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CRISPR/Cas 技术在树木基因组编辑中的进展与挑战
摘要 随着成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 (Cas) 系统的出现，植物基因组编辑进入了对任何感兴趣的基因进行稳健而精确编辑的新时代。各种 CRISPR/Cas 工具包的开发使新的基因组编辑结果成为可能，这些结果不仅可以针对插入/缺失突变，还可以实现碱基编辑和主要编辑。CRISPR/Cas 工具包的应用迅速促进了经济重要物种的育种和作物改良。CRISPR/Cas 工具包还已应用于多种树种，包括苹果、竹子、大麻科、木薯、柑橘、可可树、咖啡树、葡萄树、猕猴桃、梨、石榴、杨树、拉坦乔伊特树和橡胶树。对这些物种的编辑应用已导致与生长、次生代谢以及抗逆和抗病性相关的关键基因的重大发现。然而，目前对树种的研究大多只涉及编辑技术的初步优化，对基于CRISPR/Cas的树种编辑技术进行更深入的研究，有望迅速加速树种育种和性状改良。此外，树种基因组编辑仍然主要依赖于基于Cas9的插入/缺失突变和农杆菌介导的稳定转化。瞬时转化是无转基因基因组编辑的首选，但在树种中效率通常很低，大大限制了其潜在应用。本文总结了使用CRISPR/Cas系统进行树种基因组编辑的现状，并讨论了阻碍CRISPR/Cas工具包有效应用于树种基因组编辑的局限性以及未来的前景。
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制定倡导策略的 10 个步骤
该工具由 INTRAC 与 Helen Collinson 编写的小型慈善机构宣传工具包联合发布，该工具包是“加强具有远大抱负的小型组织”计划（2021-2022 年）中制作的五套工具包的一部分。该计划由英国外交、联邦和发展办公室 (FCDO) 通过小型慈善机构挑战基金 (SCCF) 能力发展补助金资助