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使用 CRISPR-Cas9 作为限制性酶
图表列表 图 1.1：限制性酶的发现时间表及一般历史里程碑……………………………………………………………………………………………………… 2 图 1.2：中心法则图…………………………………………………………………… 4 图 1.3：不同类型的限制性酶；ZFN 和 TALEN 序列特异性分别与特定三联体或有限特定 bp 序列有关。粉红色高亮表示所示限制性酶或内切酶的结合位点。粗线表示切割位点………………………………………………………… 5 图 1.4：CRISPR-Cas9 系统的功能组件（Bortesi, L. 和 Fischer, R.，2014 年）。面板 (a) 显示了 Cas9 正常发挥功能所必需的各个 RNA 组件。图 (b) 显示 RNA 成分连接在一起形成 sgRNA 序列。……………………………………………………………………...… 8 图 3.1：设计引物的 Lambda DNA 凝胶电泳（目标大小 1000bp）。孔 1 显示大小标准（以“M 表示），孔 2 和 3 显示成功 PCR …………………………………………………………………………………..... 20 图 3.2：基于 Origene 的 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳。含有梯状物的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物储备孔标记为“P”。标签 2/3、1X 和 4X 表示反应中使用的 DNA 浓度。标准浓度为 1X。孔 2-4、6-8、10-12、14-16、18 和 19 显示 CRISPR/Cas9 反应产物 .……………………………….…….….… 21 图 3.3：基于 Origene 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图，其中模板 DNA 浓度和 Cas9 试剂浓度均增加。含有梯度的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物原料孔标记为“P”。孔 3-6、7、8、10-13、14 和 15 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 10uL 模板 DNA .…………………………………………………..……………………..……...…. 22 图 3.4：基于 IDT 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图。含有梯状物的孔标有“L”。含有未切割的 PCR 原液产物的孔标有“P”。孔 2 不含任何产物。孔 3-6、7-10 和 11-14 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 tracrRNA。孔 11-14 含有 3 倍量（uL）的模板 DNA……… ...
年度评估报告于2023年3月15日
可以评估与您的地下气体存储设施相关的所有井，除了根据公共资源法规第3208条在2024年日历年之前已插入和放弃的井。（pub。资源代码，§3403.5。）根据卡尔格姆的记录，请查看与您的地下燃气存储设施相关的可评估井的列表。如果您认为在该附件中可评估的任何井都不应被视为可评估的，请在下表中提供一个理由，为什么无法评估井（S）。如果您的任何一个
甲烷减排技术部门概况
UOW 特性 改进高级数据分析，以组合和分析不同的数据集，从而更好地评估未记录的废弃井对环境的影响，开发经济高效且先进的井筒特性技术，包括现场、实时和长期传感器技术，以监测井筒完整性、甲烷排放和地下条件。 UOW 研究的必要性 • 各州报告的未记录废弃井总数估计在 310,000 到 800,000 之间。 • 根据美国环保署引用的 2015 年研究，美国未封堵的废弃井泄漏的甲烷量是封堵井的 5,000 倍。
上诉人，诉
1 通常，在对规则 12(b)(6) 驳回的上诉中，我们仅考虑诉状中指控的事实。但 Wells 要求我们也考虑他随诉状附上的证物，包括警方录像以及针对他的刑事诉讼记录中的证词和文件。下文和此处，被告均同意这样做是适当的。在双方同意的情况下，我们将 Wells 的证物视为诉状中采纳的证物。参见 Blankenship v. Manchin，471 F.3d 523，526 n.1 (4th Cir. 2006)；另参见 Balogh v. Virginia，120 F.4th 127，131 (4th Cir. 2024)；Occupy Columbia v. Haley，738 F.3d 107，116 (4th Cir. 2013)；参见 Doriety for Est.参见 Crenshaw v. Sletten 案，109 F.4th 670, 679–80 (4th Cir. 2024)。
与气候相关的财务披露工作队（...
Wells Fargo＆Company（NYSE：WFC）是一家领先的金融服务公司，资产约为1.9万亿美元。We proudly serve one in three U.S. households and more than 10% of small businesses in the U.S., and we are a leading middle market banking provider in the U.S. Wells Fargo provides a diversified set of banking, investment, and mortgage products and services, as well as consumer and commercial finance, through our four reportable operating segments: Consumer Banking and Lending, Commercial Banking, Corporate and Investment Banking, and Wealth & Investment Management.富国银行排名第47在《财富》 2023年美国最大的公司中排名。在我们服务的社区中，该公司通过支持住房负担能力，小型企业增长，财务健康和低碳经济来为所有人建立可持续的，包容的未来。
法戈利用垃圾填埋场发电为未来提供能源
2002 年，法戈垃圾填埋场开始变垃圾为宝，安装了一套由 20 口井组成的主动气体收集系统，其抽气能力约为每分钟 600 立方英尺 (cfm)。这些井直接钻入掩埋的废物中，通过管道相互连接，形成一个井场。这些井利用真空压力将气体从掩埋的废物中抽出，以免其有机会逸入大气。一旦气体被捕获，它们就会被转移到中央鼓风机站，在那里它们开始新的生命，成为发电的有用燃料来源。自 2002 年以来，该垃圾填埋场经历了四个扩建阶段。目前的井场由 62 口气井组成，总抽气能力约为 1,300 cfm。
SPWLA PDDA SIG第四届年度机器学习竞赛 - 加入挑战！
感谢加拿大ConocoPhillips，我们提供了一个丰富的井log数据集，其中有10条井（8井和2台测试井）的数百个裂缝。参与者将可以访问这些数据，并负责开发可以准确识别图像日志裂缝的机器学习模型。可以使用Jupyter笔记本草案来帮助您入门 - 它成功识别了一些骨折并提供了信心水平，为基础提供了坚实的基础。
希尔曼州立公园案例研究
本研究展示了航空磁测在希尔曼州立公园定位 19 世纪晚期油气井中的应用。研究区域位于宾夕法尼亚州西南部，为定位遗留油井提出了一些独特的挑战。宾夕法尼亚州许多遗留油井的位置记录并不存在。现有的记录往往不完整且不准确，旧井通常在未进行有效封堵的情况下被废弃。现在，未封堵的遗留油井可能充当与现代油气作业相关的流体和气体的垂直运移路径。希尔曼州立公园的油井在 20 世纪初被废弃，几乎没有留下井场痕迹。然而，钢制井套管通常留在现场。1940 年至 1960 年间，希尔曼州立公园 50% 的土地面积被露天开采煤炭。煤炭覆盖层的清除也将露天开采区域中直至煤炭深度的上部井套管清除。在重新分级作业期间，这些井被埋在矿山废料下。如今，希尔曼州立公园的大部分地区都被树木和茂密的植被覆盖，使用地面搜索定位井非常困难、耗时，而且往往徒劳无功。本研究中使用的航空磁测根据垂直钢制井套管的独特磁特征确定了井的位置，包括采矿区的埋井。航空磁测的结果与航空摄影、历史地图和高分辨率地形图相结合
附录C：现有资源清单
根据这项新协议，PSE将继续从Wells项目中获取一定比例的产出。PSE可用的实际利率将每年计算，主要基于Douglas Pud的零售负载要求。随着道格拉斯·普德（Douglas Pud）的零售负载的增长或下降，他们将为客户保留越来越多的Wells项目产出份额，我们购买的百分比将减少或增加。Puget Sound Energy与Chelan County PUD达成了20年的协议，以购买岩石覆盖率和岩石岛项目的25％，该项目延伸到2031年10月。Puget Sound Energy还与Grant County PUD达成了一项协议，占Wanapum和Priest Rapids开发项目的总产出的0.64％。与Grant County PUD的协议继续通过该项目的FERC许可，该许可于2052年3月31日结束。