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改进的 gRNA 二级结构允许编辑抵抗 CRISPR-Cas9 切割的靶位
CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑的第一步是切割与 CRISPR 向导 RNA (gRNA) 中所谓的间隔序列互补的目标 DNA 序列。然而，一些 DNA 序列对 CRISPR-Cas9 切割具有抵抗性，这至少部分是由于 gRNA 折叠错误造成的。为了解决这个问题，我们设计了 gRNA，使其恒定部分具有高度稳定的发夹结构，并通过化学修饰进一步增强了它们的稳定性。“基因组编辑优化锁定设计”(GOLD)-gRNA 将基因组编辑效率提高了约 1000 倍（从 0.08% 到 80.5%），其他不同靶标的平均效率提高了 7.4 倍。我们预计，无论间隔序列组成如何，这种改进的 gRNA 都将实现高效编辑，并且在所需的基因组位点难以编辑时将特别有用。
60秒的年度报告
“RESOLVED THAT pursuant to Sections 196, 197, 203, and other applicable provisions, if any, of the Companies Act, 2013 read with Companies (Appointment and Remuneration of Managerial Personnel) Rules, 2014, as amended from time to time made thereunder (including any statutory modification(s) or re- enactment thereof for the time being in force) read with Schedule V to the Act and pursuant to Regulation 17 (1C) and other 2015年SEBI（上市义务和披露要求）法规的适用法规以及其他规定适用于适用的规定，并按照公司的提名和薪酬委员会在2023年3月18日举行的会议上的提名和薪酬委员会的建议，并在2023年3月18日的会议上批准了该公司董事会的批准。 Pathanjali（DIN：05297665）担任公司董事总经理，从2023年4月1日到
空置房屋和第二套住房的市政税 | GOV.WALES
地方当局根据 1992 年法案第 12A 或 12B 条决定收取额外费用通常是预算制定过程的一部分，因为它可能会影响税收制定和支出决策。因此，这通常是由全体议会做出的决定。在此之前，地方当局必须充分考虑其根据 2010 年平等法案和 2011 年生效的威尔士公共部门平等责任进行平等影响评估的法定职责以及所有其他相关考虑因素。这将包括考虑其政策如何满足 2015 年未来几代人福祉（威尔士）法案的要求，并具体促进实现繁荣的威尔士、更平等的威尔士和具有凝聚力的社区的威尔士的目标。
CRISPR技术在植物药有效成分次级代谢途径中的应用及发展
CRISPR/Cas9系统作为一种高效的基因编辑工具，被广泛应用于研究和调控药用植物有效成分的生物合成途径，在提高药用植物有效成分的产量和质量方面具有巨大的潜力。通过精准调控关键酶和转录因子的表达，CRISPR技术不仅加深了我们对药用植物次生代谢途径的认识，也为药物研发和中药现代化开辟了新的途径。本文首先介绍了CRISPR技术的原理及其在基因编辑中的应用，然后详细讨论了其在药用植物次生代谢中的应用，包括有效成分的组成和CRISPR策略在代谢途径中的实施，以及Cas9蛋白变体和先进的CRISPR系统在该领域的影响。此外，本文还展望了CRISPR技术对药用植物研发进程的长远影响，并提出了目前研究中存在的问题，包括脱靶效应、基因组结构复杂、转化效率低、对代谢途径了解不足等，同时提出了一些见解，以期为CRISPR在药用植物中的后续应用提供新思路。总之，CRISPR技术在药用植物次生代谢研究中具有广阔的应用前景，有望促进生物医药和农业科学的进一步发展。随着技术进步和挑战的逐步解决，CRISPR技术有望在药用植物有效成分研究中发挥越来越重要的作用。
寻找浪费的时间：attosond物理学，Petahertz光电子和量子速度限制
1。简介：attosond Electron动力学，Petahertz光电子和量子力学中的“损失时间”的问题370 2。量子力学中的严重问题：量子跳跃，不确定性关系和Pauli定理371 2.1 Bohr的理论，量子跳跃和时间测量的不确定性； 2.2 Pauli的定理3。量子力学中的时间面孔372 3.1内部和外部时间； 3.2作为量子可观察的时间和时间操作员； 3.3延迟时间4。mandelstam±tamm不确定性关系374 5。量子保真度和量子速度限制375 6。能量±时间不确定性，与时间有关的汉密尔顿人375 7。激光驱动的量子动力学376 8。不确定性关系和电子动力学的速度限制376 9。Keldysh参数和光电子的Petahertz极限378 10。mandelstam±Tamm的不确定性关系和量子进化的信息几何度量379 10.1量子演化的几何形状； 10.2量子保真度和渔民信息； 10.3不确定性关系和cram er±rao绑定11。量子速度极限的非量化性质381 12。热力学不确定性限制382 12.1信息指标和热力学不确定性； 12.2膜蛋白温度阈值的热力学极限13。结论383参考383
改进的 gRNA 二级结构允许编辑抵抗 CRISPR-Cas9 切割的靶位
CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑的第一步是切割与 CRISPR 向导 RNA (gRNA) 中所谓的间隔序列互补的目标 DNA 序列。然而，一些 DNA 序列对 CRISPR-Cas9 切割具有抵抗性，这至少部分是由于 gRNA 折叠错误造成的。为了解决这个问题，我们设计了 gRNA，使其恒定部分具有高度稳定的发夹结构，并通过化学修饰进一步增强了它们的稳定性。“基因组编辑优化锁定设计”(GOLD)-gRNA 将基因组编辑效率提高了约 1000 倍（从 0.08% 到 80.5%），其他不同靶标的平均效率提高了 7.4 倍。我们预计，无论间隔序列组成如何，这种改进的 gRNA 都将实现高效编辑，并且在所需的基因组位点难以编辑时将特别有用。
前次妊娠期糖尿病与第二次妊娠中发生大于胎龄儿和巨大儿的风险相关
结果：既往有过 GDM 的女性（分别为 22.67% 和 10.25%）第二次妊娠期间 LGA 和巨大儿的发生率显著高于无既往有过 GDM 的女性（分别为 15.34% 和 5.06%）（P < 0.05）。调整潜在混杂因素后，既往有过 GDM 与第二次妊娠期间 LGA（aOR：1.511，95% CI：1.066-2.143）和巨大儿（aOR：1.854，95% CI：1.118-3.076）显著相关。分层分析显示，这些关联仅在第二次妊娠期间无既往 LGA、有 GDM、适当的妊娠体重增长 (AGWG)、非高龄产妇和男婴的女性中存在（P < 0.05）。与过度 GWG (EGWG) 相比，AGWG 与未患过 GDM 的女性在第二次怀孕期间患 LGA 和巨大儿的风险较低相关，而之前患过 GDM 的女性则未观察到这种相关性。在未患过 GDM 的女性中，如果孕前 BMI 正常，AGWG 的 LGA 和巨大儿风险显著降低
垂直冰川学：气候研究中第三维的第二个发现
37 Langway（1958; 1967）。 38 Langway（1967，p。7）。 39 Martin-Nielsen（2016年，第95页）。 40在格陵兰（美国）科学研究的地缘政治方面，请参见Doel，Harper和Heymann（2016）。 41 Haefeli（1959）; Finsterwalder的引号（1959年，第542页）。 42“冰盖”是大于50,000 km 2的圆顶冰川。 这种类型的冰川仅存在于格陵兰和南极。 43丹麦政府安装了这样的政府观察员或“联络官”，以观察格陵兰的外国活动：Heymann等。 （2010年，第33页）。 有关Egig的更多详细信息，请参见Martin-Nielsen（2013，pp。 86 - 100）。 44 Martin-Nielsen（2013年，第 87 - 88）。 45 Dansgaard，W。（1958年1月27日），致BørgeFristup的信； Fristup，B。 （1958年1月28日），给威利·丹斯加德的信； Renaud，A。 （[[1962年11月]），Egig 1957 -37 Langway（1958; 1967）。38 Langway（1967，p。7）。 39 Martin-Nielsen（2016年，第95页）。 40在格陵兰（美国）科学研究的地缘政治方面，请参见Doel，Harper和Heymann（2016）。 41 Haefeli（1959）; Finsterwalder的引号（1959年，第542页）。 42“冰盖”是大于50,000 km 2的圆顶冰川。 这种类型的冰川仅存在于格陵兰和南极。 43丹麦政府安装了这样的政府观察员或“联络官”，以观察格陵兰的外国活动：Heymann等。 （2010年，第33页）。 有关Egig的更多详细信息，请参见Martin-Nielsen（2013，pp。 86 - 100）。 44 Martin-Nielsen（2013年，第 87 - 88）。 45 Dansgaard，W。（1958年1月27日），致BørgeFristup的信； Fristup，B。 （1958年1月28日），给威利·丹斯加德的信； Renaud，A。 （[[1962年11月]），Egig 1957 -38 Langway（1967，p。7）。39 Martin-Nielsen（2016年，第95页）。 40在格陵兰（美国）科学研究的地缘政治方面，请参见Doel，Harper和Heymann（2016）。 41 Haefeli（1959）; Finsterwalder的引号（1959年，第542页）。 42“冰盖”是大于50,000 km 2的圆顶冰川。 这种类型的冰川仅存在于格陵兰和南极。 43丹麦政府安装了这样的政府观察员或“联络官”，以观察格陵兰的外国活动：Heymann等。 （2010年，第33页）。 有关Egig的更多详细信息，请参见Martin-Nielsen（2013，pp。 86 - 100）。 44 Martin-Nielsen（2013年，第 87 - 88）。 45 Dansgaard，W。（1958年1月27日），致BørgeFristup的信； Fristup，B。 （1958年1月28日），给威利·丹斯加德的信； Renaud，A。 （[[1962年11月]），Egig 1957 -39 Martin-Nielsen（2016年，第95页）。40在格陵兰（美国）科学研究的地缘政治方面，请参见Doel，Harper和Heymann（2016）。41 Haefeli（1959）; Finsterwalder的引号（1959年，第542页）。 42“冰盖”是大于50,000 km 2的圆顶冰川。 这种类型的冰川仅存在于格陵兰和南极。 43丹麦政府安装了这样的政府观察员或“联络官”，以观察格陵兰的外国活动：Heymann等。 （2010年，第33页）。 有关Egig的更多详细信息，请参见Martin-Nielsen（2013，pp。 86 - 100）。 44 Martin-Nielsen（2013年，第 87 - 88）。 45 Dansgaard，W。（1958年1月27日），致BørgeFristup的信； Fristup，B。 （1958年1月28日），给威利·丹斯加德的信； Renaud，A。 （[[1962年11月]），Egig 1957 -41 Haefeli（1959）; Finsterwalder的引号（1959年，第542页）。42“冰盖”是大于50,000 km 2的圆顶冰川。这种类型的冰川仅存在于格陵兰和南极。43丹麦政府安装了这样的政府观察员或“联络官”，以观察格陵兰的外国活动：Heymann等。（2010年，第33页）。有关Egig的更多详细信息，请参见Martin-Nielsen（2013，pp。86 - 100）。44 Martin-Nielsen（2013年，第87 - 88）。45 Dansgaard，W。（1958年1月27日），致BørgeFristup的信； Fristup，B。（1958年1月28日），给威利·丹斯加德的信； Renaud，A。（[[1962年11月]），Egig 1957 -
b' 在示例 13.1 的解决方案中，第二行应为：但是，64QAM OFDM 信号表现出...。最后一句应为：82-dBm PSK OFDM 信号具有大致相同的行为。请注意，此校正会影响此示例之后的增益计算。'
b' 在示例 13.1 的解决方案中，第二行应为：但是，64QAM OFDM 信号表现出...。最后一句应为：82-dBm PSK OFDM 信号具有大致相同的行为。请注意，此校正会影响此示例之后的增益计算。'
利用超薄硅像素探测器实现皮秒计时
https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/62/CERN_LHC_Proton_Source.JPG https://cdn.zmescience.com/wp-content/uploads/2015/05/cern-lhc-aerial.jpg H t tp://sites.uci.edu/energyobserver/files/2012/11/lhc-aerial.jpg