这项研究旨在通过化学和感觉评估来表征Zelen(Vitis Vinifera L.)葡萄酒的芳香独特性,这是一种来自斯洛文尼亚西部的Vipava山谷的自多品种。通过HS-SPME-GC-MS分析了七十种芳香族化合物,包括品种硫醇,酯,C6-醇,挥发性苯酚,萜类化合物,萜类化合物和丙烯酸酯,在两个调查中,通过HS-SPME-GC-MS进行了比较,将Zelen Wines与Vipava Valley的其他四种种植者进行了比较。Zelen葡萄酒的嗅觉空间是通过将其芳香剖面与Pinela葡萄酒的芳香剖面在分类任务中进行比较,并通过HPLC分数获得的芳香族馏分的嗅探。Zelen葡萄酒的特征是干草药和辣味,例如百里香,迷迭香和罗勒,与Pinela Wines相比。Zelen葡萄酒的化学特征是由单烯烯的原始混合物(包括萜烯异构体,林烯,limonene,p-甲苯,萜酚,linalool,linalool和α-耐酚)的原始混合物所支配的。获得的4-乙烯基鸟醇和甲基水杨酸酯的浓度位于与报道的嗅觉阈值接近或更高的水平上,从而推断了这些化合物对Zelen葡萄酒的辛辣芳香族成分的潜在贡献。通过HPLC半生育分级溶解的Zelen葡萄酒的两种芳族馏分,并通过HS-SPME-GC-MS进行了进一步分析,并通过HS-SPME-GC-MS进行了浏览的存在,这些原始混合物的存在是水合碳单位烯的原始混合物,包括定量测量的化合物,以及其他β-Myrc-β-Myrc,例如β-Myrc,以及其他化合物,以及其他化合物。 E-β-乙烯,Z-β-乙二烯和两个2,4,6-二十二烯-2,6-二甲基异构体。半定量测量结果表明,这组新的单甲烯类也比Pinela,Malvasia Istriana,Chardonnay和Sauvignon Blanc葡萄酒更高。
摘要 马达加斯加长春花(Catharanthus roseus)属于夹竹桃科。这种药用植物原产于马达加斯加,可生产许多重要药物,包括单萜吲哚生物碱 (MIA) 长春新碱和长春花碱,用于世界各地治疗癌症。在这里,我们提供了一个新版本的 C. roseus 基因组序列,该序列是通过结合 Oxford Nanopore Technologies 长读和 Illumina 短读获得的。这个更连续的组装由 173 个支架组成,总长度为 581.128 Mb,N50 为 12.241 Mb。使用公开的 RNAseq 数据,预测并功能注释了 21,061 个蛋白质编码基因。总共 42.87% 的基因组被注释为可转座因子,其中大多数是长末端重复序列。随着对 MIA 产生植物基因组的了解日益增多,这个更新版本应该会简化进化研究,从而更好地了解 MIA 生物合成途径的进化。
结果:我们发现PWEO的主要成分是单萜和倍半萜类化合物。PWEO具有强大的抗真菌活性,而PWEO的MIC对两种皮肤植物的MIC均为3.600 mg/ml。PWEO显着抑制菌丝体的生长,并且随着浓度的增加,抑制作用显着增加。当pWeo浓度达到1.8mg/ml时,菌丝体的生长被完全抑制。显微镜观察表明,PWEO破坏了菌丝的结构。细胞膜通透性测试表明,皮肤植物的细胞膜受到PWEO的破坏。细胞丙二醛(MDA)含量与PWEO的浓度呈正相关,这表明皮肤植物的脂质过氧化是由PWEO引起的。荧光显微镜图像显示,PWEO处理后,ROS的产生过多,MMP破坏了。葡萄球菌的生理实验显示,用0.450 mg/mL PWEO治疗三个小时后,蛋白质渗出,细胞外电导率和细胞内MDA含量的显着差异。通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)鉴定了五个集线器基因,其中长链脂肪酸COA连接酶1(ACSL1)被显着上调表达。减少上调的72(MUG72)和GDP甘露糖转运蛋白基因1(GMT1)在PWEO治疗后显着下调,这影响了葡萄球菌的生长和繁殖。这些结果表明,PWEO可以用作可持续应用的天然抗真菌剂。
单萜因其作为口味,香料,杀虫剂和能量浓厚的燃料而受到重视。微生物生物合成为这些重要分子提供可持续的生物合成途径,但生产水平仍然有限。在这里,我们引入了一种生物传感器驱动的微生物工程策略,以增强单类药物的产生,特别是针对Geraniol。使用Pyr1受体的诱变库(带有可延展结合口袋的植物ABA信号通路的多功能生物传感器),我们筛选了24个单键型,并鉴定出对八种响应于八种的Pyr1变体,包括Geraniol。在耐热酵母kluyveromyces Marxianus中表达了低背景,高度选择性的geraniol敏感的Pyr1变体,作为一种基于生长的生物传感器电路,从而可以快速应变工程。通过将geraniol敏感的Pyr1传感器与全基因组CRISPR-CAS9诱变方法耦合,我们确定了六个基因敲除,可增强香精醇的产生,从而增加了2倍的滴度。这项研究证明了PYR1生物传感器平台可以使快速应变工程和改善所需代谢物滴度的突变体的鉴定。
从生物体产生的抽象二级代谢产物是与生物的生长直接相关的化合物,而是对它们在自然界中的许多重要目的。萜烯和萜类化合物形成由萜烯合酶(TPS)酶产生的二级代谢产物的一部分。真菌物种高度依赖于二级代谢产物,尤其是萜类化合物,用于许多适应性任务,例如防御和共生关系的形成。与植物物种相比,萜烯和萜类化合物在真菌和大量真菌物种中的重要性,但真菌基因组中相应的TPS基因的研究要比植物中的研究要小得多。在这项工作中,作为UCPH大型研究的一部分,研究了未开发的可食用真菌物种的TPS,以促进酶的特征和产品探索。31 TPSs enzymes from fungal genomes of shiitake mushroom Lentinula edodes, oyster mushroom Pleurotus ostreatus , porcini mushroom Boletus edulis , jelly fungus Auricularia subglabra and cheese fungi Penicillium roqueforti , Penicillium biforme , and Penicillium camemberti were expressed.使用尿嘧啶特异性切除试剂(用户)克隆技术在酵母中通过多拷贝质粒引入基因,将质粒与诱导型GAL1启动子一起构建质粒。使用气相色谱质谱法(GC-MS),用顶空固相微挖掘(HS-SPME)在体内分析产物。从结果可以得出的结论是,三个TPS主要产生单萜,九个TPSS,主要是倍半萜烯和一个TPS主要是二萜。检测到一个没有提供名称的假定倍半萜,以及在真菌物种中找不到的曲线素烯和sinularene和myltayl-4(12)烯。单二烯合酶(Mono-TPSS)属于大多数的Ascomycota Phylum和倍半甲氧苄酯合酶(sesqui-TPSS),而大多数人都属于BASIDIOMYCOTA PHYLUM。TPS基因的催化活性被追溯到系统发育树,尤其是在一个簇中产生单萜的TPSS,在另一个群集中产生sesquiterpenes,在另一个群集中产生倍苯二甲酸酯。另外的实验ERG20P(N127W)的表达是一种被描述为在酵母细胞中累积GPP的基因,导致倍半萜烯的意外增加。此外,将三分之一的转化体诱导到缓冲培养基(pH 6.5)中,以分析pH和酶活性之间的相关性。缓冲诱导导致除三个仍未显示未萜烯峰的经过测试的非活性转化体外,所有倍半萜的产生。
白血病 (ALL) 5 。长春花碱用于治疗乳腺癌、睾丸癌和神经母细胞瘤 6 。长春地辛是一种从长春花碱中提取的生物碱,已显示出对抗霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤、肺癌和乳腺癌的活性 7 。长春瑞滨用于治疗已发展到周围组织或身体其他部位的非小细胞肺癌 (NSCLC) 8 。根据最近的一项研究,长春胺是少数对活细胞有积极作用的生物碱之一。通过增加血流量和区域葡萄糖的吸收,它可以作为脑代谢增强剂,对缺血和缺氧具有神经保护作用,并具有抗氧化和抗凋亡特性。长春胺被认为是治疗镰状细胞病的潜在成分,因为它似乎可以作为活细胞中的氧载体 9 。长春胺是一种单萜吲哚生物碱(图1),主要存在于长春花叶中10。在本研究中,根据国际协调会ICH Q2(R1)指南11的建议,建立了高效薄层色谱法(HPTLC)对长春花叶甲醇提取物中的长春胺进行定量分析。
摘要:农产品副产品和微藻是具有神经保护特性的低成本、高价值的生物活性化合物来源。然而,治疗分子的神经保护效果可能受到其穿过血脑屏障 (BBB) 到达大脑的能力的限制。在本研究中,对已证明具有体外神经保护潜力的刺槐 (ASFE)、Cyphomandra betacea (T33)、小粒咖啡 (PPC1)、油橄榄 (OL-SS)、柑橘 (PLE100) 副产品和微藻 Dunaliella salina (DS) 的各种绿色提取物进行了基于永生化人脑微血管内皮细胞 (HBMEC) 模型的体外 BBB 通透性和运输测定。进行了毒性和 BBB 完整性测试,并在孵育 2 和 4 小时后使用气相色谱和液相色谱结合四极杆飞行时间质谱 (GC/LC-Q-TOF-MS) 评估了目标生物活性分子穿过 BBB 的运输情况。HBMEC-BBB 运输试验显示,代表性神经保护化合物(如单萜和倍半萜、植物甾醇和一些酚类化合物)具有高渗透性。从拟议的体外 BBB 细胞模型中获得的结果进一步证明了目标天然提取物的神经保护潜力,这些提取物是功能性成分的有希望的来源,可以转化为具有科学支持的神经保护声明的食品补充剂、食品添加剂或营养保健品。
葡萄酒微生物群落建立了复杂的生态系统,调节香气化合物的形成,但只有少数研究寻求特定微生物与葡萄酒挥发性物质之间的相关性。本研究结合了代谢条形码和代谢组学,以识别与杜罗河标志性地区 3 个著名品种的葡萄酒挥发性特征相关的真菌和细菌微生物生态位。在整个自然发酵过程中,鉴定了三个主要的微生物生态位,并且 Hanseniaspora - Saccharomyces 的演替时间取决于品种。最大的生态位包括 Hansenias pora、Aureobasidium、Alternaria、Rhodotorula、Sporobolomyces、Massilia、Bacillus、Staphylococcus 和 Cutibacterium,它们与 7 种代谢物呈正相关,即乙偶姻、乙酸异戊酯、丙酸乙酯、c-3-己烯醇、苯乙醚和 4-乙基苯酚。发酵酵母S. cerevisiae、Torulaspora delbrueckii和Meyerozyma caribbica与γ-丁内酯、t-威士忌内酯、异戊醇、癸酸乙酯、异丁酸乙酯、琥珀酸二乙酯、异戊酸、4-乙基愈创木酚和4-丙基愈创木酚呈强相关性。 Lachancea quebecensis 与几种致病真菌(青霉菌、白粉病菌、核盘菌、曲霉菌、Mycosphaerella tassiana)和细菌(假单胞菌属、酸拟杆菌、泛菌、Steno trophomonas 和 Enhydrobacter)聚类,与各种单萜醇和降异戊二烯类化合物(包括芳樟醇和 β-紫罗兰酮)呈正相关,此外还与苯甲醇、二乙酰、乙酸异丁酯、乙基香草酸酯和甲基香草酸酯呈正相关。代谢物-微生物群相关性表明品种特异性可能是区域芳香特征的基础。