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简介:紫皮蛋白是一种由各种细菌产生的双座,众所周知,可以显示出广泛的药物特性。不幸的是,天然紫饼蛋白生产商的生产力低,导致了不一致的紫cile蛋白供应,从而限制了其作为未来治疗剂的应用。异源表达系统,例如大肠杆菌和Pichia Pastoris,提供了一种产生这些高价值的次级代谢物的替代方法。这项工作描述了大肠杆菌中紫质蛋白异源生产的遗传体系的发展。方法:紫c。violaceum,mth01的生产者是从马来西亚马来西亚大学的林理学基础上分离出来的。使用基因特异性底漆,整个7.3 Kb紫out基因簇从C. volaceum mth01 DNA成功扩增,克隆到PUC19矢量(PVIO19)中,然后分别为PET-3A和PET-3A和PET-11B,分为PVIO3A和PVIO3A和PVIO11B,分别为PET-3A和PET-11B。为异源表达,优化了碳源,温度,诱导剂(IPTG)和L-色氨酸的参数。使用TLC和FTIR分析了从紫色的大肠杆菌转化体中提取的violacein。结果:几天后,含有PVIO3A或PVIO11B的大肠杆菌转化体开发了紫色菌落,表明紫co菌菌素在大肠杆菌中成功表达。TLC分析显示,RF值可与脱氧维奥莱辛(紫氧化紫葡萄丝(Deoxyviolacein)(一种中介代谢物)中的脱氧葡萄蛋白相媲美,而FTIR光谱揭示了胺和羰基的存在,这两个都是吲哚的特征。结论:此处描述的大肠杆菌异源系统可以利用葡萄糖或甘油作为碳源。将L-色氨酸添加到生长培养基中对于成功表达紫col途径是必要的。

从大肠杆菌中紫罗兰菌的紫罗兰生物合成途径重建

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