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血液再生工程:体外红细胞制备技术的研究现状与前景
4北京基因组和精密医学技术的主要实验室，北京100101，中国对应作者：Fang Xiangdong，电子邮件：fangxd@big.ac.ac.cn
体外实验
目的：芹菜素是一种具有抗肿瘤和抗炎特性的黄酮类化合物，目前正在研究其在治疗肝细胞癌 (HCC) 中的潜力。本研究评估了芹菜素对 SNU-449 HCC 细胞系增殖、侵袭和活力的影响。方法：为了评估芹菜素对 HCC 的抗增殖和抗转移作用，我们在 24、48 和 72 小时进行了 MTT 试验，使用了六种芹菜素浓度（2.5-100 µM）。在确定 48 小时的最低有效浓度后，在该剂量下进行了 SRB、菌落形成和伤口愈合试验。所有结果均以中位数（四分位数间距）表示。结果：MTT 试验确定 72 小时时 5 µM 芹菜素为最低有效剂量。 5 µM 芹菜素和未治疗对照组的吸光度分别为 0.581（IQR：0.26）和 0.67（IQR：0.049）（p>0.05）。SRB 测定显示芹菜素治疗组和对照组之间没有显着差异（0.54 [IQR：0.07] vs. 0.381 [IQR：0.365]；p>0.05）。菌落形成测定显示芹菜素治疗组的存活分数略有降低（相对于对照组为 74%）。伤口愈合测定结束时，芹菜素治疗组的伤口面积为 528,366（IQR：691,200）µm²，对照组为 528,861（IQR：523,150）µm²（p>0.05）。芹菜素治疗组和对照组的伤口愈合率相似（59.5 [IQR：36.9]% vs. 59.75 [IQR：15.4]%；p>0.05）。结论：本研究结果表明，芹菜素对肝癌细胞的直接抗增殖和抗转移作用可能有限。进一步研究肿瘤微环境的调节和抗肿瘤免疫反应的诱导可能会提供有价值的见解。关键词：芹菜素、抗转移治疗、抗增殖作用、肝细胞癌、SNU-449 细胞系
体外研究
乳腺癌是一种复杂的异质疾病，具有独特的分子亚型，它限制了每个亚型的优化治疗策略的发展。癌症基因疗法和晚期/难治性癌症的潜在疗法可能有望成为乳腺癌。结合了肿瘤 - 循环脂质纳米颗粒（LNP）和诱导的caspase-9（IC9）mRNA，我们旨在制定一种新型的治疗策略，以解决难治性乳腺癌。LNP的抗肿瘤作用：MDA-MB231，SKBR3和MCF-7。肿瘤细胞。通过逆转录酶定量PCR评估了与凋亡相关的基因。lnps可以有效地将包裹的GFP mRNA传递给所有三种癌细胞系（> 80％GFP表达。在目标细胞中）。此外，用IC9 mRNA（IC9-LNP）和CID封装的LNP在体外对所有癌细胞系显示了细胞毒性活性。有趣的是，在癌细胞系中，对IC9基因疗法的敏感性是良好的。IC9-LNP具有CID诱导的对SKBR3和MDA-MB231细胞的有效细胞毒性作用，但仅对MCF7细胞产生轻度的细胞毒性作用。量化相关基因的定量表明，高BAX/BCL-2比率可能与IC9-LNPÞCID易感性有关。 因此，使用IC9-LNP和CID的癌症基因治疗可能是治疗乳腺癌的有希望的替代方法，尤其是对于侵略性乳腺癌而言。 ©2022 Elsevier Inc.保留所有权利。量化相关基因的定量表明，高BAX/BCL-2比率可能与IC9-LNPÞCID易感性有关。因此，使用IC9-LNP和CID的癌症基因治疗可能是治疗乳腺癌的有希望的替代方法，尤其是对于侵略性乳腺癌而言。©2022 Elsevier Inc.保留所有权利。
体外和计算机研究
进行了本研究，以研究c-大环亚钠肽（C-ANP 4-23）对人脂肪衍生的干细胞在10天内分化为脂肪细胞的人（1 m m m m）。在存在或不存在C-ANP 4-23的情况下，分别通过QRT-PCR和Western印迹确定了细胞内cAMP，CGMP和蛋白激酶A水平的水平，分别通过QRT-PCR和Western印迹确定蛋白质表达。还确定了脂解和葡萄糖摄取的水平。c-ANP 4-23治疗显着增加了细胞内cAMP水平和葡萄糖转运蛋白4型（GLUT4）和蛋白激酶的基因表达，AMP激活，α1催化亚基（AMPK）。Western印迹显示GLUT4和磷光体A水平的显着增加。重要的是，腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536废除了这些影响。此外，C-ANP 4-23增加了葡萄糖摄取2倍。我们的结果表明，C-ANP 4-23增强了葡萄糖代谢，并可能有助于开发基于肽的新代谢疾病疗法。©2016 Elsevier Ireland Ltd.保留所有权利。
体外繁殖 - 兼容 - ...
该研究的目的是相对研究三个计算机辅助设计/计算机辅助制造（CAD/CAM）牙科材料的抗压强度：玻璃陶瓷IPS Empress CAD（iVoclar Vivadent），混合陶瓷陶瓷ceramic Ceramic（GC）和聚合物 - 聚合物 - 聚合物 - 释放的石墨烯G-Cam（Graphenano dental）。材料和方法45个样品由三种CAD/CAM材料制造的单单元摩尔冠组成，在3D打印基台上（Asiga Dental Resin）粘合了粘合。根据牙冠厚度将样品分为3组（n = 15）；组1下的牙缘/宫颈边缘-0.6 mm/0.4 mm，组2-1 mm/0.7 mm和3-1.5 mm/1 mm组。另外，通过CAD/CAM技术制备了由三个牙冠和基台材料制造的20个圆柱样品（n = 5）。通过使用通用测试机（Instron 3366-10KN，美国），将所有样品和样品均承受轴向压缩载荷，直到裂缝为止。结果，Empress CAD的压缩强度值为1258 MPa，Cerasmart为501.3 MPa，G-CAM的435 MPa和360 MPa Asiga Asiga树脂。g-cam冠状牙冠表现出比Cerasmart（1295.4-1642.9N）和Empress CAD（494.3-597.5N）更高的最大压缩载荷（1701.5-2011.8N）。结论CAD/CAM冠材料提出了不同的机械行为；与G-CAM和Asiga树脂相比，CAD和Cerasmart皇后表现出脆弱的行为，具有高抗压强度。
Cas12a 的体外应用
Bender MA。引自：Adam MP、Ardinger HH、Pagon RA、Wallace SE、Bean LJH、Stephens K 和 Amemiya A 编辑。Gene Reviews® [Internet]。西雅图 (WA)：华盛顿大学，西雅图；1993-2018 年。
体内，体外和计算机：...
使用三种补充方法研究了生活系统：活细胞，无细胞系统和计算机介导的建模。在理解中进展，使研究人员能够创建新颖的chass和工业过程，这基于结合体内，体外和计算机研究的周期。这种设计 - 构建 - 测试 - 在实验和分析之间学习迭代回路周期，将物理学，遗传学，生物化学和生物信息学结合在一起，以保持前进的方式。由于计算机辅助方法并非受到感兴趣实体的物质性质的直接限制，因此我们在这里插图该良性周期如何允许研究人员探索从整个底盘到新型代谢周期中存在的化学性质。特别强调进化的重要性。
体外毒理学研究
石棉因其独特特性而被广泛使用。众所周知，接触石棉会严重损害健康，但贵橄榄石仍在使用，因为一些国家认为它毒性较低且不具有生物持久性。本研究旨在探究在石棉纤维（最终浓度为50 μ g/ ml）、长贵橄榄石纤维（CHR-L）和短贵橄榄石纤维（CHR-S）存在的情况下，胎盘组织增殖、分化和细胞死亡背后的细胞过程是否会发生改变。本研究使用BeWo细胞系（一种模拟合体滋养层（STB）——胎盘绒毛外层的体外模型）进行研究。我们的数据表明，所有分析的纤维均不会改变合体滋养层细胞的形成，但所有纤维均会诱导活性氧（ROS）形成并降低细胞增殖。此外，我们还发现，只有CHR-L纤维诱导的纤维能够诱导不可逆的DNA改变，最终导致细胞凋亡。事实上，暴露于CHR-L纤维的BeWo细胞中，裂解的CASP3蛋白（一种细胞凋亡标志物）显著增加。这些数据表明，CHR-L可能诱导胎盘绒毛死亡，从而导致胎盘发育受损。胎盘发育受损是许多妊娠期疾病的根源，例如先兆子痫和宫内生长迟缓。由于这些疾病对胎儿和母亲的生命非常危险，我们建议妇科医生仔细评估母亲的居住区域、工作环境、日常饮食和使用的材料，尽可能避免接触这些纤维。