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使用 CRISPR/Cas9 对无融合生殖四倍体草皮和牧草（Paspalum notatum Flügge ́）进行多等位基因编辑
多倍体在禾本科植物中很常见，对传统育种提出了挑战。基因组编辑技术绕过了杂交和自交，能够在一代中对多个基因拷贝进行有针对性的修改，同时保持许多多倍体基因组的杂合背景。巴哈草（Paspalum notatum Flügge ́；2 n =4 x =40）是一种无融合生殖的四倍体 C4 物种，在美国东南部广泛种植，作为肉牛生产和公用事业草坪的饲料。叶绿素生物合成基因镁螯合酶（MgCh）被选为在四倍体巴哈草中建立基因组编辑的快速读出目标。含有 sgRNA、Cas9 和 npt II 的载体通过基因枪法递送到愈伤组织培养物中。通过基于 PCR 的检测和 DNA 测序对编辑植物进行了表征，并观察到高达 99% 的 Illumina 读数的诱变频率。野生型 (WT) 巴哈草的测序显示，MgCh 的序列变异水平很高，这可能是因为存在至少两个拷贝，可能包含八种不同的等位基因，包括假基因。MgCh 突变体表现出明显的叶绿素消耗，叶片绿度降低了 82%。两种品系显示出随时间推移的编辑进展，这与体细胞编辑有关。获得了嵌合 MgCh 编辑事件的无融合生殖后代，并允许在一系列叶绿素消耗表型中识别出统一编辑的后代植物。高度编辑的突变体的 Sanger 测序显示 WT 等位基因的频率升高，可能是由于频繁的同源定向修复 (HDR)。据我们所知，这些实验是首次报道将基因组编辑应用于多年生暖季草皮或牧草。该技术将加速巴哈草品种的开发。
孕妇牛母牛营养不良，对被动免疫转移到小牛的影响
Rangeland肉牛系统的营养管理优先于产犊时最佳的身体状况评分，以提高生育能力和生殖成功。然而，这种重点通常会在产犊前忽略短期饮食效果，这可能导致新生儿犊牛的不良后果。本综述探讨了周围时期牛肉营养不良的影响对初乳产生，泌乳发作和被动免疫转移到小牛的影响。此外，它讨论了这种营养不良对后代的长期影响。通过了解营养干预措施如何影响从妊娠到泌乳的过渡，可以在干旱的热带环境中增强小腿健康和生存。通常发生的短期饮食限制，尤其是蛋白质的限制，可能会破坏激素平衡，从而导致初乳量和质量减少，阻碍小牛的生长并增加死亡率风险。此外，在此期间的饮食限制会影响关键的生理过程，例如乳腺血液流量和胎儿小脑发育。审查探讨了这些约束如何影响初乳的产生和新生儿犊牛的免疫球蛋白吸收。此外，它突出了解决其他常见的营养定义（例如磷和水）的重要性，并研究了补充微生物产物以增强瘤胃功能并保护母牛免受影响不足的潜在利益。最终，解决怀孕期间的营养不良对于防止对后代表现的负面影响至关重要，包括改变car体成分和肌肉大理石花纹。因此，通过使用昂贵的遗传学来旨在使尸体中出色的肌肉大理石花纹的牛生产者应优先考虑加强晚期孕妇的营养计划。总而言之，在周围时期营养不良时期对初乳生产，被动免疫转移和整体小牛健康的影响，对于开发有效的营养干预措施至关重要，从而改善了乳头牛牛牛牛牛牛牛牛的整体养分型营养干预措施。
2024_CMI-WESTPAC_CARBON-MARKET-REPORT.PDF综合农场和土地管理方法
Bowen等。 （2022）在澳大利亚昆士兰州穆尔加（Mulga）土地上建立肉牛物业的弹性的机会。 《牧场期刊》 44.2：115-128。 Bowman，D.M.，Murphy，B。P.，Neyland，D.L.，Williamson，G。J.，＆Prior，L。D.（2014）。 突然的火力变化可能会导致范围内的较底部底漆森林的损失。 Global change biology, 20(3), 1008–1015 https://doi.org/10.1111/gcb.12433 Braden J, Mills CH, Cornwell WK, Waudby HP, Letnic M (2021), Impacts of grazing by kangaroos and rabbits on vegetation and soils in a semi-arid conservation reserve Journal of Arid Environments, Volume 190. Briggs，S。等。 （2008）澳大利亚东南部内陆集水区的围栏和未发放的残留植被的状况。 澳大利亚植物学杂志56.7：590-599。 Brown，R。F.（1985）。 年轻的穆尔加（Acacia aneura F. Muell）树木在不同水平的放牧下的生长和存活。 《牧场日报》，第7（2）期，143-148。 BüchiL，Wendling M，AmosséC。，Necpalova M和Charles R（2018）'覆盖作物在减轻土壤耕作减少的负面影响和促进冬小麦种植系统中的负面影响方面的重要性”，农业，生态系统和环境，256：92-104。Bowen等。（2022）在澳大利亚昆士兰州穆尔加（Mulga）土地上建立肉牛物业的弹性的机会。《牧场期刊》 44.2：115-128。Bowman，D.M.，Murphy，B。P.，Neyland，D.L.，Williamson，G。J.，＆Prior，L。D.（2014）。 突然的火力变化可能会导致范围内的较底部底漆森林的损失。 Global change biology, 20(3), 1008–1015 https://doi.org/10.1111/gcb.12433 Braden J, Mills CH, Cornwell WK, Waudby HP, Letnic M (2021), Impacts of grazing by kangaroos and rabbits on vegetation and soils in a semi-arid conservation reserve Journal of Arid Environments, Volume 190. Briggs，S。等。 （2008）澳大利亚东南部内陆集水区的围栏和未发放的残留植被的状况。 澳大利亚植物学杂志56.7：590-599。 Brown，R。F.（1985）。 年轻的穆尔加（Acacia aneura F. Muell）树木在不同水平的放牧下的生长和存活。 《牧场日报》，第7（2）期，143-148。 BüchiL，Wendling M，AmosséC。，Necpalova M和Charles R（2018）'覆盖作物在减轻土壤耕作减少的负面影响和促进冬小麦种植系统中的负面影响方面的重要性”，农业，生态系统和环境，256：92-104。Bowman，D.M.，Murphy，B。P.，Neyland，D.L.，Williamson，G。J.，＆Prior，L。D.（2014）。突然的火力变化可能会导致范围内的较底部底漆森林的损失。Global change biology, 20(3), 1008–1015 https://doi.org/10.1111/gcb.12433 Braden J, Mills CH, Cornwell WK, Waudby HP, Letnic M (2021), Impacts of grazing by kangaroos and rabbits on vegetation and soils in a semi-arid conservation reserve Journal of Arid Environments, Volume 190.Briggs，S。等。（2008）澳大利亚东南部内陆集水区的围栏和未发放的残留植被的状况。澳大利亚植物学杂志56.7：590-599。Brown，R。F.（1985）。 年轻的穆尔加（Acacia aneura F. Muell）树木在不同水平的放牧下的生长和存活。 《牧场日报》，第7（2）期，143-148。 BüchiL，Wendling M，AmosséC。，Necpalova M和Charles R（2018）'覆盖作物在减轻土壤耕作减少的负面影响和促进冬小麦种植系统中的负面影响方面的重要性”，农业，生态系统和环境，256：92-104。Brown，R。F.（1985）。年轻的穆尔加（Acacia aneura F. Muell）树木在不同水平的放牧下的生长和存活。《牧场日报》，第7（2）期，143-148。BüchiL，Wendling M，AmosséC。，Necpalova M和Charles R（2018）'覆盖作物在减轻土壤耕作减少的负面影响和促进冬小麦种植系统中的负面影响方面的重要性”，农业，生态系统和环境，256：92-104。BüchiL，Wendling M，AmosséC。，Necpalova M和Charles R（2018）'覆盖作物在减轻土壤耕作减少的负面影响和促进冬小麦种植系统中的负面影响方面的重要性”，农业，生态系统和环境，256：92-104。
CRISPR 情况说明书 CSU
1.) Ishino, Y.、Shinagawa, H.、Makino, K.、Amemura, M. 和 Nakata, A. (1987)。负责大肠杆菌碱性磷酸酶同工酶转化的 iap 基因的核苷酸序列以及该基因产物的鉴定。J. Bacteriol. 169:5429-5433 2.) Jansen, R.、van Embden, JDA、Gaastra, W. 和 Schouls, LM (2002)。在原核生物中鉴定一种新型序列重复家族。OMICS 6:23-33 3.) Schaeffer, SK 和 Nakata, PA (2015)。CRISPR/Cas9 介导的植物基因组编辑和基因替换：从实验室到田野的转变。植物科学。 240:130-142 4.) Gomaa, AA, Klumpe, HE, Luo, ML, Selle, K., Barrangou, R. 和 Beisel, CL (2014) 使用基因组靶向 CRISPR-Cas 系统可编程去除细菌菌株。mBio 5(1):e00928-13 5.) Cui, L. 和 Bikard, D. (2016). Cas9 切割对大肠杆菌染色体的影响。Nucleic Acids Res. 44(9):4243-4251 6.) Yang, H., Jia, M., Geornaras, I., Woerner, DR, Morley, PS 和 Belk, KE (2017). 扩展 CRISPR-Cas9 系统在牛肉生产中序列特异性消除食源性病原体的能力。最终报告由美国科罗拉多州立大学肉类安全与质量中心提交给美国全国牛肉协会，科罗拉多州柯林斯堡，24 页。7.) Yang, H., Jia, M., Geornaras, I., Woerner, DR, Morley, PS 和 Belk, KE (2018)。构建噬菌体介导系统以递送 CRISPR-Cas9 抗菌剂，从而针对序列特异性地消除牛肉生产中的食源性病原体。最终报告由美国科罗拉多州立大学肉类安全与质量中心提交给美国全国牛肉协会，科罗拉多州柯林斯堡，32 页。8.) Luo, ML, Leenay, RT 和 Beisel, CL (2016)。基于 CRISPR 的细菌工具的现状和未来前景。生物技术与生物工程。113(5):930-43。 9.) de la Fuente-Núñez, C. 和 Lu, TK (2017)。CRISPR-Cas9 技术：在基因组工程中的应用、序列特异性抗菌药物的开发以及未来前景。Integr Biol (Camb)。9(2):109-122。10.) Es, I.、Gavahian, M.、Marti-Quijal, FJ、Lorenzo, JM、Khaneghah, AM、Tsatsanis, C.、Kampranis, SC 和 Barba, FJ (2019)。CRISPR-Cas9 基因组编辑机制在食品和农业科学中的应用：现状、未来前景和相关挑战。Biotechnol. Adv. 37:410-421 11.) Van der Berg, JP、Kleter, GA、Battaglia, E.、Groenen, MAM 和 Kok, EJ (2020)。牛基因改造的发展及其对监管、安全和可追溯性的影响。农业科学工程前沿 7:136-147 12.) Yang, H., Dong, J., Geornaras, I., Thomas, MG, Prenni, JE & Belk, KE (2021). 使用基于组学的分析方法和牛细胞系模型系统评估和减轻基于 CRISPR-Cas9 的靶向杀灭系统在肉牛生产中的潜在生物安全风险。科罗拉多州立大学肉类安全与质量中心（科罗拉多州柯林斯堡）提交给美国全国牛肉协会的最终报告，58 页。
以孕酮为基础的印度牛定时人工授精方案 II：人工授精时使用或不使用 GnRH 的 EB 或 GnRH 类型方案的生殖结果
这些实验的目的是研究使用不同激素治疗的 7 天孕酮 (P4) 固定时间人工授精 (FTAI) 方案的 Bos indicus 肉牛的卵巢动力学和生育力。在实验 1 中，2 岁的 Nelore 小母牛 (n = 973) 被随机分配到四个治疗组之一：EB-0（苯甲酸雌二醇，D0 使用 EB，人工授精时不使用 GnRH），EB-G（D0 使用 EB，人工授精时使用 GnRH），G-0（D0 使用 GnRH，人工授精时不使用 GnRH）或 GG（D0 和人工授精时使用 GnRH）。在 D0，小母牛接受阴道内 P4 植入物（0.5 克）7 天，并接受 EB（1.5 毫克）或 GnRH（16.8 毫克）。在第 7 天，撤回 P4 植入物，小母牛接受氯前列醇 (PGF；0.5 mg) 和环戊丙酸雌二醇 (EC，0.5 mg) 治疗。G 组的小母牛在第 6 天也接受 PGF 和 eCG (200 IU) 治疗，而 EB 小母牛在第 7 天接受 eCG 治疗。在第 9 天的 FTAI 中，只有 EB-G 和 GG 组接受 GnRH (8.4 mg)。在实验 2 中，Nelore 奶牛 (n = 804) 接受相同的治疗 (EB-0、EB-G、G-0 或 GG)，使用 1.0 g P4 植入物、2.0 mg EB 和 300 IU eCG。当 P 0.05 时，效果被认为显著。治疗后，D0 时，G 组小母牛排卵数多于 EB 组（60.3 [287/ 476] vs. 12.7% [63/497]）和母牛排卵数多于 EB 组（73.7 [83/112] vs. 24.4% [28/113]）。D0 后，EB 组小母牛黄体溶解多于 G 组（39.2 [159/406] vs. 20.0% [77/385]）和母牛排卵数多于 G 组（25.5 [14/55] vs. 1.6% [1/64]）。G 组小母牛在 D7（10.3 ± 0.2 vs. 9.2 ± 0.2）和 AI（11.9 ± 0.2 vs. 11.3 ± 0.2）时卵泡（mm）大于 EB 组。母牛在 D7 时 G 阶段的卵泡比 EB 阶段大（11.0 ± 0.3 vs. 9.9 ± 0.3），但在 AI 阶段则不然。小母牛（80.3 [382/476] vs. 69.6% [346/497]）和母牛（67.6 [270/400] vs. 56.2% [227/404]）在 G 阶段的发情率高于 EB 阶段。D0 和 D9 处理对小母牛每 AI 妊娠率 (P/AI) 没有相互作用（EB-0：56.7 [139/245]、EB-G：53.6 [135/252]、G-0：52.6 [127/241] 和 GG：57.5% [135/235]）。然而，EB-G 母牛的 P/AI 高于 EB-0（69.5 [142/204] vs. 60.2% [120/200]），而 G-0 的 P/AI（62.7% [127/203]）与 GG（60.9% [120/197]）相似。在小母牛中，GnRH 在 AI 与发情期没有相互作用，但是，如果在 AI 时接受 GnRH，未出现发情的母牛的 P/AI 会更高（GnRH ¼ 59.1 [91/ 154] vs. 未接受 GnRH ¼ 48.2% [78/162]）。因此，对 Bos indicus 小母牛和母牛使用 EB 或 GnRH 的方案具有不同的卵巢动力学，但总体生育力相似，因此可用于生殖管理计划。在 AI 期间使用 GnRH 治疗在某些情况下可以提高 Bos indicus 奶牛的生育能力，但对小母牛则没有影响。© 2020 Elsevier Inc. 保留所有权利。