摘要 通过聚合酶链式反应,可以从基因组 DNA 中酶促扩增单拷贝序列。通过使用两种不同摩尔量的扩增引物,只需一个步骤即可扩增单拷贝基因并产生所选链的过量单链 DNA,用于直接测序或用作杂交探针。此外,可以使用等位基因特异性寡核苷酸在扩增反应中或作为测序引物直接测序杂合子中的单个等位基因。通过使用这些方法,我们研究了 HLA-DQA 基因座的等位基因多样性及其与血清学定义的 HLA-DR 和 -DQ 类型的关联。该分析揭示了总共八个等位基因和三个额外的单倍型。该方法在筛查人类基因突变方面具有广泛的应用,并有助于将基因的酶促扩增与自动测序联系起来。
Boster 抗体和 ELISA 专家。(nd)PCR 原理。Boster 抗体和 ELISA 专家。https://www.bosterbio.com/protocol-and-troubleshooting/pcr-principle New England BioLabs Inc. (2021)。使用标准 Taq 缓冲液 (M0273) 的 Taq DNA 聚合酶 PCR 方案。New England BioLabs Inc. https://www.neb.com/protocols/0001/01/01/taq-dna-polymerase-with-standard -taq-buffer-m0273 Pilotte, N. (2013 年 11 月 5 日) 如何计算 PCR 反应所需的引物量?Research Gate。https://www.researchgate.net/post/How_does _one_calculate_the_required_amount_of_primers_required_for_PCR_reaction Promega。(2018 年 4 月)。 GoTaq® DNA 聚合酶 (M300) 协议。Promega。
1. 美洲大学(UDLA)研究总局研究实验室,安提瓜 Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 2. 美洲大学(UDLA)工程与应用科学学院生物技术工程项目,安提瓜 Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 3. 厄瓜多尔基多美洲大学(UDLA)健康科学学院兽医学项目,Antigua Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 4. 农业产业与环境科学学院。农业生涯。卡尔奇州立理工大学 (UPEC)。 Antisana S/N 和 University Avenue,图尔坎 EC 040102,厄瓜多尔; 5. 罗萨里奥国立大学(UNR)兽医学院。奥维迪奥拉各斯大道和 33 号公路卡西尔达 – 圣达菲 – 阿根廷; 6. 厄瓜多尔中央大学兽医学与畜牧学院,厄瓜多尔基多,Gatto Sobral 和 Jerónimo Leiton,基多 EC 170521,厄瓜多尔; 7. 美洲大学(UDLA)教学兽医诊所,Shuara 街 N40-55 和 De Los Granados 大道,基多,EC 170503,厄瓜多尔; 8. 美洲大学(UDLA)“一个健康研究小组”,安提瓜 Via a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔。通讯作者:Luis Nuñez,电子邮件:fabiann7@yahoo.es 共同作者:ALG:a.abel.loor.giler@gmail.com,SCR:sara.castillo.reyes@udla.edu.ec,SSP:silvanahsp@yahoo.com,MC:rolando.campos@upec.edu.ec,RMP:rpmena@uce.edu.ec,SPC:sdpch2021@gmail.com 收稿日期:2024 年 5 月 8 日,接受日期:2024 年 9 月 11 日,在线发表日期:2024 年 10 月 17 日