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鼠标合子微注射 - net
本文档中提供的方法是由IDT客户提供的，他们在实验中使用了Alt-R CRISPR-CAS9系统。本文档可以作为在类似模型生物中使用Alt-R CRISPR-CAS9系统的起点，但可能无法针对您的基因或应用进行完全优化。idt不保证方法或任何此类方法的任何性能。IDT应用程序专家只能提供有关本文档中概述的方法的一般技术支持和故障排除支持。
8C 样细胞在体外捕获人类合子基因组激活程序
胚胎基因组的激活标志着发育生物体中第一次主要的转录浪潮。小鼠 2 细胞胚胎和人类 8 细胞胚胎中的合子基因组激活 (ZGA) 对发育至关重要。本文，我们报告在幼稚胚胎干细胞中发现了人类 8 细胞样细胞 (8CLC)，其转录类似于人类 8 细胞胚胎。它们表达 ZGA 标记，包括 ZSCAN4 和 LEUTX ，以及转座因子，例如 HERVL 和 MLT2A1 。8CLC 显示降低的 SOX2 水平，可在体外使用 TPRX1 和 H3.Y 标记蛋白进行识别。转录因子 DUX4 的过表达和剪接体抑制会增加人类 ZGA 样转录。令人兴奋的是，8CLC 标记物 TPRX1 和 H3.Y 也在 ZGA 阶段的 8 细胞人类胚胎中表达，因此可能与体内相关。 8CLCs 为表征人类 ZGA 样转录提供了独特的机会，并可能为人类胚胎发生早期事件提供重要见解。
绿色植物中 KNOX/BELL 转录因子激活配子指导合子的深层进化起源
摘要 KNOX 和 BELL 转录因子调控植物二倍体发育的不同步骤。在绿藻莱茵衣藻中，KNOX 和 BELL 蛋白由相反交配类型的配子遗传，并在合子中异二聚化以激活二倍体发育。相反，在小立碗藓和拟南芥等陆生植物中，KNOX 和 BELL 蛋白在二倍体发育后期的孢子体和孢子形成、分生组织维持和器官发生中发挥作用。然而，目前尚不清楚 KNOX 和 BELL 的对比功能是否是在藻类和陆生植物中独立获得的。本文表明，在基础陆生植物物种多形地钱中，配子表达的 KNOX 和 BELL 是启动合子发育所必需的，它通过促进核融合来启动，其方式与莱茵衣藻中的方式惊人地相似。我们的结果表明，合子激活是 KNOX/BELL 转录因子的祖先作用，随着陆生植物的进化，其转向分生组织维持。
淀粉样蛋白-β阳性在认知无损的klotho kl-vs杂合子中较少普遍抑制ALKB核酸脱甲基酶-UCL发现抑制ALKB核酸脱甲基酶-UCL发现
摘要：核酸脱甲基酶的ALKB家族目前具有强烈的化学，生物学和医学兴趣，因为它们在几个关键的细胞过程中具有关键作用，包括表观遗传基因调节，RNA代谢和DNA修复。新兴证据表明，ALKB脱甲基酶的失调可能是几种人类疾病的发病机理，尤其是肥胖，糖尿病和癌症。因此，对这些酶开发选择性抑制剂的浓厚兴趣是促进其机械和功能研究并验证其治疗潜力的兴趣。在这里，我们回顾了过去二十年来ALKB脱甲基酶抑制研究所取得的显着进步。我们讨论了报告的抑制剂的合理设计，它们的结合方式，选择性，细胞活性和治疗机会。我们进一步讨论了ALKB亚家族的未开发的结构元素，并提出了潜在的策略以实现亚家族选择性。希望这种观点能够激发新型抑制剂设计并推进该领域的药物发现研究。
VWA2中纯合子和复合杂合的错义突变对阿尔茨海默氏病的贡献
阿尔茨海默氏病是对家族和零星患者的早期（65岁）和晚期（> 65岁）的神经退行性痴呆症的诊断。3种常染色体显性阿尔茨海默氏症基因中的因果突变，即淀粉样蛋白前体蛋白（APP），Presenilin 1（PSEN1）和Presenilin 2（PSEN2），仅解释了5％E 10％E 10％的早期患者，使大多数患者遗传均未解决。为了发现潜在的遗传学缺失，我们使用了17例早期发病患者的全基因组测序数据，该数据有据可查的阿尔茨海默氏病临床诊断。在发现组中，平均发作年龄为55.71 6.83岁（范围37 E 65）。六名患者患有脑尸检和神经疾病，确认了阿尔茨海默氏病。对一名患者识别的遗传数据的分析是von willebrand因子A含有2个基因的域（VWA2）的同伴P.V366M的错义突变（VWA2）。在阿尔茨海默氏病患者队列中对VWA2编码区域的重新判处来自Flanders-Belgium（N¼1148），包括152例早期和996例晚期患者，确定了1个早期和3例晚期患者的额外纯合和复合杂合的杂合杂质性突变。等位基因共享分析在复合杂合VWA2突变载体之间识别出常见的单倍型，这表明共享祖先。总体而言，我们鉴定了5个纯合或复合杂合的错义突变（5/1165; 0.43％）的患者载体，早期（2/169; 1.18％）和3例患者在晚期发作（3/996; 0.30％）患者。2020 Elsevier Inc.保留所有权利。患者中纯合和复合杂合的错义突变的频率高于根据其组合单位等位基因计算得出的频率的预期。纯合/复合杂合的错义突变携带者都没有常染色体显性阿尔茨海默氏病的家族史。我们的发现表明，VWA2中的纯合和复合杂合的错义突变可能有助于偶发患者患阿尔茨海默氏病的风险。
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