图7肝脏类器官中的脂质代谢。(a)在未处理的条件下用DAPI(蓝色,核)和尼罗河红(红色,脂质液滴)染色的左图,肝脏器官,以及在胺碘酮(40μm)或乙醇(200 nm)24小时处理下。右图,荧光定量(n = 5)。(b)左图;肝癌与LDL-Bodipy(绿色)在未经治疗的情况下和甲伐他汀治疗后孵育。核用DAPI(蓝色)染色。右图,荧光定量(n = 7)。使用未配对的t检验评估统计显着性,其p值截止设置为p <0.05。*,p值<0.05; **,p值<0.01; ***,p值<0.001; NS,并不重要。
替代剪接已成为时空控制发育的基本机制。更好地了解这种机制的调节,不仅具有阐明基本生物学原理的潜力,而且还具有破译与正常剪接网络不正当调节的疾病有关的病理机制。在这里,我们利用了人类多能干细胞在人类肌发生过程中破译肌肉闪烁(MBNL)蛋白的作用,这是一个组织特异性剪接调节剂,其功能丧失与肌动症1型1型(DM1)相关,是一种遗传性神经肌肉肌肉疾病。多亏了CRISPR/CAS9技术,我们产生了在MBNL蛋白中耗尽的人类诱导的多能干细胞(HIPSC),并评估了它们损失对骨骼肌细胞产生的后果。我们的结果表明MBNL蛋白需要晚期肌源性成熟。此外,MBNL1和MBNL2的丧失概括了在HIPSC衍生的骨骼肌细胞中观察到的DM1的主要特征。比较转录组分析还揭示了由这些蛋白质调节的肌肉相关过程,这些过程通常在DM1中被误导。一起,我们的研究揭示了人类肌发生中MBNL蛋白的时间需求,并应促进能够应对这些MBNL蛋白功能丧失的新的治疗策略。
由Nucleus Biologics开发和制造的 VITRONECTIN XF™是一种定义的,无XENO的细胞培养基质,支持HPSC的生长和分化。 Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中,细胞群体和可重复的结果。 人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态,而无需适应步骤(图1)。 与温和的细胞解离试剂(GCDR;目录#07174)或RELESR™(目录#05872)搭配以维持高质量的培养物。VITRONECTIN XF™是一种定义的,无XENO的细胞培养基质,支持HPSC的生长和分化。Use with mTeSR ™ 1 ( Catalog #85850 ), mTeSR ™ Plus ( Catalog #100-0276 ), TeSR ™ -E8 ™ ( Catalog #05990 ), or TeSR ™ -AOF ( Catalog #100-0401 ) medium to provide a defined culture system for the maintenance of ES and iPS cells and greater control over the culture environment, resulting in more consistent在下游应用中,细胞群体和可重复的结果。人类ES和IPS细胞在玻璃连蛋白XF™上培养的细胞保留多能性和正常菌落形态,而无需适应步骤(图1)。与温和的细胞解离试剂(GCDR;目录#07174)或RELESR™(目录#05872)搭配以维持高质量的培养物。
胃底子是早期人类发育的强大体外模型。然而,尽管由所有三个细菌层伸长并组成,但人类胃突不像形态学后的植入后人类胚胎。在这里,我们显示了视黄酸(RA)的早期脉冲,以及Matrigel,可牢固地诱导人类胃类型,具有后胚胎样形态结构,包括侧翼的神经管,分段的细胞体和各种细胞类型,包括神经crest,神经祖细胞,神经祖细胞,肾脏,肾脏,肌肉和肌肉和肌肉和肌肉和肌肉。通过基于单细胞RNA-seq(SCRNA-Seq)的计算机分期进行,我们发现人Ra-gastruloids比其他胚胎模型更先进,并且与E9.5小鼠和CS11 Cynomolgus Monkey Embryos相当。我们利用RA-GASTRULOIDS的化学和遗传扰动来确认Wnt和BMP信号传导在人类环境中调节了体积的形成和神经管长度,而转录因子TBX6和PAX3分别基于前甲基前中性胚乳和神经Crest。展望未来,ra-gastruloids是解码早期人类胚胎发生的强大,可扩展的模型。
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A reference induced pluripotent stem cell line for large-scale collaborative studies Authors and affiliations: Caroline B. Pantazis 1* , Andrian Yang 2-5* , Erika Lara 1* , Justin A. McDonough 6* , Cornelis Blauwendraat 1,7* , Lirong Peng 1,8,9* , Hideyuki Oguro 6,10 , Jitendra Kanaujiya 6,10 , Jizhong Zou 11 , David Sebesta 12 , Gretchen Pratt 12 , Erin Cross 12 , Jeffrey Blockwick 12 , Philip Buxton 12 , Lauren Kinner-Bibeau 12 , Constance Medura 12 , Christopher Tompkins 12 , Stephen Hughes 12 , Marianita Santiana 1 , Faraz Faghri 1,7,8 , Mike A. Nalls 1,7,8,Daniel Vitale 1,7,8,Shannon Ballard 1,7,8,Yue A. Kirwan 4,5,Venkat Pisupati 5,14,Steven L. Coon 15,Sonja W. Scholz 16,17,Theresa Priebe 18,MiriamÖttl18,Jian Dong 18,Marieke Meijer 18,Lara J.M.Janssen 18,Vanessa S. Lourenco 18,Rik van der Kant 18,19,Dennis Crusius 20,Dominik Paquet 20,21,Ana-Caroline Raulin 22,Guojun Bu 22,Aaron Held 23,Brian J.Wainger 23,Brian J.Wainger 24,Rebecca M.C.Gabriele 25,Jackie M Casey 25,Selina Wray 25,爸爸Abu-Bonsrah 26,42,Clare L. Parish 26,Melinda S. Beccari 27,Don W. Cleveland 27,Emmy Li 27,Indigo V.L.罗斯28,马丁运动28,劳林·海因里希30岁, Richa Basundra 32,Sarah Cohen 32,Richa Khanna 33: 35,Bruce R. Concinal 34,Katherine Johnson 22,莉莉·萨拉法(Lily Sarrafha)39,蒂姆自动相应的汽车
摘要:迄今为止,基因治疗一直采用病毒载体来传递治疗基因。然而,分子和细胞生物学的最新进展彻底改变了干细胞和基因治疗领域。几年前,临床试验开始使用干细胞替代疗法,诱导多能干细胞 (iPSC) 技术与 CRISPR-Cas9 基因编辑相结合,开启了神经系统疾病基因治疗的新时代。在这里,我们总结了该研究领域的最新发现并讨论了它们的临床应用,强调了最近的研究在开发创新干细胞和基因编辑治疗方法方面的相关性。尽管致瘤性和免疫原性是现有的障碍,但我们报告了最近的进展如何解决它们,使工程干细胞移植疗法成为一种现实的选择。
有建立的方法来产生人类多能干细胞(HPSC)的高纯性神经元,星形胶质细胞和小胶质细胞。先前的工作表明,神经胶质细胞在神经元功能中起重要作用,包括突触发生和稳态。然而,神经元单栽培缺乏这些在生理上重要的神经神经元相互作用。我们创建了一种与星形胶质细胞共同培养HPSC衍生的前脑神经元共同培养的方案,以评估神经胶质共培养对神经元形态的影响。然后,我们通过将HPSC衍生的小胶质细胞添加到神经元和星形胶质细胞中,开发了三个文化模型。我们对单培养的神经元进行了伤口损伤测定法。我们的结果表明,与神经元单栽培相比,可以一起培养星形胶质细胞,神经元和小胶质细胞的纯种群以显示功能特性。该系统可用于进一步研究胶质神经元相互作用的功能影响。
U-M HPSCRO委员会将临时开会,以审查收到收到后30天内进行hESC和IPSC研究的建议,或协助U-M HESC和IPSC研究政策制定。法定人数应包括允许的电话或视频参与的简单多数。委员会的委员会成员(例如,提议自己进行hESC或IPSC研究本身提议)将被免除该提案的审核过程。在委员会会议时,委员会将投票批准,反对或桌面提案。可以提出建议以从申请人那里获取其他信息,或者允许根据委员会的建议进行重新提交。