简介:紫皮蛋白是一种由各种细菌产生的双座,众所周知,可以显示出广泛的药物特性。不幸的是,天然紫饼蛋白生产商的生产力低,导致了不一致的紫cile蛋白供应,从而限制了其作为未来治疗剂的应用。异源表达系统,例如大肠杆菌和Pichia Pastoris,提供了一种产生这些高价值的次级代谢物的替代方法。这项工作描述了大肠杆菌中紫质蛋白异源生产的遗传体系的发展。方法:紫c。violaceum,mth01的生产者是从马来西亚马来西亚大学的林理学基础上分离出来的。使用基因特异性底漆,整个7.3 Kb紫out基因簇从C. volaceum mth01 DNA成功扩增,克隆到PUC19矢量(PVIO19)中,然后分别为PET-3A和PET-3A和PET-11B,分为PVIO3A和PVIO3A和PVIO11B,分别为PET-3A和PET-11B。为异源表达,优化了碳源,温度,诱导剂(IPTG)和L-色氨酸的参数。使用TLC和FTIR分析了从紫色的大肠杆菌转化体中提取的violacein。结果:几天后,含有PVIO3A或PVIO11B的大肠杆菌转化体开发了紫色菌落,表明紫co菌菌素在大肠杆菌中成功表达。TLC分析显示,RF值可与脱氧维奥莱辛(紫氧化紫葡萄丝(Deoxyviolacein)(一种中介代谢物)中的脱氧葡萄蛋白相媲美,而FTIR光谱揭示了胺和羰基的存在,这两个都是吲哚的特征。结论:此处描述的大肠杆菌异源系统可以利用葡萄糖或甘油作为碳源。将L-色氨酸添加到生长培养基中对于成功表达紫col途径是必要的。
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摘要:这项研究旨在确定在室温和真空包装下添加超声的椰子贝壳液体烟雾在北京鸭干的效果。地鸭干由浸泡在椰子壳液体烟雾(CSL)中的紫鸭肉(Anas Platyrhynchos fimderus)制成,该烟雾(CSL)被超声处理20分钟,并用大蒜,galangal,galangal,coriander,coriander,coriander,tamarind,tamarind,盐,盐和椰子糖调味。使用完全随机的设计(CRD)进行了实验室实验(对照:0天存储期,T1:7天,T2:14天,T3:21天,T4:28天)和4个复制。结果表明,添加超声的CSL对北皮地面鸭的保质期有所不同,对pH,质地,颜色L,a*,a*,a*,a*,a,aw,水含量,水含量,脂肪,脂肪,碳水化合物,硫代巴比妥酸(tba)和iodine数字具有显着影响(p <0.01)。对灰分含量具有显着影响(p <0.05),对水的容量(WHC),蛋白质含量和有机摄影的质量没有显着影响。可以得出结论,在室温下储存地鸭干14天,真空包装并未显示出对pH,水活动,水含量,脂肪,蛋白质,蛋白质,TBA和碘的损害,并且没有发生疾病。
目的蛋白质经常用融合标签来表达,以方便实验分析。在通常为二倍体的锥虫中,标签编码 DNA 片段通常与一个天然等位基因融合。然而,由于重组细胞在转染后占群体的 0.1% 以下,这些 DNA 片段还包含一个标记盒用于正向选择。因此,天然 mRNA 非翻译区 (UTR) 被替换,可能会扰乱基因表达;在锥虫中,UTR 通常会在广泛和组成性多顺反子转录的背景下影响基因表达。我们试图开发一种标记策略,以保留血流形式非洲锥虫的天然 UTR,在这里我们描述了一种基于 CRISPR/Cas9 的敲入方法来驱动精确和无标记的必需基因标记。使用简单的标签编码扩增子,我们标记了四种蛋白质:组蛋白乙酰转移酶,HAT2;组蛋白去乙酰化酶,HDAC3;切割和多聚腺苷酸化特异性因子 CPSF3;以及变体表面糖蛋白排除因子 VEX2。该方法保留了天然 UTR,并产生了表达功能性重组蛋白的克隆菌株,通常两个等位基因都被标记。我们展示了基于免疫荧光的定位和富集蛋白质复合物的实用性;在本例中是 GFP HAT2 或 GFP HDAC3 复合物。这种精确标记方法有助于组装表达必需重组基因的菌株,同时保留其天然 UTR。
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抽象的酚类化合物被广泛发现,植物中众所周知的二级代谢。鉴定和量化化合物的定量及其生物活性的确定揭示了植物的未知秘密。Robinia Pseudoacacia(RP)被称为白花假相思,分布在土耳其北部的Anatolia。分光光度法和色谱技术用于识别酚类的存在和数量。在这项研究中,用甲醇提取RP花和叶,并通过LC-MS/MS分析以确定其植物化学含量。水杨酸和音调酸是叶子和花朵中的主要产物。据报道, RP提取物具有抗菌活性和BCHE抑制特性。 因此,通过分子对接(Moldock)研究了主要成分水杨酸和音调酸的BCHE和DD肽酶抑制特性。 根据Moldock的结果,音调酸与BCHE和DD肽酶相互作用,并分别为霉菌评分-79.38和-71.25,分别具有-5.90和-5.40 kcal/mol。 水杨酸与BCHE和DD肽酶相互作用,计算为-63.54的摩尔克评分和-66.18,结合能分别为-6.10和-5.70 kcal/mol。 结果,水杨酸在其与BCHE和DD肽酶的相互作用中具有较高的结合能。 从理论上讲,水杨酸可以用作良好的BCHE和DD肽酶抑制剂。 ÖzFenolikbileşiklerbitkilerdeyaygınOalarakbulunan ve iyi bilinen sekonder sekonder sekonder apabolitlerdir。RP提取物具有抗菌活性和BCHE抑制特性。因此,通过分子对接(Moldock)研究了主要成分水杨酸和音调酸的BCHE和DD肽酶抑制特性。根据Moldock的结果,音调酸与BCHE和DD肽酶相互作用,并分别为霉菌评分-79.38和-71.25,分别具有-5.90和-5.40 kcal/mol。水杨酸与BCHE和DD肽酶相互作用,计算为-63.54的摩尔克评分和-66.18,结合能分别为-6.10和-5.70 kcal/mol。结果,水杨酸在其与BCHE和DD肽酶的相互作用中具有较高的结合能。从理论上讲,水杨酸可以用作良好的BCHE和DD肽酶抑制剂。ÖzFenolikbileşiklerbitkilerdeyaygınOalarakbulunan ve iyi bilinen sekonder sekonder sekonder apabolitlerdir。鉴定酚类化合物,确定数量和确定生物学活性揭示了植物的未知秘密。Robinia Pseudoacacia(RP)被称为白色开花的假相思,并在Türkiye的北安纳托利亚传播。分光光度法和色谱技术用于确定酚类的存在和数量。在这项研究中,用甲醇提取RP花和叶,并用LC-MS/MS分析以确定植物化学含量。水杨酸和siringic酸是叶子和花朵中的主要产物。据报道, RP提取物具有抗菌活性和BCHE抑制剂特性。 因此,通过分子放置(Moldock)方法研究了抑制BCHE和DD肽酶的水杨酸和硫酸的主要成分。 根据Moldock的结果,由于Siringic Acid,BCHE和DD Pepteptidas相互作用,将Moldock得分-79.38,-71.25和连接能量计算为-5.90,-5.40 kcal/mol。 由于与 bche和DD肽酶的相互作用,水杨酸-63.54,-66.18的Moldock评分为-6.10,-5.70 kcal/mol。 结果,发现水杨酸在与BCHE和DD肽酶相互作用中具有较高的结合能。 理论上,水杨酸可以用作良好的BCHE和DD肽酶抑制剂。RP提取物具有抗菌活性和BCHE抑制剂特性。因此,通过分子放置(Moldock)方法研究了抑制BCHE和DD肽酶的水杨酸和硫酸的主要成分。根据Moldock的结果,由于Siringic Acid,BCHE和DD Pepteptidas相互作用,将Moldock得分-79.38,-71.25和连接能量计算为-5.90,-5.40 kcal/mol。bche和DD肽酶的相互作用,水杨酸-63.54,-66.18的Moldock评分为-6.10,-5.70 kcal/mol。结果,发现水杨酸在与BCHE和DD肽酶相互作用中具有较高的结合能。理论上,水杨酸可以用作良好的BCHE和DD肽酶抑制剂。
在最近引入 CRISPR/Cas9 技术进行基因敲除、基因敲入、基因补充和内源基因标记之前,很少有基因工具可用于研究克氏锥虫。核糖开关是天然存在的自裂解 RNA(核酶),可被配体激活。我们实验室最近的研究结果证明了枯草芽孢杆菌中的 glmS 核酶可用于布氏锥虫的基因沉默,该核酶已被证明可控制响应外源葡萄糖胺的报告基因表达。在这项工作中,我们使用 CRISPR/Cas9 系统用活性(glmS)或非活性(M9)核酶对克氏锥虫糖蛋白 72(TcGP72)和液泡质子焦磷酸酶(TcVP1)进行内源性标记。通过 PCR 确认基因标记,并通过蛋白质印迹分析验证蛋白质下调。通过免疫荧光分析和体外生长定量进行进一步的表型表征。我们的结果表明,该方法成功地抑制了两种基因的表达,而无需培养基中的葡萄糖胺,这表明克氏锥虫在正常生长条件下产生足够水平的内源性葡萄糖胺 6-磷酸来刺激 glmS 核酶活性。该方法可用于敲除克氏锥虫中的必需基因并验证这种寄生虫中的潜在药物靶点。
摘要。- 在本研究中,我们重新研究了传统草药对人类免疫力的功效。在Internet的PubMed,KırıkkaleUniversity,Google University,Google University的PubMed,Proquest Central数据库和Google Scholar数据库中进行了文献调查。搜索关键词是“免疫”,“ Im-Mune System”,“ Herbal”,“ Pelargonium sidoi-des”,“ Echinacea purpurea”,“ Sambucus nigra”,“ Beta Glucan”,“ Beta Glucan”,“ Vitamin C”,“ Zinc”。imune系统是一种自然的自卫机制,由细胞组成,该细胞有助于身体区分自我和非自我摩尔形成。必须定期修改所有免疫系统组件,以使身体脱落与不断发展的微生物相抵触,这些微生物一直在寻找新的方法来抗宿主。一种中草药配方是几种草药的组合。从业者开始,旨在治疗疾病的一种或两个主要物质。草药疗效的可重复性取决于每种独特的原始草药质量的一致性。pelargonium sidoi-des,紫锥菊紫癜,nigra sambucus nigra,be-ta葡萄糖,维生素C和锌是用于Human免疫力的益处。草药毫无疑问对于增强免疫功能受损而具有价值,尤其是在由于营养不良,慢性疾病或前感染引起的损害时。目前,Invincipi-Ble免疫系统仍然处于幻想领域。