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从生物体产生的抽象二级代谢产物是与生物的生长直接相关的化合物,而是对它们在自然界中的许多重要目的。萜烯和萜类化合物形成由萜烯合酶(TPS)酶产生的二级代谢产物的一部分。真菌物种高度依赖于二级代谢产物,尤其是萜类化合物,用于许多适应性任务,例如防御和共生关系的形成。与植物物种相比,萜烯和萜类化合物在真菌和大量真菌物种中的重要性,但真菌基因组中相应的TPS基因的研究要比植物中的研究要小得多。在这项工作中,作为UCPH大型研究的一部分,研究了未开发的可食用真菌物种的TPS,以促进酶的特征和产品探索。31 TPSs enzymes from fungal genomes of shiitake mushroom Lentinula edodes, oyster mushroom Pleurotus ostreatus , porcini mushroom Boletus edulis , jelly fungus Auricularia subglabra and cheese fungi Penicillium roqueforti , Penicillium biforme , and Penicillium camemberti were expressed.使用尿嘧啶特异性切除试剂(用户)克隆技术在酵母中通过多拷贝质粒引入基因,将质粒与诱导型GAL1启动子一起构建质粒。使用气相色谱质谱法(GC-MS),用顶空固相微挖掘(HS-SPME)在体内分析产物。从结果可以得出的结论是,三个TPS主要产生单萜,九个TPSS,主要是倍半萜烯和一个TPS主要是二萜。检测到一个没有提供名称的假定倍半萜,以及在真菌物种中找不到的曲线素烯和sinularene和myltayl-4(12)烯。单二烯合酶(Mono-TPSS)属于大多数的Ascomycota Phylum和倍半甲氧苄酯合酶(sesqui-TPSS),而大多数人都属于BASIDIOMYCOTA PHYLUM。TPS基因的催化活性被追溯到系统发育树,尤其是在一个簇中产生单萜的TPSS,在另一个群集中产生sesquiterpenes,在另一个群集中产生倍苯二甲酸酯。另外的实验ERG20P(N127W)的表达是一种被描述为在酵母细胞中累积GPP的基因,导致倍半萜烯的意外增加。此外,将三分之一的转化体诱导到缓冲培养基(pH 6.5)中,以分析pH和酶活性之间的相关性。缓冲诱导导致除三个仍未显示未萜烯峰的经过测试的非活性转化体外,所有倍半萜的产生。

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