XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System内体
引用：Sancaktutan Ş，İspahi B，Aslan Y.Ş，Solak K，Ünver Y. Magnetofection：一种利用磁性纳米粒子进行有效基因转移的神奇技术
基因治疗是一种通过关闭致病或功能失调的基因并将特定基因传递到体内来治疗疾病的治疗方法。将治疗基因传递到目标细胞仍然是基因转移的一个限制。因此，基因转移是基因治疗的重要组成部分。基因传递系统通常分为基于病毒和非基于病毒的系统。在众多纳米结构中，纳米粒子被广泛用作非病毒基因转移的载体。磁性纳米粒子 (MNP) 近年来因其独特的磁性而被广泛应用于生物医学领域。原则上，它们的电荷和尺寸使 MNP 适合到达目标位置。此外，高表面积/体积比使 MNP 成为基因转移的理想选择。使用 MNP 进行基因转移的主要方法之一是磁转染。在这种方法中，DNA 和 MNP 在含盐的缓冲液中结合形成一种称为磁转染的复合物。这种复合物可以在磁场的影响下穿透细胞。带负电荷的 DNA 需要经过修饰才能穿过带负电荷的细胞膜，与 MNP 形成复合物，并增加其稳定性和生物相容性。为此，常用的聚合物如 PEI（例如两亲性聚（L-赖氨酸）、聚酰胺胺 (PAA) 和 PEG）用作基因载体。此外，MNP 和 PEI 等聚合物有助于 DNA 的内体逃逸。这篇小型综述总结了磁性粒子在基因转移的所有动态过程（纳米粒子合成、基因结合、细胞摄取、内体逃逸和体内靶向）中的特定基因转染（磁转染）。
全基因组 CRISPR 筛选确定 TLR3 信号通路的调控因子
摘要 TLR 的一个子集专门通过对内体进行核酸检测来检测进入的病原体。其中，TLR3 感知内体中双链 RNA 的异常存在，并通过激活 NF- j B 和 IRF3 启动强大的先天免疫反应。然而，控制 TLR3 调节的机制仍然不甚明了。为了确定参与 TLR3 通路的新分子参与者，我们使用 CRISPR/Cas9 技术进行了全基因组筛选。我们生成了携带 NF- j B 反应启动子的 TLR3 + 报告细胞，该启动子控制 GFP 表达。接下来用单向导 RNA (sgRNA) 文库转导细胞，用 poly(I:C) 进行连续刺激，并对 GFP 阴性细胞进行分类。通过深度测序估计的 sgRNA 富集确定了 TLR3 诱导的 NF-j B 激活所需的基因。在这些基因中，通过筛选确定了五个已知与 TLR3 通路密切相关的基因，包括 TLR3 本身和伴侣 UNC93B1，从而验证了我们的策略。我们进一步研究了前 40 个基因，并重点研究了转录因子芳烃受体 (AhR)。AhR 的消耗对 TLR3 反应有双重影响，消除了 IL-8 的产生并增强了 IP-10 的释放。此外，在暴露于 poly(I:C) 的原代人巨噬细胞中，AhR 激活增强了 IL-8 并减少了 IP-10 的释放。总体而言，这些结果表明 AhR 在 TLR3 细胞先天免疫反应中发挥作用。
前列腺特异性膜抗原靶向探针，用于成像前列腺癌细胞中释放货物
摘要：磷氧化连接器的可调节性质可作为ph-触发的受控释放平台的广泛适用性，尤其是在抗体和小分子 - 毒物缀合物（ADC和SMDC）的背景下，在那里需要新的接头技术。在此，我们深入探讨了从均基磷脂酸酸可裂解的连接器中释放转交通的有效载荷。在代表全身循环，早期和晚期内体和溶酶体的pH条件下观察到有效载荷释放的有效载荷释放的动力学。发现有效载荷释放以两个关键的连续步骤进行：（1）P -N键水解和（2）间隔剂浸入。发现这两个步骤遵循伪 - 前阶动力学，并且对pH的依赖性相反。p -n键水解随pH值的降低而增加，而在生理pH值下，间隔剂的浸润最快。尽管这两个步骤的释放动力学对比了，但在轻度酸性pH值（5.0 - 5.5）下观察到最大有效载荷释放，而生理pH值最小的有效载荷释放。，我们将此磷酰胺类 - 付费接头系统整合到了PSMA靶向的荧光转探探针中，以研究在表达PSMA的前列腺癌细胞中溶出的细胞内传播和释放。结果表明，在这些细胞的内体和溶酶体隔室中，香豆素有效载荷的良好转盘和积累。该连接器的释放属性将其标记为ADC和SMDC模块化设计中的一种有吸引力的替代方案，该替代品需要由伴随细胞内traigking的pH变化触发的选择性细胞内有效载荷释放。
档案中的库弗特·Unige疫苗在护理中犹豫...
受体。ms4a4a是一种四翼烷分子，在分化和极化过程中，在巨噬细胞中选择性表达，对于自然杀伤细胞介导的转移抗性的dectin-1依赖性激活必不可少。它的激活与各种病理有关，包括与人类的系统性硬化相关的肺纤维化。[1] 8.80 0.033 TBC1D4 TBC1域家族，成员4可以充当Rab2a，Rab8a，Rab10和Rab14的GTPase激活蛋白。同工型2促进胰岛素诱导的葡萄糖转运蛋白转运蛋白SLC2A4/GLUT4在质膜上的易位，从而增加了葡萄糖摄取。 [2] 4.99 0.018 LTB淋巴毒素B细胞因子与LTBR/TNFRSF3结合。 可能在免疫反应调节中发挥特定作用。 [3] 4.85 0.038 TLR8 TOLL样受体8内体受体，在先天和适应性免疫中起关键作用。 其对下游转录因子NF-KAPPA-B和IRF7的激活诱导促炎性细胞因子和干扰素产生。 [4] 4.02 0.043 AKR1B8 Aldo-Keto还原酶家族1，成员B8同工型2促进胰岛素诱导的葡萄糖转运蛋白转运蛋白SLC2A4/GLUT4在质膜上的易位，从而增加了葡萄糖摄取。[2] 4.99 0.018 LTB淋巴毒素B细胞因子与LTBR/TNFRSF3结合。可能在免疫反应调节中发挥特定作用。[3] 4.85 0.038 TLR8 TOLL样受体8内体受体，在先天和适应性免疫中起关键作用。其对下游转录因子NF-KAPPA-B和IRF7的激活诱导促炎性细胞因子和干扰素产生。[4] 4.02 0.043 AKR1B8 Aldo-Keto还原酶家族1，成员B8
G蛋白偶联受体作为胶质母细胞瘤的治疗靶标
图2 G蛋白亚基激活后触发的G蛋白偶联受体的各种信号通路的示意图（A，B和C）。激动剂结合的GPCR在G A亚基上交换GDP，从而触发了G a（S，I，Q，12）从受体和G BC触发。（a）激活的G A S刺激膜相关的酶腺苷酸环化酶（AC），从而增加了ATP - CAMP转换。cAMP充当第二个使蛋白激酶A（PKA）的信使，该蛋白激酶A（PKA）可以磷酸化多个下游靶标。而g a i亚基抑制了交流。（b）激活的G A Q刺激膜结合的磷脂酶C（PLC）至裂解磷脂酰肌醇双磷酸盐（PIP 2）进入第二个使者三磷酸肌醇（IP 3）和二酰基甘油（DAG）。IP 3增加了细胞内钙浓度（Ca 2+），而膜结合的DAG通过将其从细胞质转移到质膜来激活PKC。GPCR激酶（GRK）磷酸化G蛋白独立的配体结合GPCR，以启动B- arrestin的募集并阻止G蛋白偶联。 GPCR-B - 抑制蛋白复合物促进内吞作用，运输配体 - GPCRs对内体进行分类，以回收到质膜或信号和各种细胞过程的信号传导和调节。 用Biorender（biorender.com）准备的数字。GPCR激酶（GRK）磷酸化G蛋白独立的配体结合GPCR，以启动B- arrestin的募集并阻止G蛋白偶联。GPCR-B - 抑制蛋白复合物促进内吞作用，运输配体 - GPCRs对内体进行分类，以回收到质膜或信号和各种细胞过程的信号传导和调节。用Biorender（biorender.com）准备的数字。
114503219.pdf
图2。外泌体的生物发生（A）和组成（B）。质膜内吞作用或内部萌芽会导致形成早期分类内体（ESE）。然后，ESE产生晚期分类内体（LSE），并通过LSE中的另一个内陷产生肺内囊泡（ILV）。在ILV积累后，LSE成熟到MVB中。 MVB与质膜的膜融合导致外泌体分泌到细胞外环境中。 MVB与溶酶体或自噬体融合后也可以降解[40，41]。 外泌体可以携带各种类型的生物分子，例如蛋白质，脂质，DNA，RNA和代谢物。 蛋白质，例如CD9，CD63，CD81，氟列蛋白-1和TSG 101，通常被用作外泌体的标记[42，43]。在ILV积累后，LSE成熟到MVB中。MVB与质膜的膜融合导致外泌体分泌到细胞外环境中。 MVB与溶酶体或自噬体融合后也可以降解[40，41]。 外泌体可以携带各种类型的生物分子，例如蛋白质，脂质，DNA，RNA和代谢物。 蛋白质，例如CD9，CD63，CD81，氟列蛋白-1和TSG 101，通常被用作外泌体的标记[42，43]。MVB与质膜的膜融合导致外泌体分泌到细胞外环境中。MVB与溶酶体或自噬体融合后也可以降解[40，41]。外泌体可以携带各种类型的生物分子，例如蛋白质，脂质，DNA，RNA和代谢物。蛋白质，例如CD9，CD63，CD81，氟列蛋白-1和TSG 101，通常被用作外泌体的标记[42，43]。
转染级PEI（MW 40000）
转染级聚乙烯亚胺（PEI）是一种强大的，可信赖的且具有成本效益的试剂，被广泛认为是当前体外和体内转染的当前金标准。pei具有高密度的质子氨基基团，每三分之一原子具有氨基氮。这几乎在任何pH值下都具有高缓冲能力。因此，在内体内，PEI破坏了液泡并将遗传物质释放到细胞质中。与DNA，有效进入细胞的稳定络合以及逃脱内体的能力使PEI成为高效的转染试剂，这对于广泛的细胞系/类型兼容，包括最常用的HEK293和在粘附和悬浮培养物中生长的最常用的HEK293和CHO细胞。
发现自组装小分子作为疫苗...
摘要：免疫增强剂，称为辅助，触发早期的先天免疫反应，以确保疫苗的强大和持久的适应性免疫反应产生。在这里，我们提出的研究利用了一个自组装的小分子库来开发新型疫苗佐剂。基于的基于细胞的筛选和随后的结构优化，导致发现了一个简单的，化学上可拖延的脱氧乙酸衍生物（分子6，也称为Cholicamide），其定义明确的纳米组装良好地引起了巨噬细胞和树突状细胞中的先天免疫反应。 功能和机械分析表明，类似病毒的组装被细胞内部吞没，并通过Toll样受体7（TLR7）刺激先天免疫反应，这是一种检测单链病毒RNA的内体TLR。 作为小鼠中的流感疫苗佐剂，分子6与临床使用的辅助药物一样有效。 此处描述的研究为一种新方法铺平了道路，以发现和设计针对包括新兴病毒在内的病原体的小分子佐剂。的基于细胞的筛选和随后的结构优化，导致发现了一个简单的，化学上可拖延的脱氧乙酸衍生物（分子6，也称为Cholicamide），其定义明确的纳米组装良好地引起了巨噬细胞和树突状细胞中的先天免疫反应。功能和机械分析表明，类似病毒的组装被细胞内部吞没，并通过Toll样受体7（TLR7）刺激先天免疫反应，这是一种检测单链病毒RNA的内体TLR。作为小鼠中的流感疫苗佐剂，分子6与临床使用的辅助药物一样有效。此处描述的研究为一种新方法铺平了道路，以发现和设计针对包括新兴病毒在内的病原体的小分子佐剂。
canagliflozin对NHE3和线粒体复合物I活性抑制近端小管流体和白蛋白摄取
超出血糖控制，SGLT2抑制剂（SGLT2IS）对心脏功能具有保护作用。肾脏重新保护涉及抑制NHE3，导致ATP依赖性管状工作量减少和线粒体氧的消耗。NHE3活性对于调节内体pH值也很重要，但是SGLT2I对内吞作用的影响尚不清楚。我们使用了近端小管（PT）细胞的高度分化的细胞培养模型来确定SGLT2I对nephron节段中依赖性的流体转运和内吞摄取的直接影响。引人注目的是，canagli lof ozin，但没有empagli lozin降低了跨细胞单层的流体转运，并极大地抑制了白蛋白的内吞摄取。这些作用与葡萄糖无关，并以临床相关的药物浓度发生。canagli-lof ozin急性抑制表面NHE3活性，与直接作用一致，但不会影响内体pH或NHE3磷酸化。此外，Canagli lozin迅速，有选择地抑制线粒体复合物I活性。通过二甲双胍抑制线粒体复合物I，概括了Canagli ozin对内吞作用和流体转运的影响，而向下流效应子AMPK和MTOR的调节却没有。小鼠在24小时内将单剂量的canagli lof ozin排出了两倍的尿液，尽管摄入相似，但与empagli lozin处理的小鼠相比，在24小时内排出了两倍。我们得出的结论是，Canagli -flozin通过直接抑制NHE3和AMPK/MTOR轴上游上游的直接抑制NHE3和线粒体功能，选择性地抑制了PT细胞中依赖性的流体转运和白蛋白的摄取。Canagli丙嗪蛋白的这些其他靶标显着促进了降低的PtNaÞ-依赖性的流体转运。
生物制剂和小分子在covid-19的治疗中
COVID-19的发病机理涉及与其受体的结合，ACE2（血管紧张素转化酶-2）蛋白，并使用细胞蛋白酶TMPRSS2进入靶细胞。6因此，TMPRSS2抑制剂将阻止病毒的进入，因此可以选择有价值的治疗选择。imatinib是一种BCR-ABL激酶抑制剂，抑制病毒体与内体膜brane的融合。7例服用上调ACE2受体（包括ACE抑制剂和ARB阻滞剂）的药物应停止或其他药物类别取代。这些ACE2回收不仅在肺的肺泡组织中表达，而且在血管中的眼睛，口腔粘膜，肠和肠和内皮细胞表达，损伤皮肤的污染，如特应性皮肤炎，如特应性皮肤炎，泡沫状疾病和牛皮癣，如果允许疾病，如果允许危险或可能危险。8