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使用CAS9或DCAS9靶向常染色体ceratis capitata变压器基因，以使XX个体成为男性化的XX个体，而无需诱导突变
背景：地中海果蝇的女性Capitata（Medfly）是主要的农业害虫，因为它们将鸡蛋放入数百种植物的水果作物中。在Medfly中，女性确定是基于CCTRANSFORMER（CCTRA）的激活。CCTRA的母体贡献是需要在XX胚胎中激活CCTRA，并通过女性特异性的替代剪接来开始和表观上保持CCTRA阳性反馈回路，从而导致女性发育。在XY胚胎中，确定雄性基因（MOY）的雄性阻断了这种激活，CCTRA会产生编码截短的CCTRA同工型和男性分化的男性特异性转录本。结果：为了诱导第一个编码外显子中的移码突变，以破坏女性特异性和较短的男性特异性CCTRA开放式阅读框（ORF），我们在胚胎中注射了Cas9核糖核蛋白（Cas9和单个指导RNA，SGRNA，SGRNA，SGRNA，SGRNA）。由于这种方法大多导致单相关突变，因此在携带双重突变的G 1 XX个体中，男性化才预计，在G 0注射个体的交叉之后。令人惊讶的是，这些注射仅XX胚胎导致了G 0成人，不仅包括XX女性，还包括50％的肥沃XX雄性。G 0 XX雄性表达男性特异性CCTRA转录本，表明完全男性化。有趣的是，在六个G 0 XX男性中，有四个显示了CCTRA野生型序列。这一发现表明，Cas9-SgrNA注射的男性化与其诱变活性无关。与这种观察结果一致，通过死亡的Cas9（酶促无活性，DCAS9）将CCTRA的胚胎靶向XX胚胎，也有利于胚胎和成人中CCTRA的男性特异性剪接。
如果废水排放来自：（根据第 101 条第 7 款，字母 a)、b)、c)、d)，则排放物所有者必须转发生活废水同化性的简单信息： f) 和立法令第 7 段之二。 152/06 及后续修正案）- 专门从事土地耕种和/或林业的公司（字母 a）； - 致力于畜牧养殖的企业（字母b）； - 致力于字母 a) 和 b) 中提到的活动的公司，还开展农业生产转型或增值活动，在公司生产周期中插入正常和功能互补的特征，加工原材料主要来自因任何原因可用的土地的耕种活动（字母 c）。 - 产生排放且其放养密度等于或小于每平方米水 1 公斤或水流量等于或小于每分钟 50 升的水产养殖和养鱼系统，符合（字母d）； - 热活动（字母 f） - 炼油厂的植被废水（c.7之二）
如果废水排放来自以下来源，则排放所有者必须转发可吸收到生活废水的简单通信：（根据艺术。立法法令第 101 条第 7 款 a)、b)、c)、d)、f) 项和第 7 款之二。152/06 及其后续修正案）- 专门从事土地种植和/或林业的公司（字母一个）； - 从事畜牧业的企业（lett.b ); - 专门从事 a) 和 b) 项所述活动的公司，这些公司还开展农业生产转化或增值活动，这些活动以正常的、功能互补的方式插入公司生产周期中，加工原材料主要来自以任何身份耕种自己可用的土地的活动（lett.c ).- 产生排放的水产养殖和养鱼系统，其特点是养殖密度等于或小于每平方米水面 1 公斤，或水流量等于或小于每立方米 50 升。分钟根据（字面意思d ); - 热活动（字面意思f) - 橄榄油厂废水（c.7 bis）
报告读者须知 - Vale
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表征了特定乳酸科属的抑制作用。在高度普遍的细菌
结果：对候选家政基因进行测序：β-肌动蛋白（肌动蛋白），伸长因子1α（EF1A），甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH），Armadillo（ARM），Armadillo（ARM），核糖体蛋白L32（核心蛋白L32），核心蛋白质（Rpl32），固定脱水酶（RPLLAINS）和SDHA酶（SDHA）ix HASE; - 小茶（浴缸）。在Allata（CA）和成年雌性D. punctata的卵巢中分析了这八个基因的表达。Genorm，以及Normfinder都将SDHA，EF1A和ARM的特征是在Allata Corpera Allata中表达最稳定的。在卵巢中，基因级计算显示浴缸，EF1A和RPL32是最稳定的，而Normfinder识别为浴缸，EF1A和ARM是最好的。在卵巢中，最不稳定的基因是肌动蛋白，挑战了其在归一化中的有用性。作为原理证明，在第一个促性腺营养循环中监测了卵泡细胞蛋白3C和CYP15A1的表达。