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通过秀丽隐杆线虫胚胎中的有丝分裂polike激酶1（PLK-1）拆卸的核孔复合物的机制
在有丝分裂过程中拆除了保护和组织基因组的核包膜。在秀丽隐杆线虫合子中，父母原核的核包络崩溃（NEBD）在有丝分裂过程中是空间和节气调节的，以促进母体和父亲基因组的统一。核孔复合物（NPC）拆卸是NEBD的决定性步骤，对于核通透性至关重要。通过结合实时成像，生物化学和磷蛋白质组学，我们表明NPC拆卸是一个逐步的过程，它可以将类似polo的激酶1（PLK-1）（PLK-1） - 依赖性和独立步骤。plk-1靶向多个NPC子分类，包括细胞质丝，中央通道和内环。PLK-1被募集到并磷酸化几种多价接头核孔蛋白的内在无序区域（IDR）。值得注意的是，尽管磷脂在人和秀丽隐杆线虫核孔之间并不保守，但它们位于这两个物种的IDR中。我们的结果表明，靶向多价接头核孔的IDR是有丝分裂过程中NPC拆卸的进化保守的驱动器。
8。细胞生物学和生物技术
ival的分裂开始，从而将其转换为胚胎。胚胎细胞会经历重复的有丝分裂分裂。细胞分化从受孕的第14天开始。由于分化而形成了不同器官（骨细胞），肝细胞（肝细胞）和神经元等不同器官的细胞。分化前的胚胎细胞称为胚胎干细胞。220人体中不同类型的细胞是由单型细胞形成的，即胚胎干细胞。因此，干细胞是具有自我倾斜能力的未分化细胞的主要类型，它们是所有类型的人类细胞的母细胞。干细胞的这种特性称为胸膜尿素。已经发现，如果这些干细胞在14天开始分化之前就已经收集了。在第5至7天期间，根据刺激，在实验室中用某些生化刺激进行培养，它们可以将自己转变为所需的细胞类型，从而将其转变为组织，最后转化为器官。
坎贝尔生物学，11e（urry）
Campbell Biology，11E（Urry）第12章细胞周期12.1多项选择问题1）真核染色体由以下哪个大分子组成？a）DNA和RNA b）仅DNA c）DNA和蛋白质d）DNA和磷脂答案：C Bloom的分类学：知识/理解性部分：12.1 2）从受精卵（Zygote）开始，一系列六个细胞分裂会与有多少个细胞产生早期胚胎？a）12 b）16 c）32 d）64答案：d Bloom的分类法：应用/分析部分：12.1 3）在具有5个染色体对的二倍体细胞中（2n = 10），在细胞分裂周期的G2的一个核中会发现多少个丝粒？a）5 b）10 c）20 d）40答案：B布卢姆的分类法：应用/分析部分：12.2 4）科学家分离细胞周期各个阶段的细胞。它们分离了一组DNA的细胞比G1相细胞多1/2倍。这些细胞被分离出来的细胞周期中最有可能的部分是什么？a）在细胞周期中的g1和s相之间的b）在细胞周期的G2阶段c）在细胞周期的m相中d）在细胞周期的s阶段答案：d Bloom的分类法：应用/分析部分：12.2
干细胞是一个能够广泛增殖的细胞...
干细胞通过分化为其他类型的细胞的潜力来分类。胚胎干细胞是最有效的，因为它们必须成为体内的每种细胞。完整的分类包括：Totiptent-区分所有可能的单元格类型的能力。的例子是在卵受精时形成的合子，也是由合子分裂产生的前几个细胞。多能 - 分化为几乎所有细胞类型的能力（除了滋养细胞除外）。示例包括胚胎干细胞和细胞，这些细胞来自中胚层，内胚层和外胚层细菌层，这些细胞是在胚胎干细胞分化的开始阶段形成的。多功能 - 分化成紧密相关的细胞家族的能力。例子包括造血（成人）干细胞，这些干细胞可能成为红色和白细胞或血小板。[寡头 - 分化为几个细胞的能力。例子包括（成人）淋巴样或髓样干细胞。]一能力 - 仅产生自己类型的细胞的能力，但具有自我更新的特性，必须标记为干细胞。例子包括（成人）神经元干细胞。
多重编辑的小鼠概括羊毛猛mm象发作
图2。实验A和B：使用CRISPR/CAS9 RNP合子电穿孔在小鼠中进行基因编辑。（a）工作流程。我们将带有合成SGRNA的CAS9 RNP池进行了电穿孔（EP）。然后，我们将胚胎在体外培养为胚泡阶段，并基因分型，以估计编辑效率。接下来，我们将胚泡转移到替代物中进行动物生产实验。最后，我们在出生后21天从幼犬那里收集并从幼犬那里收集并进行了基因分型耳孔。（b）指南筛选。我们为每个目标基因设计了一个和八个指南，并筛选了每个指南，以编辑终端实验的效率。对于每个指南，平均总修饰效率（KO +意外编辑）作为灰色条呈现，KO效率作为未用于动物生产实验的指南的紫色棒，以及选择用于动物生产实验的指南的橙色条。栏的平均效率至少来自五个胚胎。每个圆圈代表一个单独的实验，其中包括从单个胚胎到多达18个胚胎池的数据。（c，e）小鼠的KO％曲线
转基因兔子作为生物生产者和生物模型
摘要。转基因 (GM) 动物对于解决与营养和健康有关的人类全球问题是必不可少的。兔子作为实验室、家养和农场动物，在研究中占据着特殊的地位。转基因兔子有望成为利用牛奶或血液生产生物活性 (BA) 蛋白的生物反应器，并且在生物医学中作为疾病的生物模型受到欢迎。迄今为止，世界上已经使用 CRISPR/Cas9 技术创建了许多转基因兔子-生物模型，即重组蛋白的生产者。全俄动物生理学、生物化学和营养研究所在通过将重组 DNA 微注射到受精卵原核中来获得转基因兔子-利用牛奶生产人类 BA 蛋白方面拥有丰富的经验。讨论了使用 CRISPR/Cas9 技术对兔乳清酸性蛋白 (WAP) 基因进行位点特异性修饰的可能性。获得了包含与 WAP 兔基因同源臂和质粒形式的位点特异性 CRISPR/Cas9 成分的 DNA 基质。对兔受精卵进行显微注射，并评估了体外胚胎的存活率。评估了使用 DNA 基质中巨细胞病毒启动子下的绿色荧光蛋白基因作为同源定向修复指标的效率。这项工作对于获得用乳汁 BA 蛋白代替 WAP 生产的兔子很有用。
通过 CRISPR 辅助 ssODN 介导的同源定向修复对绵羊进行 Otoferlin 基因编辑
OTOF 基因编码耳蜗内毛细胞中表达的耳蜗蛋白，其不同突变会诱发一种耳聋，而耳聋是人类无综合征隐性听觉神经病谱系障碍的主要原因。我们报告了使用与不同 Cas9 成分（mRNA 或蛋白质）相关的 CRISPR 系统，在单链寡脱氧核苷酸 (ssODN) 辅助下诱导同源定向修复 (HDR)，生成了第一个 OTOF 突变大型动物模型。使用不同浓度的两个靶向外显子 5 和 6 的 sgRNA 与 Cas9 mRNA 或蛋白质 (RNP) 结合，并与靶向外显子 5 中 HDR 的 ssODN 模板混合，该模板包含两个 STOP 序列。共出生 73 只羔羊，其中 13 只出现插入/缺失突变（17.8%），其中 8 只（61.5%）通过 HDR 发生敲入突变。较高浓度的 Cas9-RNP 能更有效地诱导靶向突变，但对胚胎存活率和妊娠率有负面影响。本研究首次报道了 OTOF 破坏绵羊的产生，这可能有助于更好地理解和开发与遗传疾病相关的人类耳聋的新疗法。这些结果支持使用 ssODN 辅助的 CRISPR/Cas 系统作为牲畜基因编辑的有效工具。
2 发展的生物和环境基础
人体中的大多数细胞通过称为有丝分裂的过程进行繁殖，在此过程中，DNA 自我复制，复制染色体，最终形成具有相同遗传物质的新细胞 (Sadler, 2018)。有丝分裂过程负责所有体细胞的复制。然而，性细胞以不同的方式繁殖，即通过减数分裂。首先，46 条染色体开始像有丝分裂一样复制自身。但在细胞完成分裂之前，会发生一个称为交叉的关键过程。染色体对对齐，DNA 片段交叉，从染色体对的一个成员移动到另一个成员，本质上是“混合”了 DNA。因此，交叉会产生独特的基因组合 (Sadler, 2018)。由此产生的细胞仅由 23 条单个未配对的染色体组成。这些细胞被称为配子，专门用于有性生殖：男性是精子，女性是卵子。卵子和精子在受精时结合，产生受精卵，即合子，它有 46 条染色体，形成 23 对，一半来自亲生母亲，一半来自亲生父亲。每个配子都有独特的遗传特征，据估计，个体可以产生数百万个遗传不同的配子（美国国家医学图书馆，2019 年）。
模拟基因的商业化实施...
摘要：猪流感病毒 A 抗性的产生以及基因技术的发展可以补充当前的控制措施，有助于提高动物福利标准和养猪的经济效率。我们创建了一个模拟模型来评估可在商业化、多层次养猪系统中实施的各种基因编辑方法的遗传和经济影响。我们的结果表明，基因编辑程序的长度与商品猪的遗传进展呈负相关，并且如果基因编辑效率更高，则达到抗性等位基因固定所需的时间会减少。模拟包括双基因模型中赋予的抗性、后代中基因嵌合体的包含以及选择准确性的影响。在所有情况下，嵌合体水平对达到抗性等位基因固定所需的时间和猪群的遗传进展的影响大于基因编辑效率和受精卵存活率。经济分析强调，与基因编辑相关的嵌合现象和猪流感 A 病毒控制策略对农场的影响相比，选择准确性不会影响基因编辑的持续时间和所需的投资。这些建模结果为商业猪基因编辑计划中针对两个基因的经济和遗传影响以及选择准确性和嵌合现象的影响提供了新的见解。
引用Beatakker，C。W. J.（1991）。量子点电导中库仑阻滞振荡的理论。取自https://hdl.handle.ne
研究设计，大小，持续时间：在小鼠模型中首先优化了CRISPR-CAS9对诱导靶向基因突变的效率。在B6D2F1菌株中比较了两种CRISPR-CAS9递送方法：S期注射（Zygote阶段）（N¼135）ver- SUS Sus-Sus II期（M相）注射（卵母细胞阶段）（卵母细胞阶段）（N¼23）。包括四个对照组：未注射的培养基控制Zygotes（N¼43）/卵母细胞（N¼48）；伪造的Zygotes（n¼45）/卵母细胞（n¼47）; Cas9-蛋白注射的Zygotes（n¼23）;和CAS9蛋白和加扰引导RNA（GRNA）注射的Zygotes（n¼27）。在POU5F1靶向的Zygotes（N¼37），培养基控制Zygotes（N¼19）和假注射的Zygotes（n¼15）中进行了免疫荧光分析（N¼19）（n¼15）。评估POU5F1 -NULL胚胎进一步发展体外的能力，将其他组的POU5F1靶标合子（N¼29）和培养基对照合子（N¼30）培养为种植体后植入阶段（8.5 dpf）。旨在确定归因于菌株变化的POU5F1 null胚胎的发育能力差异，第二个小鼠菌株的Zygotes -B6CBA（n¼52）的目标是针对的。总体而言，在IVM（中期II期）（n¼101）之后，在人卵母细胞中应用了优化的方法。对照组由注射的精子（ICSI）IVM卵母细胞（N¼33）组成。在注入人类CRISPR（n¼10）和培养基对照（n¼9）人类胚胎中进行免疫荧光分析。