CRISPR/Cas9 因其简单性、设计灵活性和高效率而成为基因组工程的最重要工具。该技术可以同时在一个或多个目标序列中诱导点突变,也可以通过同源定向重组引入新的遗传变异。然而,这种方法在森林物种中仍未得到广泛探索。在本研究中,我们报告了栗属中 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑的第一个例子。作为概念验证,我们以编码八氢番茄红素去饱和酶 (pds) 的基因为目标,该基因的突变会破坏叶绿素的生物合成,从而可以直观评估敲除效率。将欧洲栗 (Castanea sativa) 的球形和早期鱼雷阶段体细胞胚与针对 pds 两个保守基因区域的 CRISPR/Cas9 构建体共培养 5 天,然后在含有卡那霉素的选择培养基中培养。在选择培养基上进行 8 周的亚培养后,分离出 4 个卡那霉素抗性胚胎发生系。通过扩增子的目标桑格测序对这些系进行基因分型,表明基因编辑成功。子叶体细胞胚胎在 3% 麦芽糖中成熟,并在 4 ◦ C 下冷藏 2 个月。随后,对胚胎进行发芽过程以产生白化植物。这项研究为将 CRISPR/Cas9 系统用于欧洲栗的生物技术应用开辟了道路
摘要在这项研究中,固相分散提取(SPDE)用于血清预处理以及在同时分析止痛药和辅助镇痛药(总计30种类型)中,通常用作疼痛患者的第一和第二选择治疗,并通过液态色谱/时间播放时间/时间仪表术(LC/TOF-MS)。使用OASIS MCX作为固相凝胶对SPDE的最佳条件的检查表明,提前剥夺的血清样品的回收率为49-87%,而当不进行脱蛋白时,回收率高达78-112%。无论存在或不存在depoteinizin,矩阵效应都在±10%以内,即使没有进行脱蛋白化,也可以抑制其影响。结果表明,当使用SPDE进行预处理时,血清脱蛋白是不必要的。在LC/TOF-MS测量中,使用Core-Shell型柱柱C18(150 mm×2.1 mm,1.7 µm)作为LC柱和50 mm乙酸铵缓冲液(pH 7.8)/乙酰酮/甲醇/甲醇混合物作为移动相。30种药物分离良好,定量极限为0.25-10 ng/ml,校准曲线的相关系数高于0.998,平均回收率范围为77.7.7%至112.1%。该方法在法医和急诊医学领域的血清中筛选镇痛药和辅助镇痛药(总共30种类型)很有用。关键词:止痛药;固相分散提取; LC/TOF-MS;血清
背景:克莫司引起的舌头有毒作用仍然是一个主要问题。因此,这项研究的目的是评估潜在的治疗性骨髓衍生的间充质干细胞(MSC)和富含血小板的血浆(PRP)对白化大鼠舌头的影响。材料和方法:将40个白化雄性大鼠分为四组。I组(对照组)未接受治疗。 II组每天接受他克莫司1 mg/kg/天的皮下注射30天。 第三组接受他克莫司30天,然后一次注射一次PRP。 第四组接受他克莫司30天,然后单次注射MSC。 在实验开始后60天后,在所有组中,大鼠均被疤痕。 用于演示胶原蛋白纤维,用马洛里三色片染色舌切片,并用苏木精和曙红染色以进行组织学分析。 在这项研究中使用了电子显微镜扫描,并使用抗PCNA初级抗体进行免疫组织化学检查舌头。 结果:他克莫司舌的舌头的组织学和免疫组织化学检查表现出较差的丝状乳头状,一些上皮细胞似乎用肥大的核退化,但是GR的舌头切片。 ii和gr。 与GR相比, IV显示了PCNA的明显舌头组织学结构改善和加强调节的表达。 II。 扫描电子显微镜支持这些结果。 关键字:克罗莫司; MSC; prp;舌毒性。I组(对照组)未接受治疗。II组每天接受他克莫司1 mg/kg/天的皮下注射30天。第三组接受他克莫司30天,然后一次注射一次PRP。第四组接受他克莫司30天,然后单次注射MSC。在实验开始后60天后,在所有组中,大鼠均被疤痕。用于演示胶原蛋白纤维,用马洛里三色片染色舌切片,并用苏木精和曙红染色以进行组织学分析。电子显微镜扫描,并使用抗PCNA初级抗体进行免疫组织化学检查舌头。结果:他克莫司舌的舌头的组织学和免疫组织化学检查表现出较差的丝状乳头状,一些上皮细胞似乎用肥大的核退化,但是GR的舌头切片。ii和gr。与GR相比, IV显示了PCNA的明显舌头组织学结构改善和加强调节的表达。 II。 扫描电子显微镜支持这些结果。 关键字:克罗莫司; MSC; prp;舌毒性。IV显示了PCNA的明显舌头组织学结构改善和加强调节的表达。II。 扫描电子显微镜支持这些结果。 关键字:克罗莫司; MSC; prp;舌毒性。II。扫描电子显微镜支持这些结果。关键字:克罗莫司; MSC; prp;舌毒性。结论:MSC和PRP在减少他克莫司施用对大鼠舌的毒性作用方面具有良好的影响,两种方法之间的差异无关。
使用BARNYARD小米粉(BMF)进行了本研究,以制定低血糖指数披萨碱,分析其养分组成,并评估其对高脂血症诱导的大鼠脂质谱的影响。BMF披萨基地是通过用40%的BMF代替精制小麦粉(RWF)来制备的。与RWF披萨相比,BMF掺入BMF显着(P <0.05)比萨饼碱中的粗纤维,蛋白质,灰分,总饮食纤维(TDF),抗氧化活性,锌和铁含量。BMF掺入披萨底座,其中8.89%的TDF富含纤维。为了确定血糖反应和GI,在替代日以外,用BMF披萨碱和比萨饼给予了十名非糖尿病成年女性参与者。BMF披萨基碱和胃gi值分别为36.67和43.43,分别为低胃肠道产物(<55)。为了分析BMF披萨碱对脂质剖面的影响,将白化大鼠(用高脂血症诱导)补充了BMF披萨碱饮食28天。给予BMF披萨碱饮食(P <0.05)降低了甘油三酸酯水平,总胆固醇,非常低密度密度的脂蛋白(VLDL),低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平高度症中的甘油三酸酯饮食。这些结果证明,用40%的BMF替换RWF对于低胃gi披萨碱的制定是可行的,这也赋予了低脂质性特性。
背景:在埃及,加巴喷丁(GBP)滥用和滥用在2012年安排模拟Pregabalin后的过去十年中增加了。尽管许多研究证实了gababalin的有害作用,但GBP的作用很少。这项研究的目的是研究和评估亚慢性高剂量给药的肾毒性作用和α-生育酚的保护作用。方法:包括三十五(35)个健康的雄性白化大鼠。他们被随机分为; four groups: group I (15 rats) which were subdivided into group Ia (5 rats) negative control (normal diet), group Ib (5 rats) positve control (normal saline), group Ic (5 rats) positve control (Corn Oil), group II which were further subdivided into group IIa (5 rats) (GBP misuse), group IIb (5 rats) (GBP withdrawal), group ΙII (5 rats) (α-生育酚)和组(5只大鼠)(GBP +α-生育酚)。所有大鼠都接受了40天的开始药物。血清尿素,肌酐和尿酸的水平。肾脏组织被接受进行组织病理学。结果:GBP提高了肾脏生物标志物水平,肾脏组织中断并增加了退化的细胞数量。α生育酚处理显着减弱了GBP引起的有害作用。结论:高剂量亚慢性施用GBP与大鼠的肾毒性作用有关。在戒断期间,组织病理学效应的出现较少。α生育酚可预防GBP诱导的肾功能受损。
摘要:有机磷酸酯农药通过抑制胆碱酯酶和随之而来的乙酰胆碱积累的不良影响而发挥毒性作用。然而,随着时间的推移,通过持续亚急性施用有机磷酸酯而持续抑制胆碱酯酶会导致毒性的初始迹象逐渐消失,这被称为行为耐受性。在本研究中,在施用急性和亚急性剂量的有机磷酸酯磷胺后,检查了大鼠大脑不同区域的胆碱酯酶活性。雄性白化大鼠的各组分别接受一次性急性剂量 1/2 LD 50(6.64 毫克/千克体重/天),以及每日亚急性口服剂量磷胺(4.333 毫克,相当于 1/3 LD 50),持续 15 天。测量了对照组和实验组的乙酰胆碱酯酶 (AChE)、红细胞胆碱酯酶 (EChE) 和血浆胆碱酯酶 (PChE) 的活性。所有胆碱酯酶的活性均下降,且不同脑区在不同时间的下降程度不同。急性和亚急性给药下纹状体活性下降最大。亚急性给药后 1 天内观察到 AChE 和 PChE 活性受到更大抑制,而 EChE 活性在亚急性给药 15 天内下降幅度最大。亚急性给药下 AChE 和 PChE 随时间恢复至对照水平,但 EChE 未恢复。7 天后,与我们在其他研究中一样,大多数毒性体征和症状消失,而胆碱酯酶活性下降一直持续到第 15 天,表明对磷胺的行为耐受性正在形成。伪胆碱酯酶活性似乎在调节胆碱酯酶的稳态和对磷胺的症状耐受性的产生中发挥着作用。
线性高斯探索性工具(例如主成分分析 (PCA) 和因子分析 (FA))广泛用于探索性分析、预处理、数据可视化和相关任务。由于线性高斯假设具有限制性,因此对于非常高维的问题,它们已被稳健、稀疏扩展或更灵活的离散-连续潜在特征模型所取代。离散-连续潜在特征模型指定依赖于数据子集的特征词典,然后推断每个数据点共享这些特征的可能性。这通常是使用关于特征分配过程的“富者得富”假设来实现的,其中词典试图将特征频率与其解释的总方差部分结合起来。在这项工作中,我们提出了一种替代方法,可以更好地控制特征到数据点的分配。这种新方法基于双参数离散分布模型,该模型将特征稀疏性和词典大小分离,从而以简约的方式捕获常见和罕见特征。新框架用于推导一种新型自适应因子分析变体 (aFA) 以及自适应概率主成分分析 (aPPCA),能够在各种场景中灵活地发现结构和降低维度。我们推导出标准吉布斯采样以及有效的期望最大化推理近似,这些近似以更快的数量级收敛到合理的点估计解。所提出的 aPPCA 和 aFA 模型的实用性在特征学习、数据可视化和数据白化等标准任务上得到了证明。我们表明,aPPCA 和 aFA 可以为原始 MNIST 或 COLI-20 图像提取可解释的高级特征,或者在应用于自动编码器分析时
抽象背景/目的:本研究的目的是设计和准备浮动原位凝胶,以维持卡维迪尔(CVD)释放并增强口服生物利用度。通过离子凝胶法制备了CVD的各种浮动原位凝胶制剂。材料和方法:采用制剂设计中的系统方法,使用羟丙基甲基纤维素(HPMC K4M),羟丙基纤维素(HPMC 100LV),硫酸钠,含Mimosa pudica pudica seed MiCOSIMA酸酸盐酸(SODICA)与各种浓度(SODICASIMA GIMACISMA gymoma gymoma gymoma gymoma gymoma gymoma gymoma,研究了碳酸氢盐的物理化学特性(体外浮动行为,药物释放概况等)。随后,基于物理化学特性涉及最终优化步骤,以实现所需的效果。结果:基于研究,HPMC K4M,HPMC 100LV,藻酸钠和Mimosa Pudica种子粘液(F17)表现出良好的浮动特性(60秒sec浮动滞后时间),药物释放的药物为96.98±2.1%,释放了12小时,该药物释放的序列均释放为ZERO,并释放了序列。在白化兔中F17的体内X射线研究表现出良好的浮动能力,最大为8小时。发现优化和对照(CARLOC)的生物利用度分别为41.95±0.8892μg.hr/ ml和26.36±1.1603μg.hr/ ml。用优化的配方进行了加速稳定性研究,并在研究期间观察到稳定。结论:得出结论,用天然聚合物开发的Carvedilol的原位原位凝胶适合GRDDS增强口服生物利用度。
后生动物通过多个生命阶段依靠与微生物的互动。例如,蚊子的发育轨迹可能会根据水生幼虫阶段可用的微生物而变化。然而,当地环境在塑造这种宿主微叶动力学和对宿主有机体的后果中所扮演的作用仍然不足。在这里,我们研究了非生物因子,局部可用的细菌的影响,以及它们对蚊子艾德斯白化菌的发育和相关微生物群的相互作用。Our findings reveal that leaf detritus infused into the larval habitat water, sourced from native Hawaiian tree ‘ ¯ ohi‘a lehua Metrosideros polymorpha , invasive strawberry guava Psidium cattleianum , or a pure water control, displayed a more substantial influence than either temperature variations or simulated microbial dispersal regimes on bacterial community composition in adult mosquitoes.然而,特定的细菌在跨碎屑输注中表现出不同的模式,这些蚊子与幼体栖息地中的丰度不符。具体来说,我们观察到了菊花杆菌的相对丰度较高。从草莓番石榴输注中的蚊子中的菌株比纯水控制,而对于假单胞菌sp。观察到相反的趋势。应变。在一项后续实验中,我们操纵了这两种细菌菌株的存在,并通过包括菊科SP来增强幼体发育成功。草莓番石榴输注和假单胞菌sp。在纯水控制中应变。共同表明,幼虫环境的非生物因素和微生物之间的相互作用可以帮助塑造蚊子人群的成功。
Chiara Albertini出生于1998年9月25日,在lodi(意大利)chiara.albertini01@universitadipavia.it遗传学,分子和细胞生物学教育博士学位| Octaber 2024-正在进行的帕维亚大学博士学位项目标题:伊迪斯蚊子蚊子的基因组可塑性博士学位主管:Lino Ometto Phd审稿人教授:计算基因组学的Michele Castelli MSC博士| 2021-2024米兰大学和政治米拉诺大学论文标题:蛋白质分歧是@Erent Lineages主管的可比较物种的代理:ChristianRödelsgerger博士生物学| 2017年 - 2021年帕维亚大学论文标题:Bactrocera Fruit IAS基因组中可转座元素的分析:Lino Ometto教授艺术高中文凭| 2012年 - 2017年艺术高中“ Callisto Piazza”,作者:Lodi研究经验研究赠款,以研究蚊子的热适应性|弗吉尼亚州 - 2024年9月 - 帕维亚大学主管:Lino Ometto教授一年一年的研究赠款,研究是否可以在埃德斯白opotus蚊子的基因组中动员下的元素,以及这种可变性是否可以导致蚊子的适应,从而避免使用蚊子。他们的侵入性。 培养蚊子的培训和维护实验室菌落| 2024年2月 - 帕维亚大学正在进行的经验,可以通过殖民地维护的所有阶段来保持埃德斯白化蚊子的实验室殖民地。Chiara Albertini出生于1998年9月25日,在lodi(意大利)chiara.albertini01@universitadipavia.it遗传学,分子和细胞生物学教育博士学位| Octaber 2024-正在进行的帕维亚大学博士学位项目标题:伊迪斯蚊子蚊子的基因组可塑性博士学位主管:Lino Ometto Phd审稿人教授:计算基因组学的Michele Castelli MSC博士| 2021-2024米兰大学和政治米拉诺大学论文标题:蛋白质分歧是@Erent Lineages主管的可比较物种的代理:ChristianRödelsgerger博士生物学| 2017年 - 2021年帕维亚大学论文标题:Bactrocera Fruit IAS基因组中可转座元素的分析:Lino Ometto教授艺术高中文凭| 2012年 - 2017年艺术高中“ Callisto Piazza”,作者:Lodi研究经验研究赠款,以研究蚊子的热适应性|弗吉尼亚州 - 2024年9月 - 帕维亚大学主管:Lino Ometto教授一年一年的研究赠款,研究是否可以在埃德斯白opotus蚊子的基因组中动员下的元素,以及这种可变性是否可以导致蚊子的适应,从而避免使用蚊子。他们的侵入性。培养蚊子的培训和维护实验室菌落| 2024年2月 - 帕维亚大学正在进行的经验,可以通过殖民地维护的所有阶段来保持埃德斯白化蚊子的实验室殖民地。硕士论文实习|麦克斯·普朗克生物学研究所,图宾根(德国)监督员的3月至2023年9月进化基因组学和生物信息学小组:克里斯蒂安·罗德尔斯伯格(ChristianRödelspergerger)博士一个6个月的研究项目,多种生物信息学工具(diamond,bast,bast,blast,blast,bust,busco,busco,busco,phhobius,phyovision in Discement in Discover in Discoy in Discement in Discement)蛋白质差异值可用于在蛋白质差异水平上研究物种对中的基因组特征。