摘要。转基因 (GM) 动物对于解决与营养和健康有关的人类全球问题是必不可少的。兔子作为实验室、家养和农场动物,在研究中占据着特殊的地位。转基因兔子有望成为利用牛奶或血液生产生物活性 (BA) 蛋白的生物反应器,并且在生物医学中作为疾病的生物模型受到欢迎。迄今为止,世界上已经使用 CRISPR/Cas9 技术创建了许多转基因兔子-生物模型,即重组蛋白的生产者。全俄动物生理学、生物化学和营养研究所在通过将重组 DNA 微注射到受精卵原核中来获得转基因兔子-利用牛奶生产人类 BA 蛋白方面拥有丰富的经验。讨论了使用 CRISPR/Cas9 技术对兔乳清酸性蛋白 (WAP) 基因进行位点特异性修饰的可能性。获得了包含与 WAP 兔基因同源臂和质粒形式的位点特异性 CRISPR/Cas9 成分的 DNA 基质。对兔受精卵进行显微注射,并评估了体外胚胎的存活率。评估了使用 DNA 基质中巨细胞病毒启动子下的绿色荧光蛋白基因作为同源定向修复指标的效率。这项工作对于获得用乳汁 BA 蛋白代替 WAP 生产的兔子很有用。
主要关键词