这是被接受出版的作者手稿,并且已经进行了完整的同行评审,但尚未通过复制,排版,分页和校对过程,这可能会导致此版本和记录版本之间的差异。请引用本文为doi:10.1111/jop.13252
多次研究发现,通过组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HDACI)治疗增加组蛋白乙酰化可以减轻记忆和挽救认知障碍,但其作用方式尚未完全理解。尤其是尚不清楚HDACIS在系统上应用和缺乏基因组靶标的选择将如何专门改善与内存相关的分子过程。这种特殊的山丘的一种理论称为认知表观遗传启动(CEP),根据该理论,HDACIS通过促进通过学习自身刺激的神经可塑性相关基因的表达来促进记忆。在这篇综述中,我们总结了支持CEP的实验证据,描述了HDACIS的新发现的靶向效应,并突出了药物诱导的CEP和自然发生的CEP之间的相似性。理解CEP的基本机制鉴于HDACIS作为认知增强剂的临床前前提很重要。
摘要有丝分裂脱乙酰酶复合物 (MiDAC) 是一种最近发现的组蛋白脱乙酰酶 (HDAC) 复合物。虽然其他 HDAC 复合物与神经发生有关,但 MiDAC 的生理作用仍然未知。在这里,我们表明 MiDAC 是神经分化的重要调节器。我们证明 MiDAC 可作为神经发育基因表达程序的调节器,并与神经突生长的重要调节器结合。MiDAC 通过一种暗示启动子和增强子上 H4K20ac 去除的机制上调促神经基因(例如编码分泌配体 SLIT3 和 NETRIN1 (NTN1) 的基因)的表达。相反,MiDAC 通过减少神经发生负调节因子的启动子近端和远端元件上的 H3K27ac 来抑制基因表达。此外,MiDAC 的缺失会导致神经突生长缺陷,可以通过补充 SLIT3 和/或 NTN1 来挽救。这些发现表明 MiDAC 在调节 SLIT3 和 NTN1 信号轴的配体以确保神经突发育的正确完整性方面发挥着至关重要的作用。
• 方法 2(亲和纯化) 1. 洗涤 4 o C(冰上)用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 2. 添加样品溶液 将 1000ul HeLa 细胞提取物添加到珠子中。 3. 反应 4 o C 孵育 240 分钟。 4. 洗涤 除去样品溶液。4 o C(冰上)用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 5. 洗脱 伏立诺他洗脱: - 添加 40ul 洗脱缓冲液并重新悬浮珠子。在 98 o C 下煮沸 5 分钟并除去珠子。 伏立诺他洗脱: + 在洗涤缓冲液中加入 30ul 25mM 伏立诺他并重新悬浮珠子。将管放在冰上一小时,通过间歇轻拍使结合的蛋白质洗脱。旋转后,磁性分离。将上清液转移到新的干净管中98 o C 煮沸 5 分钟。 6. 通过 SDS-PAGE 和银染分析样品
