Anzalone, AV、Koblan, LW 和 Liu, DR (2020)。使用 CRISPR–Cas 核酸酶、碱基编辑器、转座酶和主要编辑器进行基因组编辑。《自然生物技术》,1-21。
要查看TALEN目标,请单击表的“ Talen”选项卡,并将显示每个Talen对的类似信息。TAL效应子核酸酶(TALEN)对。设计结果表中的绿色选中标记将指示推荐的技术。在Thermofisher.com/tal上了解有关Talen Technology的更多信息。
摘要 CRISPR这个术语在英文中的缩写是指Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats,即成群的、有规律地分散的短回文重复序列,由于其在基因组中的特点,天然地属于细菌和古菌的防御系统。这已在生物技术上适用于编辑真核细胞(包括人类细胞)的 DNA。 CRISPR-Cas基因编辑系统通常由两部分组成:核酸酶蛋白(Cas)和向导RNA(sgRNA)。该复合物的简单性使其成为一种可重新编程的分子工具,能够靶向和编辑已知基因组中的任何位点。其主要重点是单基因遗传疾病和癌症的治疗。然而,CRISPR 技术除了作为基因编辑器之外,还用于表观遗传编辑、调控基因表达和作为分子诊断方法。本文旨在回顾 CRISPR-Cas 分子工具的应用,特别是在生物医学领域的应用、可能的治疗和诊断,以及迄今为止使用 CRISPR/Cas 基因治疗的临床研究中最相关的进展。
视图将更新以显示“选择 gRNA 选项”。单击适合您需求的 sgRNA 选项 - “预先设计的 sgRNA”(仅限人类和小鼠基因)或“自定义 gRNA 和 TALEN 设计”。如果您对插入终止密码子的区域没有偏好,并且正在人类或小鼠细胞中工作,建议使用“预先设计的 sgRNA”。否则,选择“自定义 gRNA 和 TALEN 设计”。本文档中显示的大多数步骤对于两个工作流程都相似。
对于使用 CRISPR 技术的敲除富集实验,设计步骤中选择的 gRNA 和 Invitrogen™ TrueTag™ 供体引物将自动包含在内。该工具还将添加 TrueTag Knockout Enrichment Donor DNA Kit,其中包含所需的供体模板、PCR 试剂和清理试剂盒,以生成可用于转染的供体 DNA。还包括 Invitrogen™ TrueTag™ 验证引物,用于进行连接分析,以确保供体模板正确插入。
要查看TALEN目标,请单击表的“ Talen”选项卡,并将显示每个Talen对的类似信息。TAL效应子核酸酶(TALEN)对。设计结果表中的绿色选中标记将指示推荐的技术。在Thermofisher.com/tal上了解有关Talen Technology的更多信息。
要查看 TALEN 靶标,请单击表格中的 TALEN 选项卡,每个 TALEN 对都会显示类似的信息。当敲入位点 10 bp 范围内没有 PAM 位点,或者 gRNA 的效率和特异性不理想时,建议使用 TAL 效应核酸酶 (TALEN) 对。设计结果表中的绿色复选标记将指示推荐的技术。有关 TALEN 技术的更多信息,请访问 thermofisher.com/tal 。
要查看TALEN目标,请单击表的“ Talen”选项卡,并将显示每个Talen对的类似信息。TAL效应子核酸酶(TALEN)对。设计结果表中的绿色选中标记将指示推荐的技术。在Thermofisher.com/tal上了解有关Talen Technology的更多信息。
在哈特福德大学教师学习发展中心 (FCLD) 获得技术帮助 FCLD 为在教学中使用技术的教职员工提供咨询和教学支持。位于 Mortensen 203a 的 FCLD 教师实验室可供教职员工使用,并配备了教学技术相关设备,包括:PC、Mac、扫描仪和投影仪以及支持人员。需要 Blackboard 或其他教学技术支持的教职员工应联系 FCLD。电话:(860) 768-4661 电子邮件:fcld@hartford.edu 网站:http://www.hartford.edu/fcld 学生 Blackboard 支持以下仅针对 Blackboard 的学生支持。所有其他支持技术支持问题都需要联系技术服务办公室 (如下)。电话:(860) 768-4636 电子邮件:bbsupport@hartford.edu 常见问题/提交工单:http://www.hartford.edu/studentbbsupport 信息技术服务 (ITS) 服务台 用于一般计算机和互联网/网络支持问题(与课堂无直接关系,而是密码、互联网/电子邮件问题、横幅/自助服务、校园 Facebook)。 电话:(860) 768-4357 电子邮件:helpdesk@hartford.edu 网站:http://hartford.edu/ots 媒体技术服务 (MTS) 教职员工应联系 MTS 以获得有关安排或实施课堂技术(双向互动视频教室、智能讲台、笔记本电脑等)、设置 WebEx 帐户或安排和指导各种媒体设备和资源(如 LCD 数据投影仪、CD/盒式磁带播放器、电视和录像机、数字视频等)的帮助。电话:(860) 768-4357 网站:http://www.hartford.edu/mts
S. Haihua Chu,Daisy Lam,Michael S Packer,Jenny Olins,Alexander Liquori,Kyle Rehberger,Conrad Rinaldi,Jeffrey Marshall,Calvin Lee,Bo Yan,Bo Yan,Jeremy Decker,Jeremy Decker,Bob Gantzer,Scott Haskett,Scott Haskett,Tanggis Bohnuud,David Born,David born born barr barr,luiis,luuis,luuis。 Slaymaker,Nicole Gaudelli,Sarah Smith,Adam Hartigan和Giuseppe CiaramellaS. Haihua Chu,Daisy Lam,Michael S Packer,Jenny Olins,Alexander Liquori,Kyle Rehberger,Conrad Rinaldi,Jeffrey Marshall,Calvin Lee,Bo Yan,Bo Yan,Jeremy Decker,Jeremy Decker,Bob Gantzer,Scott Haskett,Scott Haskett,Tanggis Bohnuud,David Born,David born born barr barr,luiis,luuis,luuis。 Slaymaker,Nicole Gaudelli,Sarah Smith,Adam Hartigan和Giuseppe Ciaramella