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芽再生的优化及农杆菌...
摘要：高效的植物转化和组织培养方法对于植物的遗传工程和先进的分子育种至关重要，但在栽培的八倍体草莓 (Fragaria × ananassa) 中，这两种方法都尚未得到很好的建立。在本研究中，针对两个基因不同的草莓品种 Sweet Sensation VR Florida 127 (FL127) 和 Florida Brilliance (FB) 建立并优化了一种芽再生方法。从温室生长的植物中获得的尖端、节点和叶柄的匍匐茎段被用作外植体，用于比较芽再生率。'FL127' 在优化条件下显示出最高的芽再生频率，而'FB' 在相同培养基类型中对较低浓度的 N6-苄基腺苷 (BA) (0.01 mg/L) 的反应最佳。 'FL127' 和 'FB' 中体细胞胚从匍匐茎尖 (RT) 向芽再生的平均转化频率分别为 42.8% 和 56.9%。利用这些优化的组织培养条件，进行农杆菌介导的 CRISPR/Cas9 基因编辑，以检查品种 FL127 中八氢番茄红素去饱和酶 FaPDS 的转化和靶基因编辑效率。总共 234 个外植体接种了含有 Cas9-FaPDS 的农杆菌，导致愈伤组织诱导效率为 80.3%，其中 13.3% 的再生植物表现出部分或完全的白化表型。编辑子代的扩增子测序表明，所有 FaPDS 同源拷贝的向导 RNA (gRNA) 靶位点或侧翼区域均发生了突变（替换、插入和缺失）。我们的研究结果为草莓功能基因组学研究和基因编辑指导的品种改良提供了有效的组织培养和转化方法。
口服急性毒性研究和奇妙的Kola（Buccholzia coriacea r.w buchholz）对Wistar Albino植入的甲醇种子提取物
摘要背景：属于卡帕里达科家族的Buccholzia Coriacea（奇妙的Kola）是一种常绿灌木，在喀麦隆，中非共和国，加蓬，安哥拉，安哥拉，尼日利亚和加纳等地理位置分布在地理上。它用于用于处理各种疾病和各种目的的传统医学。进行了这项研究以确定LD50，植物化学成分，并评估Buchholzia coriacea的甲醇种子提取物对雌性Wistar Albino大鼠植入的影响。方法论：根据标准方法进行植物化学筛选，以检测Buchholzia Coriace甲醇种子提取物中存在的植物化学物质。总共使用了36名成年雌性Wistar白化大鼠进行这项研究。十二只大鼠用于急性毒性研究，而对于植入研究，将24只成熟的雌性大鼠分为四组（对照，低剂量和高剂量组）。组I被指定为对照，其他三个组被指定为测试组。将Buccholzia coriacea的250（250），500和1000 mg/kg的甲醇种子提取物施用到测试组中10天，然后去除子宫并计算植入位点。结果：植物化学筛查显示了生物碱，类黄酮，单宁，碳水化合物和皂苷的存在。急性毒性研究表明，布希亚氏菌具有LD50> 5000 mg/kg。给予哥伦比亚菌的甲醇种子提取物的甲醇种子提取物并未显着（P 0.05）改变了与对照组相比，在术组中改变了植入部位的数量。结论：结果表明，给予Buchholzia coriacea的甲醇种子提取物对植入没有显着影响。
橄榄叶提取物对学习和记忆的影响...
目的：利用 Morris 水迷宫 (MWM) 测试研究橄榄叶提取物 (OLE) 对链脲佐菌素 (STZ) 诱发的糖尿病大鼠学习和记忆能力的影响。方法：将 32 只雄性 Wistar 白化大鼠随机分为四组：对照组 (第 1 组)、STZ 诱发的糖尿病组 (第 2 组)、STZ + OLE (第 3 组)、OLE + STZ (第 4 组)。治疗组 (第 3、4 组) 口服 0.5 g/kg OLE，持续六周。进行 MWM 测试以评估找到平台的潜伏期、游泳总距离和平均速度。检查海马组织以测量酶活性（丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）。在研究前和手术前记录血糖水平。结果：对照组和治疗组到达平台的潜伏期较短，对照组和OLE+STZ组的减少最为显著。在第5天，OLE+STZ组游泳距离最短。随着时间的推移，第2组和治疗组的游泳距离显著减少。各组之间平均速度差异仅在第1天显着。第2组的MDA水平高于对照组，但治疗组的MLA降低，尤其是OLE+STZ组。与第2组相比，所有组的CAT水平均升高。与第2组相比，对照组和OLE+STZ组的GPx和SOD水平升高。OLE+STZ组的GPx和SOD水平高于STZ+OLE组。与第 2 组相比，对照组和治疗组的血糖水平下降，其中 OLE + STZ 组的下降幅度最大。讨论：OLE 降低了糖尿病大鼠的氧化应激并改善了学习和记忆能力，在 STZ 给药前接受 OLE 的组效果更明显。
利用 CRISPR 敲除八氢番茄红素去饱和酶基因
在新型植物育种技术 (NPBT) 中，CRISPR/Cas9 系统是用于靶基因编辑的有用工具，可快速改良植物的性状。该技术允许同时靶向一个或多个序列，以及通过同源定向重组引入新的遗传变异。然而，CRISPR/Cas9 技术对于某些多倍体木本植物来说仍然是一个挑战，因为必须同时靶向需要突变的所有不同等位基因。在这项工作中，我们描述了改进的方案，使用农杆菌介导的转化将 CRISPR/Cas9 系统应用于高丛蓝莓 (Vaccinium corymbosum L.)。作为概念验证，我们靶向编码八氢番茄红素去饱和酶的基因，该基因的突变会破坏叶绿素的生物合成，从而可以直观评估敲除效率。离体培养的蓝莓 cv. 的叶片外植体。 Berkeley 已用 CRISPR/Cas9 构建体进行转化，该构建体包含两个针对 pds 两个保守基因区域的向导 RNA（gRNA1 和 gRNA2），随后在富含卡那霉素的选择培养基中维持。在选择培养基中培养 4 周后，分离出卡那霉素抗性株系，并通过 Sanger 测序对这些株系进行基因分型，结果显示基因编辑成功。一些突变株系包括白化表型，即使两种 gRNA 的编辑效率都很低，gRNA1 的编辑效率在 2.1% 到 9.6% 之间，gRNA2 的编辑效率在 3.0% 到 23.8% 之间。这里我们展示了一种非常有效的高丛蓝莓商业品种“伯克利”的不定芽再生协议，以及在 Vaccinium corymbosum L. 中使用 CRISPR/Cas9 系统的进一步改进，为通过生物技术方法介导的育种开辟了道路。
干旱环境杂志 - 保护区
由于自然资源过度利用，砍伐和燃烧农业和木炭生产，森林砍伐在过去的几十年中在马达加斯加的西南部加速了。为了提供可持续森林管理的信息，我们评估了经常用于木炭生产的木本物种的生物量可用性。进行了半结构化家庭访谈（N¼63），以收集有关木炭生产活动的信息，并确定用于此活动的物种。将簇抽样方法应用于库存木质物种，并测量DBH，总高度和冠直径。木材生物量和木材体积估计的异形方程是针对甲呈acacia bellula（n¼20），阿拉科菌（n¼18），白化菌（N¼17），cedrelopsis spp的。（n¼13）和混合物种（n¼43）。完全发现68种用于木炭生产。观察到DBH，总高度和木材生物量之间的高相关性（R 2在0.78和0.99之间变化）。 木材生物量随着定居点的距离而增加，并且在干燥森林中最高价值的土地覆盖类型之间有显着差异。 总体而言，村庄附近的树木生物量低于国家公园内部和其他半干旱地区的生物量，这主要是由于人为的活动，例如木炭生产。 ©2017 Elsevier Ltd.保留所有权利。观察到DBH，总高度和木材生物量之间的高相关性（R 2在0.78和0.99之间变化）。木材生物量随着定居点的距离而增加，并且在干燥森林中最高价值的土地覆盖类型之间有显着差异。总体而言，村庄附近的树木生物量低于国家公园内部和其他半干旱地区的生物量，这主要是由于人为的活动，例如木炭生产。©2017 Elsevier Ltd.保留所有权利。
在线可访问 http://www.tjpr.org http://dx.doi.org/10.4314/tjpr.v24i1.12 原创研究文章 陆地的分离和特性
目的：确定从尼日利亚科吉州阿尼格巴采集的土壤样本中分离的链霉菌属次级代谢物的抗菌、抗溃疡和细胞毒活性。方法：使用盐水虾致死率测定法对不同浓度（62.5、125、250、500、1000 mg/mL）的次级代谢物或参考 K 2 Cr 2 O 7 进行链霉菌次级代谢物的细胞毒活性（浓度范围：62.5 – 1000 mg/mL）。使用白化大鼠溃疡的阿司匹林和乙醇模型评估抗溃疡活性。五组动物，即三组预处理组，其提取物口服浓度为 100 和 200 mg/kg，一组预处理组以奥美拉唑 (30 mg/kg) 作为标准，另一组口服 2 mL/kg 生理盐水 (对照)。使用微量稀释法研究抗菌和抗真菌活性。结果：细胞毒性试验表明，与对照组相比，提取物浓度为 12.5 至 62.5 mg/mL 的毒性较小。对于抗溃疡活性，第 1 组动物表现出白细胞粘膜浸润、上皮细胞大量脱落和细胞出血，而第 2 组有轻度组织糜烂和小溃疡。在 3 至 5 组中，与 100 mg/kg 相比，200 mg/kg 提取物表现出出色的细胞保护作用和熟练的治疗能力，没有明显的副作用，而标准组表现出一些副作用，粘液细胞明显减少（p < 0.05）。次级代谢产物抑制了与溃疡有关的生物（幽门螺杆菌、大肠杆菌、弯曲杆菌属和链球菌属），发挥了治疗作用并保护大鼠免受溃疡。结论：从链霉菌属中分离的次级代谢产物对上皮组织无毒，具有抗菌和抗溃疡活性，因此具有作为抗消化性溃疡药物重要来源的潜力。关键词：抗溃疡、次级代谢产物、细胞毒活性、链霉菌属
海葵：珊瑚共生研究的模型系统
热带珊瑚礁是世界上最多样化和最具生产力的生态系统之一，支持着一系列生态系统产品和服务，为数百万人的福祉做出贡献。然而，由于当地和全球的人为影响，全球珊瑚礁覆盖率正在下降（ Wilkinson，1999 ）。特别是，全球气候变化导致的大规模白化事件的频率和严重程度预计在未来会进一步增加，并威胁到珊瑚礁的长期生存（ Hughes 等人，2017 ）。这种海洋生态系统的营养和结构基础依赖于石珊瑚和它们相关的微生物共生体（光合甲藻、细菌、古菌等）之间的互利关系，形成一种称为珊瑚全生物的元生物（ Ste ́ venne 等人，2021 ）。尽管人们对珊瑚全生物功能的分子基础有了越来越多的了解，但我们的知识仍然存在重大空白。如果我们要充分了解珊瑚宿主与其微生物共生体之间建立和维持相互作用的潜在基本过程，以及珊瑚是否或如何适应环境干扰并生存下来，就必须揭示珊瑚宿主与其微生物共生体之间相互作用的建立和维持的潜在基本过程。模型生物的使用有着成功的记录，并在分子、细胞和发育生物学方面取得了重大进展（ Jacobovitz 等人，2023 年）。模型生物 Aiptasia，即 Exaiptasia diaphana，是一种小型海葵，遍布亚热带和热带海洋水域，细胞内寄生着共生的甲藻（科：Symbiodiniaceae）（ LaJeunesse 等人，2018 年）。与珊瑚不同，海葵没有碳酸钙骨架，可以在实验室条件下轻松操作和培养，并且可以在兼性共生状态下生存，这允许在非共生对照动物上进行实验（Matthews 等人，2016 年）。自 2008 年正式提出将其作为研究刺胞动物共生的模型系统以来（Weis 等人，2008 年）。越来越多的实验室采用海葵来探索以下研究问题：发育和
在Witloof（cichorium intybusvar。Floiosum）中建立CRISPR/CAS9基因组编辑
cichorium intybus var。叶子（witloof）是一种经济上重要的作物，由于许多专门的代谢产物，例如多酚和萜类化合物，其营养价值很高。然而，Witloof植物富含倍半萜烯内酯（SL），这对于植物防御很重要，但也具有苦味的味道，从而限制了工业应用。SL生物合成途径中的特定基因灭活可能会导致SL代谢物含量的变化，并导致苦味改变。在这项研究中，从witloof实施了CRISPR/CAS9基因组编辑工作流量，从聚乙烯乙二醇（PEG）介导的原生质体转染开始，用于CRISPR/CAS9载体递送，然后进行全植物再生和突变分析。原生质体转染效率范围为20％至26％。将靶向植物去饱和酶（CIPDS）基因的第一个外显子的CRISPR/CAS9载体转染到witloof protoplasts中，并导致了CIPDS敲除，从而在23％的再生植物中引起了白化表型。进一步实施我们的方案，SL生物合成途径基因生物氨基烯A合酶（GES），生殖A氧化酶（GAO）和Costunolide合酶（COS）在独立实验中靶向。在基因组靶点基因座的高度多重（Hiplex）扩增子测序中揭示了用CIRSPR/CAS9载体靶向CIGA，CIGAO和CICOS转染的再生植物中的植物突变频率为27.3、42.7和98.3％。这些结果证明了基于转染和witloof protoplasts的再生和随后的Hiplex扩增子测序的基因组编辑的直接工作流。我们观察到整个基因座的不同突变光谱，范围从独立的突变线跨CICOS中的相同 + 1个核苷酸插入到跨独立突变线的CIGAO中的20种突变类型的复杂集。我们的CRISPR/CAS9工作流可以使基因功能研究和更快地纳入精英Witloof系列中，从而促进了Witloof的新型工业应用的发展。
研究文章的多组分和光谱 - 效应相关性的定量分析shaoyao-gancao汤的反痉挛活性
Shaoyao-Gancao汤（SGD）是一种著名的经典中药（TCM），具有反杂质，抗fammatoration和镇痛作用。制备已被广泛用于治疗诊所中的痉挛疾病。迄今为止，SGD的材料基础尚不清楚，并且尚未报道其反痉挛活性的光谱缺失相关性。在这项研究中，使用高性能液相色谱法（HPLC）来建立FNGERPRINT并确定SGD的多个成分。te峰。同时，使用热图和盒子尺寸分析对多个组件进行了量化和分析。热热，通过体外平滑肌收缩测定法提取了反痉挛效应的数据。灰色关系分析与部分最小平方回归相结合，用于研究SGD的频谱不良相关性。最后，使用分离的组织实验验证了潜在的杂溶成分。te hplc fngerprint，并确定了20个共同的峰。15批SGD的相似性均高于0.965。te HPLC方法是准确且可靠的。白ave蛋白，Paeoniforin，Liquiritin和glycyrrhizic Acid的含量高于SGD中的其他成分。te Spectrum - Fect相关结果表明X 4，X 11和X 16与胞溶活性高度相关。01）。te Heatmap和盒子大小还表明X 3（白化蛋白），X 4（Paeoniforin），X 5（Liquiritin），X 11（LiquiriTigenin）和X 16（Glycyrrhizic Acid）可以用作进一步建立质量标准的质量指标。验证测试表明，paeoniforin（11.7-29.25μg/ml）和液脂蛋白（17.19-28.65μg/ml）可以显着减少最大收缩性（p <0。TESE化合物对乙酰胆碱（ACH）诱发的收缩的抑制反应施加了浓度依赖性的痉挛性效应。tus，sgd具有signifcant的反质源，这是由其多个成分的协同活性产生的。TESE FNDING可用于SGD的药效学研究，并且在确定质量标记和质量控制方面具有很大的意义。
Clitoria ternatea提取的壳聚糖纳米颗粒改善糖尿病和氧化应激
2型糖尿病（T2DM）是扩大的全球健康问题之一，是最常见的代谢性疾病，其特征是高血糖，这显着有助于产生活性氧（ROS）。文献中已经提到了400多种具有降血糖活性的植物。Clitoria ternatea（C。ternatea）通常称为蝴蝶豌豆或亚洲鸽子，是Fabaceae家族的植物种类成员。这项研究的主要目的是评估链霉菌素（STZ）产生的正常和糖尿病2中的甲状腺梭菌（CT-MX）和/或壳聚糖负载的纳米颗粒（CHNPS）抗透明血糖和抗氧化作用的甲醇提取物。总共将20个雄性白化大鼠分为4组，对照非糖尿病（NC），STZ/糖尿病控制，STZ/糖尿病 + CT -MX和STZ/糖尿病 + CT -CHNPS组。28天后，评估了评估评估胰岛素水平，空腹血糖（FBG），天冬氨酸转氨酸酶（AST），丙氨酸转氨酶（ALT），超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽（GSH），脂质过氧化物过氧化物和mRNA基因的表达。对胰腺组织进行了组织病理学和免疫组织化学研究。在STZ/糖尿病（GP2）大鼠中，FBG，AST，ALT以及CDKN1A和TP53基因表达的水平显着增加。此外，高血糖诱导的肝氧化态可以通过SOD和GSH水平的脂质过氧化和恶化的显着增加来证明。纳米载体剂在抗氧化后显示出极好的抗血糖和作用，使其成为糖尿病患者的有前途的技术。相反，STZ/糖尿病 + CT -MX和STZ/糖尿病 + CT -CHNP都显示出与糖尿病相关并发症的明显改善。但是，STZ/糖尿病 + CT -CHNP（GP4）大鼠显着抑制了产生的氧化应激和改善的抗氧化活性，肝功能和胰岛素分泌。此外，与GP2相比，它们的胰腺截面具有正常分布和β细胞数量的正常再生胰腺内分泌胰岛，与GP2相比，具有正常分布和β细胞的数量，并抑制炎症和凋亡基因表达的建筑。