悬浮培养物对光照作出反应并开始分化,我们确定了光照后接种农杆菌的最佳时间。为此,将 O. dubium 细胞培养物在接种农杆菌前 0、5、10、15 和 20 天转移到光照下(图 3b)。接种农杆菌后,培养物在选择培养基中再生长十周。值得注意的是,虽然暗生长培养物的转化产生了两个转化子,但接种前 5、10、15 和 20 天暴露在光照下的培养物分别产生了 15、6、19 和 14 个卡那霉素抗性芽,其中 4、6、6 和 5 个芽(共 21 个芽)从第 21 天开始显示出弱的 RFP 荧光(图 4a、b、c)。经过挑选,绿色健康
GenoScreen 拥有基于新一代测序 (NGS) 的试剂盒,可同时识别分枝杆菌种类、进行基因分型并预测结核分枝杆菌复合群 (MTBC) 菌株的耐药性;该试剂盒 (Deeplex® Myc-TB) 可直接用于临床样本 (1) 。该检测依赖于单个 24 重扩增子混合物的深度测序,针对与一线和二线抗结核药物(利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氟喹诺酮类、阿米卡星、卡那霉素、卷曲霉素、链霉素、乙硫异烟胺、贝达喹啉、氯法齐明和利奈唑胺)耐药性相关的 18 个主要 MTBC 基因区域。 hsp65 基因是分枝杆菌种属识别的靶标,而 spoligotyping 靶标(CRISPR/直接重复 [DR] 基因座)和耐药相关靶标中的系统发育单核苷酸多态性 (SNP) 用于 MTBC 菌株基因分型。
*在健康鸡群的受精鸡蛋中繁殖,以 MF59C.1 为佐剂 **血凝素佐剂 MF59C.1 每 0.5 毫升剂量含:角鲨烯(9.75 毫克)、聚山梨醇酯 80(1.175 毫克)、山梨醇三油酸酯(1.175 毫克)、柠檬酸钠(0.66 毫克)和柠檬酸(0.04 毫克)。该疫苗符合世界卫生组织(WHO)对北半球的建议和欧盟对2024/2025季节的决定。 Fluad Tetra 可能含有卵清蛋白或鸡蛋清等鸡蛋残留物,以及制造过程中使用的卡那霉素和硫酸新霉素、甲醛、氢化可的松和十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)(见第 4.3 节)。有关辅料的完整列表,请参阅第 6.1 节。 3. 药物形式 预充注射器中的注射用混悬液(注射剂)。乳白色悬浮液。
在花生中,使用子叶节外植体在 cv. ICGV 15083 中进行农杆菌介导的转化。总共 250 个外植体与 CRISPR/Cas9 构建体共培养,结果 80 个外植体在芽起始培养基下 30-40 天内产生多个芽。分离产生多个芽的外植体,并在芽伸长培养基中每 10-15 天进行一次卡那霉素选择(125 mg/L)继代培养。总共 70 个芽用 Cas9 和 NptII 基因特异性引物进行测试。其中,50 个(约 70%)对 Cas9 和 NptII 基因均呈阳性(图 3)。在这个组中,25 个芽(约 25%)表现出不同程度的白化表型(图 4,表 2)。白化芽在再生后三个月内无法存活。一些
杭州盛廷医疗科技有限公司拥有一款基于靶向二代测序(NGS)的试剂盒,用于同时识别分枝杆菌种类并预测结核分枝杆菌复合群(MTBC)菌株的耐药性。该试剂盒 TBseq® 可直接应用于痰液、支气管肺泡灌洗液、胸腔积液或分枝杆菌阳性培养物等临床标本。它依赖于引物多重扩增混合物的深度测序,针对与一线和二线抗结核(抗 TB)药物(利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氟喹诺酮类、阿米卡星、卡那霉素、卷曲霉素、链霉素、对氨基水杨酸、环丝氨酸、乙硫异烟胺/丙硫异烟胺、贝达喹啉、氯法齐明和利奈唑胺)耐药相关的 21 种主要 MTBC 基因。分枝杆菌种属鉴定是通过针对 16S 和 hsp65 基因区域进行的。
几种抑制 70S 核糖体蛋白质合成的抗生素,包括克林霉素、吡利霉素、4'-戊基-N-去甲基克林霉素、四种四环素、氯霉素、甲砜霉素和红霉素,在培养中对恶性疟原虫具有抗疟作用,这种作用受药物暴露时间和氧张力的影响很大。在 96 小时的孵育中,效力在前 48 小时内增加高达 106 倍,在 15% 02 与 1% 02 中增加高达 104 倍。两种氨基糖苷类药物,卡那霉素和妥布霉素,没有抗疟活性。抑制核酸合成的利福平和萘啶酸与 70S 抑制剂不同。线粒体抑制剂 Janus Green、罗丹明 123、抗霉素 Al 和 8-甲基氨基-8-去甲基核黄素的活性受暴露时间和氧张力的影响。含喹啉的抗疟药、离子载体和其他抗疟药受暴露时间的影响较小,但不受氧张力的影响。这些数据可以用以下假设来最好地解释:抗疟 70S 核糖体特异性蛋白质合成抑制剂通过作用于线粒体对寄生虫产生毒性。
图 1 JoinTRV 的设计,这是一种基于具有兼容来源的微型 T-DNA 载体的 TRV 表达系统。(A) 烟草脆裂病毒 (TRV) 的基因组组织。(B) TRV RNA2 工程用于序列克隆和表达。pLX-TRV2 的克隆盒图与 Bsa I 识别位点和 Bsa I 产生的突出端一起显示(底部)。LacZ 报告基因允许可视化选择重组载体;插入物的植物表达由豌豆早褐病毒 (PEBV) 外壳蛋白 (CP) 启动子驱动。(C) VIGS (pTRV2) 和 VIGE (pRNA2.PEBV) 中描述的 pLX-TRV2 和 TRV RNA2 载体的尺寸比较。(D) JoinTRV 系统图。两个 T-DNA 载体被多路复用到单个农杆菌细胞中,以同时递送 TRV 基因组成分。 pLX-TRV2 是 pLX-B2 衍生物,具有 pBBR1 来源和卡那霉素抗性基因 (npt I),pLX-TRV1 是 pLX-Z4 衍生物,具有 RK2 来源和庆大霉素抗性基因 (aac C1);由于这两个 T-DNA 载体具有兼容的来源和独立的抗生素选择机制,因此可以同时寄宿在同一细菌细胞中
摘要 植物原生质体是利用基因编辑对所需性状进行遗传操作的可靠实验系统。尽管如此,突变原生质体的选择和再生仍具有挑战性,而随后恢复成功编辑的植物是先进植物育种技术的一个重要瓶颈。为了缓解与原生质体转基因表达和原生质体再生相关的障碍,开发了一种新方法。结果表明,线性化 DNA 可以有效转染马铃薯原生质体,而来自各种植物的 UBIQUITIN10 启动子可以有效地指导转基因表达。此外,还对转染原生质体的卡那霉素抑制浓度进行了标准化,新霉素磷酸转移酶 2 ( NPT2 ) 基因可用作富集转染原生质体的有力选择标记。此外,BABYBOOM ( BBM ) 转录因子的瞬时表达促进了原生质体衍生愈伤组织的再生。总之,这些方法显著增加了对表现出高转基因表达的原生质体的筛选,从而显著提高了原生质体衍生愈伤组织中基因编辑事件的发生率,达到 95%。本研究开发的方法促进了四倍体马铃薯植物的基因编辑,并为多倍体生物中的复杂基因操作开辟了道路。
二水合物、柠檬酸一水合物、新霉素、卡那霉素、氢化可的松、鸡蛋蛋白(≤0.4 mcg)、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)、甲醛 Fluarix Octoxynol-10 (TRITON X-100)、α-生育酚琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80 (Tween 80)、氢化可的松、硫酸庆大霉素、卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、磷酸钠缓冲等渗氯化钠 Flublok 氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚山梨醇酯 20 (Tween 20)、杆状病毒和草地贪夜蛾细胞蛋白、杆状病毒和细胞 DNA、Triton X-100 Flucelvax Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞蛋白、磷酸盐缓冲溶液、除 HA 以外的蛋白质、MDCK 细胞DNA、聚山梨醇酯 80、十六烷基三甲基溴化铵和 β-丙内酯、硫柳汞(多剂量瓶装)FluLaval 卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、α-生育酚氢琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80、硫柳汞(多剂量瓶装)、磷酸盐缓冲盐溶液。Fluzone High Dose 和 Fluzone
在病毒悬浮液的数量中,将感染 50% 的细胞培养物。这些脊髓灰质炎病毒悬浮在汉克斯平衡盐溶液中,以一摩尔氯化镁作为稳定剂,以酚红作为 pH 指示剂。OPV 可能含有微量的红霉素和卡那霉素。该疫苗符合世卫组织对口服脊髓灰质炎疫苗的要求。适应症 OPV 适用于对婴儿、易感儿童和成人进行主动免疫,以预防 1、2 和 3 型脊髓灰质炎病毒引起的感染。给药 OPV 只能口服。用滴管将两滴从多剂量小瓶中直接滴入口中。对于年龄较大的儿童,最好先将滴剂滴在糖块或糖浆中,以避免可能出现的苦味。应注意不要让接种者的唾液污染多剂量滴管。如果过量服用,不会导致不良反应。打开后,多剂量瓶应保存在 +2°C 至 +8°C 之间。在免疫期间已取出一剂或多剂疫苗的多剂量 OPV 瓶可在后续免疫期间使用,最长可达 4 周,前提是满足以下所有条件(如 WHO 政策声明中所述:在后续免疫期间使用已打开的多剂量瓶。WHO/V&B/00.09):ƒ 未超过有效期;ƒ 疫苗储存在适当的冷链条件下;ƒ 疫苗瓶隔膜未浸入水中;ƒ 已使用无菌技术取出所有剂量;ƒ 疫苗瓶监测器 (VVM)(如果已连接)未到达丢弃点(见图)。