或操纵图像的尚未解决的问题，在线论坛Pubpeer上标记了6,7,8,9,11,11,12,12,13,14,15。 例如，在《血液》文章中的图2b中，“人类血液中诱导多能干细胞的产生”，12描绘两个不同基因表达的面板看起来与增强的对比度相同。 关于PubPeer的几位评论者还指出，对于“ Lin28调节干细胞代谢并转化为启动多能性）的文章，9发表在细胞干细胞中，许多图描绘了带有两个组蛋白甲基化带的蛋白质印迹数据。 此外，Bik博士在PubPeer上指出，在补充图11a中的图11a通过电子邮件：Kristin_Bittinger@hms.harvard.edu的学术和研究完整性教师和研究诚信办公室院长； ari@hms.harvard.edu尊敬的Bittinger女士：我代表人们为动物的道德待遇（PETA）写信，要求哈佛医学院的学术和研究完整性办公室（ARI）调查迪恩·乔治·迪利（Dean George Q. Daley），以便可能进行研究不当。近年来，迪恩·戴利（Dean Daley）的《美国国家航空航天局》（NIH）资助的几本出版物引起了科学界的关注，因为它们包括重复或拼接的图像。Daley实验室在十个单独的数字中撤回了一个出版物1的错误，而原始数据无法支持。Daley的实验室还需要纠正其他几个出版物2,3,4,5，这是由于重复的图像面板和/或剪接的图像。此外，他的至少十本出版物提出了对重复或操纵图像的尚未解决的问题，在线论坛Pubpeer上标记了6,7,8,9,11,11,12,12,13,14,15。例如，在《血液》文章中的图2b中，“人类血液中诱导多能干细胞的产生”，12描绘两个不同基因表达的面板看起来与增强的对比度相同。关于PubPeer的几位评论者还指出，对于“ Lin28调节干细胞代谢并转化为启动多能性）的文章，9发表在细胞干细胞中，许多图描绘了带有两个组蛋白甲基化带的蛋白质印迹数据。此外，Bik博士在PubPeer上指出，在补充图11a中在图2c和自然文章的图2c和2d中，还使用了一个重复的图像，“人类体细胞对具有定义因素的多能重新编程”。 15正如伊丽莎白·比克（Elizabeth Bik）博士在Pubpeer上指出的那样，“ Lin28/Let-7轴调节细胞中发表的葡萄糖代谢”的文章具有多种不规则性。具体来说，图3D和4D显示了在两个不同的实验条件下看起来相同的蛋白质印迹，并且图5a被认为描绘了尺寸明显不同的小鼠，但显示了图像裁剪的证据。
hiPSC 中的敲除/SNP 敲入方案
基因工程将细胞置于选择压力之下，需要几轮细胞倍增才能获得编辑后的克隆。因此，为避免基因组不稳定性积累，我们建议使用解冻后 2-3 次传代的细胞，尽可能接近质量测试过的细胞库。我们还建议在缺氧条件下（37 C/5% CO 2 /5% O 2 ）维护 hiPSC 并进行基因编辑实验，因为在缺氧条件下培养 hiPSC 有几个优点，包括增强多能性、增加增殖、减少氧化应激、提高重编程效率、更好的分化潜力和低遗传不稳定性频率。2、3 这些好处可以提高 hiPSC 的质量和功能，这对于再生医学和疾病建模中的下游应用至关重要。Vallone 等人描述了描述板涂层、细胞维护以及酶促和非酶促解离的一般方案。4
在表达 SOX2 的细胞中检测到古代人类内源性逆转录病毒的运动
摘要 人类内源性逆转录病毒 (HERV) 约占人类基因组的 8%。HERV 在早期胚胎中转录，在体细胞中表观遗传沉默，病理条件下除外。HERV-K 被认为可以保护胚胎免受外源性病毒感染。然而，体细胞中不受控制的 HERV-K 表达与多种疾病有关。在这里，我们表明 SOX2 对 HERV-K LTR5H 至关重要，它在维持干细胞多能性方面起着关键作用。在没有 Env 表达的情况下，HERV-K 在生产细胞内进行逆转录转座。此外，我们在表达 SOX2 的诱导多能干细胞的长期培养中发现了新的 HERV-K 整合位点。这些结果表明，HERV-K 对 SOX2 的严格依赖使得 HERV-K 能够在进化过程中保护早期胚胎，同时限制 HERV-K 逆转座对这些早期胚胎中宿主基因组完整性的潜在有害影响。