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水稻中靶向、高效的序列插入和替换
CRISPR–Cas9 方法已被用于在植物中产生随机插入和缺失、大量缺失、短序列的靶向插入或替换以及精确的碱基变化 1 – 7 。然而，用于功能基因组学研究和作物性状改良所需的长序列和基因的靶向插入或替换的通用方法很少，并且很大程度上取决于选择标记的使用 8 – 11 。基于在哺乳动物细胞中开发的方法 12 ，我们利用化学修饰的供体 DNA 和 CRISPR–Cas9 将长达 2,049 个碱基对 (bp) 的序列（包括增强子和启动子）插入水稻基因组，效率为 25%。我们还报道了一种依赖于同源性定向修复、化学修饰的供体 DNA 和目标位点串联重复序列的基因替换方法，以 6.1% 的效率实现了长达 130 bp 的序列的替换。在哺乳动物细胞中，使用平端的、5'-磷酸化的双链寡脱氧核苷酸 (dsODN)，在两条 DNA 链的 5' 和 3' 端带有两个硫代磷酸酯键，可导致寡脱氧核苷酸 12 的强有力靶向整合。硫代磷酸酯键修饰旨在稳定细胞中的寡核苷酸，而 5'-磷酸化可促进非同源末端连接 (NHEJ)，这是修复双链断裂 (DSB) 的主要途径，尤其是在培养细胞中。在用于再生小植株的培养植物细胞中，例如水稻愈伤组织细胞，NHEJ 也是主要的 DSB 修复途径 10,13。因此，这种类型的修饰 dsODN 可能会提高植物细胞中靶向插入的效率。为了验证这一假设，从水稻ADH1（酒精脱氢酶1）14 的5′非翻译区（UTR）中取出一个60bp的翻译增强子（ADHE）作为供体DNA，插入水稻的主要耐盐基因座SKC1（补充表1）15。如图1a所示，体外合成的ADHE供体DNA两侧有两个带有硫代磷酸酯键和5′-磷酸化修饰的核苷酸（ADHE；见补充图1b）。为了与传统供体DNA进行比较，还合成了未修饰的单链和双链寡脱氧核苷酸（ssADHE和dsADHE），带有三核苷酸多态性以供检测（图1b和补充图1b）。设计了一个针对 5 ʹ UTR 的单向导 RNA (sgRNA) (sgRNA-1)，并将其构建到 CRISPR–Cas9 载体 pCBSG032 中（图 1c 和补充图 1a）。将三个供体 DNA 寡核苷酸按等摩尔比例混合，然后通过粒子轰击法将其与 CRISPR–Cas9 质粒 DNA (sgRNA-1) 一起引入中花 11 (ZH11) 水稻愈伤组织中。
国防部武器替换工作的现状与挑战
2022 年 2 月，俄罗斯全面入侵乌克兰，造成了灾难性的后果，威胁到一个民主国家的主权，并在欧洲引发了一场人道主义危机。作为回应，截至 2023 年 11 月，国会根据四项乌克兰补充拨款法案拨款 1134 亿美元。这笔款项包括 259 亿美元，国防部 (DOD) 可以使用这笔钱来替换转移到乌克兰的武器，例如数千枚导弹和数百万发子弹。国防工业基地——生产和维持武器所需的公司、人员和设施——一直在加紧生产，以满足与乌克兰相关的日益增长的需求，包括更换国防部的武器库存。国防部此前确定了可能限制国防工业基地这样做能力的重大风险。例如，2018 年的评估将美国制造能力的下降确定为一个关键风险。1 最近的评估发现，由于 COVID-19 疫情，供应链中断的情况更加严重，例如交货时间增加和供应短缺。 2023 年综合拨款法案（公法 117-328）包括一项规定，要求 GAO 监督国防部对乌克兰补充资金的使用情况。本报告提供了国防部使用 259 亿美元更换运往乌克兰的武器的信息，以及国防部为应对可能推迟更换工作的国防工业基础挑战而采取的行动。
移动和制造的家庭置换（MMHR）程序
在使用CDOL系统启动新应用程序之前，申请人组织必须验证和更新组织信息。要这样做，请从“组织”标题下的“组织”名称右侧的“视图”按钮登录并从“视图”按钮。HCR已存档的组织信息将出现一个弹出窗口。如果显示的任何信息不正确或需要更新，请关闭弹出窗口，然后在组织名称右侧选择“编辑”按钮。请确保包括授权与HTFC签订合同的联系人的姓名和邮寄地址。对于HCR和HTFC而言，重要的是要知道在哪里邮寄潜在奖励和合同材料。组织可以随时更新其在CDOL中的组织信息，但一旦提交了应用程序，就不会更改组织信息。CDOL申请人信息字段要审查和验证：A。一般申请人信息
Raritan River Bridge替换项目-NJ.GOV
AECOM |莫特·麦克唐纳（Mott MacDonald）合资团队认识到Raritan River Bridge替换（RRBR）项目的重要性及其在向NJ Transit客户提供可靠的通勤服务方面的作用。当前110年历史的结构为地区社区，大都市地区通勤者和旅游业提供服务。它还促进了Conrail货运运动，每年在桥上运送200万吨耐用货物，以及商业和休闲海上交通，每年超过1,500个桥梁开放。更换结构是一项重大投资，它将改善NJ Transit客户和Conrail货运服务以及当地海上交通的北泽西海岸线服务。AECOM |莫特·麦克唐纳（Mott MacDonald）合资公司已经组建了一个团队，该团队已准备为NJ运输提供成功的项目，该项目满足RRBR项目的所有目标，包括减轻对NJ Transit行动的影响，协调和安排NJ Transit Force Occount Force工作，使环境和当地社区的范围和跨性别的越来越多的进步和跨越的跨界和重新构建，以构建这些目标，并构建这些越来越多的进步，并构建了这些目标，并构建了这些目标，并构建了这些目标，并为这些互联网和稳定的范围进行了努力，以实现这些范围和重新选择。
基于风险的主动杆更换程序
最近的气候变化建模表明，Essential Energy的资产可能会导致由于气候变化而导致的失败风险增加，尤其是丛林大火对必需能源网络的影响。基本的能源客户通过广泛的参与过程确定了对提高网络弹性的强烈偏爱。的选择，以不同程度的主动杆更换以解决增加的风险，并得到了客户的最大支持，以取代25,000杆以上。为了响应，本质能源提议向AER支出8,530万美元，以作为2024-29监管建议的一部分，用复合等价物主动替换木极。与客户参与期间的建议相比，这是减少干预措施的数量，但是这需要平衡可交付性，成本收益与客户期望。此弹性支出已于2024年4月获得AER批准。
2018-2033 年替代地方发展计划 (RLDP)
1. 在蒙茅斯 (Monmouth) 增加一个战略性地点，将候选地点 CS0270 Leasbrook 分配至 Dixton Road 旁，用于建造约 270 套住宅，并将遗留地点考虑在内 2. 修改切普斯托 (Chepstow) 内的地点分配，将候选地点 CS0165 Mounton Road 分配至约 145 套住宅和商业开发项目（酒店和可能的养老院） 3. 将灵活性津贴从 10% 提高到 15%（5940（5,400 + 10% 灵活性）至 6210（5,400 + 15% 灵活性）） 4. 在计划中预留 100 套国防部 (MoD) 住宅，用于提供服务家庭住宿 5. 将政策要求从“净零碳准备”修改为“净零碳”
修正案 2 4 号航站楼登机口更换 - 布劳沃德县
布劳沃德县 › 商业 › 文件 2013 年 8 月 5 日 — 2013 年 8 月 5 日 所有承包商和分包商必须保持海洋海事责任保险……此类保险应以标准形式保持……
拟议的纳皮里涵洞更换项目 - Hawaii.gov
毛伊县公共工程部 (DPW) 提议在纳皮里 (Napili) 实施排水更换项目，以解决位于 Napili Place 和 Hui Drive 之间 Lower Honoapi'ilani 路下方的两个 (2) 个现有 90 英寸 x 40 英寸箱形涵洞的侵蚀和恶化问题。提议的项目涉及拆除现有箱形涵洞，并用两个 (2) 个新的 8 英尺 x 5 英尺预制箱形排水涵洞替换。提议的工作还将包括安装相关的进水口和出水口结构；在 mauka（南）排水道的一部分内安装开放式混凝土垫层材料（Armor Flex 或经批准的同等材料）；在排水道 makai（北）侧铺设未灌浆的护堤；以及沿着排水道西侧相邻地产修建挡土墙。将对现有水道进行重新分级，以减少侵蚀并改善拟议更换涵洞下游的水质。本地植物材料将融入项目的植被部分。该项目将包括人行道和道路改善，包括将项目区域内 Lower Honoapi'ilani 路的一部分从 22 英尺拓宽至 38 英尺。此外，该项目还将拆除和更换供水部 (DWS) 供水管线和环境管理部 (DEM) 下水道压力管。