在1988年第一次UCB移植,将UCB的使用作为造血干细胞(HSC)的替代来源,用于骨髓重建。2与骨髓和动员外周血HSC进行移植相比,脐带血提供了几种好处,包括易于可用性,对捐助者的危险较小,人类白细胞抗原(HLA)匹配标准的降低,以及较低的移植物伴随宿主疾病的风险。3然而,单个脐带血单位的数量和质量不足导致植入率延迟。不同的因素会影响脐带血干细胞的质量和生存能力,影响了UCB干细胞转移的效率。4胎儿窘迫是影响脐带血中CD34 +细胞量化的一个因素。对此事的研究非常有限。这项研究将使我们能够确定胎儿苦恼是否可能影响脐带干细胞的生存力和数量,并有助于我们了解产妇和胎儿因素,从而影响脐带干细胞的数量和存活率。它也可以帮助我们提高我们的知识,以提高儿童和成人中UCB干细胞移植的有效性。
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此预印本版的版权持有人于2020年12月14日发布。 https://doi.org/10.1101/2020.12.13.422541 doi:Biorxiv Preprint
摘要:一种通常称为心脏病发作的心肌梗塞(MI)导致心脏中心肌细胞(CMS)死亡。组织工程为MI治疗提供了有希望的策略,但是人类工程心脏组织(HECT)的成熟仍然需要改善。导电聚合物和纳米材料已掺入细胞外基质中,以增强心脏细胞之间的机械和电耦合。在这里,我们报告了一种简单的方法,将金纳米棒(GNRS)掺入纤维蛋白水凝胶中以形成一个GNR-纤维蛋白基质,该基质用作形成悬浮在两个柔性柱之间的3D Hect构建体的细胞外基质的主要组成部分。用GNR-纤维蛋白水凝胶制成的高h表现出成熟的标志物,例如较高的抽搐力,同步跳动活动,肌节成熟和比对,T型管网络的开发以及钙处理的改进。最重要的是,GNR小量可以在9个月内生存。我们设想带有GNR的HECT具有恢复梗塞心脏功能的潜力。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 系统已成为修改多种细胞类型基因表达的重要工具,在肿瘤治疗中显示出前所未有的潜力 (2)。许多研究已将 CRISPR/Cas9 应用于治疗相关的体外和体内实验 (3)。然而,由于 Cas9 蛋白的尺寸较大 (160 kDa),CRISPR/Cas9 的应用受到限制。迫切需要高效、安全地将 CRISPR/Cas9 递送到 AML 细胞中以探索新的治疗靶点。近年来,CRISPR/Cas9 核糖核蛋白 (RNP) 复合物已通过电穿孔直接递送到肿瘤细胞中,由于 RNP 复合物的寿命短,脱靶效应减少 (4-9)。
测定。使用γH2AX测定法分析了DNA双链断裂的数量,而通过流式细胞仪检查了细胞周期分布。对于两种肿瘤细胞系的抑制作用和细胞毒性作用均以10 µg/ml HP01的浓度开始。用HP01处理导致电离辐射后肿瘤细胞的克隆生成抑制(6 Gy)。肿瘤细胞中DNA双链断裂(DSB)的数量随着HP01处理而增加,但是辐射诱导的DNA DSB的修复不影响。细胞周期分析表明,除辐射外,HP01在MCF-7和HT-29细胞中的G2/M停滞增强。总体而言,HP01不仅显示出抑制生长的作用,而且还表现出对人肿瘤细胞的放射敏作用。我们得出的结论是,HP01诱导的细胞积累可能是药物诱导的放射线敏感性的主要基本原理。因此,它是肿瘤疾病联合治疗的承诺候选者,并需要进一步研究。
高通量基因筛选是一种强大的方法,可用于在全基因组范围内研究基因功能并识别对某些压力负责的基因。在这里,我们开发了一种 piggyBac 策略,可将汇集的 sgRNA 文库稳定地递送到细胞系中。我们使用这种策略在家蚕细胞中进行基于全基因组成簇的规律间隔短回文重复技术 (CRISPR)-Cas9 的筛选。我们首先构建了一个包含 94,000 个 sgRNA 的单向导 RNA (sgRNA) 文库,该文库靶向 16,571 个蛋白质编码基因。然后,我们使用 piggyBac 转座子在 BmE 细胞中生成敲除集合。我们确定了 1006 个在正常生长条件下对细胞生存至关重要的基因。在已确定的基因中,82.4%(829 个基因)与七种动物物种中的必需基因同源。我们还确定了 838 个基因,它们的缺失促进了细胞生长。接下来,我们分别使用温度和杆状病毒对生物或非生物胁迫进行了针对特定环境的阳性筛选,从每个筛选中确定了几个关键基因和途径。总之,我们的结果为家蚕基因组的功能注释和解释导致各种条件的关键基因提供了一个新颖而通用的平台。这项研究还展示了在非模式生物中进行全基因组 CRISPR 筛选的有效性、实用性和便利性。
抽象的紫外线辐射(UVGI)和臭氧消毒是在高风险环境中缓解病原微生物的空气传播的关键方法,尤其是在呼吸道病毒病原体(如SARS-COV-2和Avian Infiean Infuenza inflienza and Avian inf uenza)中的出现。这项研究定量研究了紫外线和臭氧对生物溶质溶质中大肠杆菌生存能力的影响,特别关注大肠杆菌的生存能力如何依赖于生物溶质醇的大小,这是一个关键因素,它是确定人类静止性系统和bioaerosolols进化环境中沉积模式的关键因素。本研究使用了一个受控的小型实验室,在整个暴露时间(2 - 6 s)中,将大肠杆菌悬浮液燃烧并持有不同水平的UVGI和臭氧水平。由于暴露时间从2到6 s增加,并且在使用uvgi和ozone和ozone(65 - 131 ppb)时,发现大肠杆菌的归一化生存力显着降低了。我们还发现,与较大的尺寸(0.5 - 2.5μm)相比,UVGI降低了生物溶质中大肠杆菌的归一化活力(0.25 - 0.5μm)。然而,当组合紫外线和臭氧时,对于较小的粒径,归一化的活力高于较大的粒径。这些发现为有效的UVGI消毒工程方法的发展提供了见解,以控制高风险环境中致病性微生物的传播。通过理解微生物在各种生物质量大小中的生存能力的影响,我们可以优化紫外线和臭氧技术,以降低病原体的空气传播的潜在风险。
Afzaal,M.,Saeed,F.,Arshad,M.U。,Nadeem,M.T.,Saeed,M。,&Tufail,T。(2019)。 封装对冰淇淋和模拟胃肠道条件中益生菌细菌稳定性的影响。 益生菌和抗菌蛋白,11(4),1348–1354。 Akhtar,M。和Dickinson,E。(2001)。 水中的水中多个emulsions通过聚合物和天然乳化剂稳定。 食物胶体:配方的基本原理,258,133。 Amirsadeghi,A.,Jafari,A.,Hashemi,S.-S.,Kazemi,A.,Ghasemi,Y. 可喷涂的抗菌波斯胶 - 胶丝纳米粒子敷料用于伤口愈合加速度。 Today Communications,27,102225。 Arboleya,J.-C。,Ridout,M。J.和Wilde,P。J. (2009)。 充气棕榈油/水乳液的流变行为。 食物水胶体,23(5),1358–1365。 Beldarrain-Isnaga,T.,Villalobos-Carvajal,R.,Leiva-Vega,J。,&Armesto,E。S.(2020)。 使用双重乳液和离子胶凝方法,多层微囊泡对乳杆菌乳杆菌的生存能力的影响。 食物和生物生产加工,124,57-71。 Benichou,A.,Aserin,A。,&Garti,N。(2004)。 双重乳液用天然聚合物的杂交稳定,可捕集和缓慢释放活性物质。 胶体和界面科学的进步,108,29-41。 Boricha,A。 A.,Shekh,S.L.,Pithva,S.P.,Ambalam,P.S。,&Vyas,B.R.M。(2019)。 Bryant,C。和McClements,D。(2000)。Afzaal,M.,Saeed,F.,Arshad,M.U。,Nadeem,M.T.,Saeed,M。,&Tufail,T。(2019)。封装对冰淇淋和模拟胃肠道条件中益生菌细菌稳定性的影响。益生菌和抗菌蛋白,11(4),1348–1354。Akhtar,M。和Dickinson,E。(2001)。水中的水中多个emulsions通过聚合物和天然乳化剂稳定。食物胶体:配方的基本原理,258,133。Amirsadeghi,A.,Jafari,A.,Hashemi,S.-S.,Kazemi,A.,Ghasemi,Y.可喷涂的抗菌波斯胶 - 胶丝纳米粒子敷料用于伤口愈合加速度。Today Communications,27,102225。Arboleya,J.-C。,Ridout,M。J.和Wilde,P。J.(2009)。充气棕榈油/水乳液的流变行为。食物水胶体,23(5),1358–1365。Beldarrain-Isnaga,T.,Villalobos-Carvajal,R.,Leiva-Vega,J。,&Armesto,E。S.(2020)。使用双重乳液和离子胶凝方法,多层微囊泡对乳杆菌乳杆菌的生存能力的影响。食物和生物生产加工,124,57-71。Benichou,A.,Aserin,A。,&Garti,N。(2004)。 双重乳液用天然聚合物的杂交稳定,可捕集和缓慢释放活性物质。 胶体和界面科学的进步,108,29-41。 Boricha,A。 A.,Shekh,S.L.,Pithva,S.P.,Ambalam,P.S。,&Vyas,B.R.M。(2019)。 Bryant,C。和McClements,D。(2000)。Benichou,A.,Aserin,A。,&Garti,N。(2004)。双重乳液用天然聚合物的杂交稳定,可捕集和缓慢释放活性物质。胶体和界面科学的进步,108,29-41。Boricha,A。A.,Shekh,S.L.,Pithva,S.P.,Ambalam,P.S。,&Vyas,B.R.M。(2019)。Bryant,C。和McClements,D。(2000)。在体外评估食品和人类来源的乳杆菌种类的益生菌特性。LWT食品科学技术,106,201-208。Bou,R.,Cofrades,S。和Jiménez-Colmenero,F。(2014)。具有不同脂质源的双乳液中的物理化学特性和核黄素封装。LWT食品科学技术,59(2),621–628。Boutin,C.,Giroux,H。J.,Paquin,P。和Britten,M。(2007)。 表征和酸诱导的黄油油乳剂是由加热的乳清蛋白分散体产生的。 国际乳制品杂志,第17(6)期,696–703。 黄原胶对热变性乳清蛋白溶液和凝胶的物理特征的影响。 食物水胶体,14(4),383–390。Boutin,C.,Giroux,H。J.,Paquin,P。和Britten,M。(2007)。表征和酸诱导的黄油油乳剂是由加热的乳清蛋白分散体产生的。国际乳制品杂志,第17(6)期,696–703。黄原胶对热变性乳清蛋白溶液和凝胶的物理特征的影响。食物水胶体,14(4),383–390。
表2。JAB-23425抑制KRAS突变/扩增的癌细胞的生长。A. JAB-23425 IC 50 data in KRAS-dependent cancer cell lines harboring multiple KRAS mutations, by pERK T202/Y204 HTRF assays (2 h) and CTG viability assay (6 days).ND, not detected.* 2D CTG生存力测定。B. JAB-23425 IC 50 data in KRAS WT cell lines with or without KRAS amplification, by pERK T202/Y204 HTRF assay (2 h) and CTG viability assay (6 days).Viability of cancer cell lines having KRAS WT amplification (KRAS-dependent) was significantly inhibited by JAB-23425, while there is no obvious inhibitory effect of JAB-23425 on cancer or normal cell lines without KRAS mutation or amplification (KRAS-independent).SK-MEL-2和KU-19-19 NRAS Q61R突变和A375 Harbors BRAF V600E突变。ND, not detected.* 2D CTG生存力测定。
我没有可能在我自己完成论文的这一刻到达。我非常感谢我的汤姆·萨福德(Tom Safford),希瑟·达比(Heather Darby),米歇尔·米勒(Michelle Miller),马修·霍夫曼(Matthew Hoffman)的支持委员会,最重要的是,我的委员会主席兼顾问analena bruce。感谢您对该项目的每项贡献,以重要的方式塑造它,并指导我成为一名周到的研究人员。Analena,感谢您的不懈支持,鼓励我遵循好奇心,并在每一步的每一步都提供指导。我对与您合作的经历感到非常感激,我仍然可以记得我觉得自己在您的实验室中获得职位的那一天的怀疑。感谢我令人愉快的实验室同伴辛迪·郑和奥利维亚·伯顿(Cindy Zheng)和奥利维亚·伯顿(Olivia Burton)以及实验室博士后汉娜·斯托克斯·拉莫斯(Hannah Stokes-Ramos)创造了一个快乐而支持的学习和工作场所。您对该项目的各种迭代和阶段的反馈对于建立我的信心非常宝贵。我感谢我的ANFS朋友为我加油并为有时忘记我们的工作提供好的公司。我亲爱的家人和甜蜜的伴侣扎克(Zach)花了几个月的时间倾听我的想法,看着我被这个项目所吸收。感谢您的日常鼓励和相信我。我很幸运。
