只要按照相应制造商的所有相关说明使用,CENTRIFUGE 转子在其他制造商的离心机上运行是完全安全的。由于重量较轻,FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子实际上会减少离心机电机驱动器的磨损。FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子的故障模式与金属转子大不相同。如果发生全面故障和中断,FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子对离心机造成的损害将小于金属转子。但是,大型或高能转子的全面中断仍可能导致离心机损坏和样品损失。请确保遵循本手册以及离心机、瓶子和试管制造商以及样品混合物或试剂供应商提供的其他文件中的说明。每次运行都正确遵循所有操作程序。
只要按照相应制造商的所有相关说明使用,CENTRIFUGE 转子在其他制造商的离心机上运行是完全安全的。由于重量较轻,FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子实际上会减少离心机电机驱动器的磨损。FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子的故障模式与金属转子大不相同。如果发生全面故障和中断,FIBER Lite ® CENTRIFUGE 转子对离心机造成的损害将小于金属转子。但是,大型或高能转子的全面中断仍可能导致离心机损坏和样品丢失。确保遵循本手册以及离心机、瓶子和试管制造商以及样品混合物或试剂供应商提供的其他文件中的说明。每次运行都正确遵循所有操作程序。
为了处理我们的集体UPMC实验室每年收到的2400万实验室测试,我们依靠人们来执行许多关键和复杂任务。他们所做的大部分时间都是手动和征税。在此过程中,我们还可以来回移动数百万资产(例如纸,试管,标本,组织块,载玻片)。这有时是必要的,但效率低下,会减慢我们的周转时间,并且容易出现人为错误。此外,流行后我们不再有劳动力来支持这些手动工作流程。因此,我们需要发挥创造力,在框外思考并改变我们的一些过程。这包括合并(例如集中实验室服务)和利用技术。我们需要尝试自动化更多流程。此外,我们需要将数字病理进一步部署到我们所有的设施。
• 建议戴上手套并使用无核酸酶试管和试剂以避免 RNase 污染。 • 始终保持无菌技术,并使用无菌过滤移液器吸头。 • 所有 EditCo 试剂应根据制造商的建议储存。 • 合成 sgRNA 应溶解在 TE 缓冲液中,并使用无核酸酶水稀释至工作浓度。请参阅 EditCo.com/resources 以查找与溶解和储存合成 sgRNA 相关的最佳实践。 • RNP 可直接在 Nucleofector™ 溶液中形成。 • RNP 复合物在室温下可稳定保存长达 1 小时(可在 4°C 下保存长达一周,或在 -20°C 下保存长达 1 个月)。请注意,在 4°C 下储存的 RNP 可能会在长时间后受到微生物生长的污染。
NEB 部件编号 组件描述 批号 单个 QC 结果 T3062-1 Monarch® 蛋白质分离溶液 10265475 通过 T3061-1 Monarch® HMW gDNA 组织裂解缓冲液 10265472 通过 T3056-1 Monarch® gDNA 洗脱缓冲液 II 10265465 通过 T3018-2 Monarch® RNase A 10265371 通过 T3015-1 Monarch® gDNA 洗涤缓冲液 10265355 通过 T3005-1 Monarch® DNA 捕获珠 (100) 10265326 通过 T3004-1 Monarch® 珠子固定器 10265323 通过 T3003-1 Monarch® 2 ml 试管 (50) 10264542 通过 T3002-1 Monarch® 研杵(50) 10264539 合格 T3001-1 Monarch® 研杵管 (50) 10152756 合格 T2118-1 Monarch® 旋转收集管 10245009 合格 P8200SVIAL 蛋白酶 K,分子生物学级 10262750 合格
NEBNext UltraExpress DNA 文库制备试剂盒包含所需的酶和缓冲液,可将 10-200 ng DNA 快速转化为高质量文库,以便在 Illumina 平台上进行测序。快速、简单的工作流程减少了清理步骤,最大程度地缩短了手动操作时间,并允许在整个输入范围内使用单一接头稀释度和 PCR 循环条件。该方案还允许在单个试管中制备文库,从而最大限度地减少塑料耗材浪费。除了标准方案外,还包含一个附录,其中详细介绍了针对不同 DNA 输入量的定制接头和循环建议,如果需要进一步优化文库产量。
选择性酶的进化。[1b] 最新的评论包含大量有关方法学开发的信息,发表于 2020 年。[1c] 我们对这项激动人心的事业的兴趣可以追溯到 20 世纪 90 年代中期,当时我的团队提出了一种全新的不对称催化方法,即定向进化立体选择性酶作为合成有机化学和生物技术中的催化剂。[1,2] 考虑到手性药物、天然产物、植物保护剂和香料的社会价值,我们认为“试管中的进化”可以与开发用于不对称转化的手性人造合成催化剂相辅相成。如果成功,这将为在温和且环保的条件下进行多种不同的不对称转化提供丰富且取之不尽的新型催化剂来源。
• 个人防护装备:护目镜、实验服;防滑、无孔的封闭式鞋子。 • 70% v/v 乙醇 • 新鲜配制的 0.5-1% 漂白剂溶液。每组学生 1 个烧杯。 • 在营养肉汤(略微浑浊)中纯培养风险组 1 微生物,无菌制备或市售。这可以在带盖的试管或小螺旋盖瓶中。建议使用大肠杆菌 K-12 菌株或藤黄微球菌。 • 1 个无菌营养琼脂平板 • 1 根购买的无菌棉签棒或棉签,在带铝箔盖的烧杯中消毒。 • 本生灯 • 胶带或实验室密封膜(例如 Parafilm ® M) • 远离阳光且温度在室温(22-25°C)和最高 30°C 之间的培养箱或合适的培养区域。 • 纸巾
使用 RNA 和 RNP • 建议戴上手套并使用无核酸酶的试管和试剂,以避免 RNase 污染。 • 始终保持无菌技术,并使用无菌过滤移液器吸头。 • 所有 Synthego 和 Nucleofector™ 试剂均应根据制造商的建议储存。 • 合成的 sgRNA 应溶解在 TE 缓冲液中,并使用无核酸酶的水稀释至工作浓度。请参阅 Synthego 快速入门指南,了解溶解和储存合成 sgRNA 的最佳实践。 • RNP 可直接在 Nucleofector™ 溶液中形成。 • RNP 复合物在室温下可稳定保存长达 1 小时(可在 4°C 下保存长达一周,或在 -20°C 下保存长达 1 个月)。请注意,在 4°C 下储存的 RNP 长时间后可能会受到微生物生长的污染。
