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实现多千碱基长距离传输的方法和技术......
1 CRISP-HR Therapeutics，加利福尼亚州圣卡洛斯 94070 摘要 CRISPR 支持的细胞和基因疗法有可能彻底改变遗传医学领域。然而，由于当前工具和技术的局限性，绝大多数罕见病仍然无法治愈。到目前为止，大多数矫正治疗方法仅限于逐个突变的方法，其中 HDR 或较新的技术（如碱基编辑或主要编辑）一次重写小片段 DNA（~1-100 bp）。虽然这些方法很强大，但短编辑窗口（相对于人类基因的大小）在经济和/或技术上与大多数罕见疾病突变谱不兼容。在这里，我们首次证明 CRISPR/Cas9 可用于通过我们称为“长距离重写”的无选择过程同时“重写”人类基因组的 7kb+ 部分。长距离重写方法与多种核酸酶、细胞类型和基因组位点兼容，并且可以与基于双链断裂 (DSB) 和非 DSB 的方法一起使用。简介 CRISPR 和相关技术已被证明在从基础研发到工业以及最近的治疗应用的各个领域都非常有用。CRISPR/Cas9 系统最基本的用途是针对基因组中的特定 DNA 片段并创建小的插入或删除 (INDEL) 来破坏各种遗传元素（蛋白质编码序列、启动子/增强子、剪接位点等）。1–4 虽然这是一种强大的技术，但由于“破坏”基因可产生治疗益处的疾病非常有限，因此该方法在治疗应用方面受到限制。此外，人们越来越担心通过有害的双链断裂 (DSB) 介导的编辑产生的不良局部和全局副作用。5,6 因此，人们一直在努力开发工具和技术，以实现更可编程和更复杂的编辑，同时减少不良副作用。这些努力促成了各种具有扩展功能的 Cas9 融合蛋白的开发，例如 Base 和 Prime 编辑器 7,8 、CRISPRa 和 CRISPRi 9,10 、旨在操纵内源性修复途径选择的 Cas 蛋白工程 11-13 ，以及无数其他功能 14 。这些努力使得我们能够选择性地替换特定碱基、将任何碱基交换为另一个碱基、在不进行基因组修饰的情况下调节基因表达，以及操纵
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2024 年 7 月 10 日公告陆上自卫队东千岁分包官......
有资格参加北海道地区比赛的人员。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件） （3）严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (4) 该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的暂停提名的处罚。 （5）该人不属于“暂停与设备等和服务采购相关的指定等”附件的对象。 3 合同条款、投标及合同要诀的公布地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队承包课及北方军会计部队网站 4 竞争性投标的地点和日期 （1）地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队投标室（建筑号3217） （2）日期和时间：2024年7月26日星期五上午9点 5 有关保证金等的事项 （1）投标保证金：免除。但若中标人未依《招标及合同指南》规定履行合同程序
公告 2022 年 7 月 20 日日本陆上自卫队东千岁分包官...
有资格参加北海道地区比赛的选手。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件） （3）严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (4) 该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的暂停提名的处罚。 （5）该人不属于“暂停与设备等和服务采购相关的指定等”附件的对象。 3 合同条款、投标及合同要诀查阅地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队承包课及北方军会计部队网站 4 投标地点和日期 （1）地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队投标室（建筑号3217） （2）日期和时间：2022年8月3日（星期三）上午9点30分（上次投标完成后方可入场） 5 有关保证金等事项 （1）投标保证金：免除。但是，如果中标人不按照《招标与合同指南》的规定履行订立合同的程序，
2024年5月10日公告日本陆上自卫队东千岁分包官...
有资格参加北海道地区比赛的选手。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件） （3）严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (4) 该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的暂停提名的处罚。 （5）该人不属于“暂停与设备等和服务采购相关的指定等”附件的对象。 3 合同条款、投标及合同要诀的公布地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队承包课及北方军会计部队网站 4 竞争性投标的地点和日期 （1）地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队投标室（建筑号3217） （2）日期和时间：2024年5月24日星期四上午9点 5 有关保证金等的事项 （1）投标保证金：免除。但是，如果中标人不按照《招标与合同指南》的规定履行订立合同的程序，
公告 2024 年 7 月 11 日日本陆上自卫队分包官，东千岁……
有资格参加北海道地区比赛的选手。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件） （3）严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (4) 该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的暂停提名的处罚。 （5）该人不属于“暂停与设备等和服务采购相关的指定等”附件的对象。 3 合同条款、投标及合同要诀的公布地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队承包课及北方军会计部队网站 4 投标地点及日期 （1）地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队投标室（建筑号3217） （2）日期及时间：2024年7月26日星期五上午9点30分 5 有关保证金等事项 （1）投标保证金：免除。但是，如果中标人不按照《招标与合同指南》的规定履行订立合同的程序，
公告 2024 年 2 月 9 日日本陆上自卫队东千岁分包官...
有资格参加北海道地区比赛的选手。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件） （3）严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (4) 该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的暂停提名的处罚。 （5）该人不属于“暂停与设备等和服务采购相关的指定等”附件的对象。 3 合同条款、投标及合同要诀的公布地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队承包课及北方军会计部队网站 4 竞争性投标的地点和日期 （1）地点：日本陆上自卫队东千岁警备队第324会计中队投标室（建筑号3217） （2）日期和时间：2024年2月26日星期一下午1点 5 有关保证金等的事项 （1）投标保证金：免除。但是，如果中标人不按照《招标与合同指南》的规定履行订立合同的程序，
公告 2024 年 2 月 1 日 陆上自卫队东千岁分包官......
有资格参加凯多地区比赛的人。 （投标时须提交资格审查结果通知书复印件。） （三）严格遵守《投标及合同规则》的人员。 (4) 该人目前没有被签约官员等暂停提名。 (5) 不属于所附文件“与采购设备等和服务有关的暂停提名等”的情况。 3 Place to show contract terms, bidding, and contract guidelines Ground Self-Defense Force Higashi-Chitose Garrison 324th Accounting Squadron Contract Team and Northern Area Accounting Unit homepage 4 Place and date and time of competitive bidding execution (1) Location Ground Self-Defense Force Higashi-Chitose Garrison 324th Accounting Squadron bidding room (building number 3217) (2) Date and time Thursday, February 15, 2020 09:30 5 关于保证金等事项 （1）免除投标保证金。但中标人未按照《招标投标与合同指引》办理签订合同手续的