1梅斯,美国农业部ARS,纽约州格林波特,纽约州11944,美国; elizabeth.ramirez@usda.gov(E.R.-M。); ediane.silva@usda.gov(E.S.); elizabeth.vuono@usda.gov(e.v.); ayushi.rai@usda.gov(a.r.); sarah.pruitt@usda.gov(S.P.); nallely.espinoza@usda.gov(N.E。); lauro.velazquez@usda.gov(L.V.-S.)2堪萨斯州立大学解剖学和生理学系,曼哈顿,肯塔基州66506,美国3美国病理学和人口医学系,密西西比州立大学,P.O。Box 6100,Starkville,MS 39762,美国4 Oak Ridge科学与教育研究所(Orise),Oak Ridge,田纳西州田纳西州37830,美国5农业研究服务,美国贝尔茨维尔,美国马里兰州贝尔茨维尔,美国马里兰州20705年; cyril.gay@usda.gov *通信:manuel.borca@usda.gov(m.v.b); douglas.gladue@usda.gov(d.p.g. );电话。 : +631-323-3131(M.V.B. ); +631-323-3035(D.P.G.)Box 6100,Starkville,MS 39762,美国4 Oak Ridge科学与教育研究所(Orise),Oak Ridge,田纳西州田纳西州37830,美国5农业研究服务,美国贝尔茨维尔,美国马里兰州贝尔茨维尔,美国马里兰州20705年; cyril.gay@usda.gov *通信:manuel.borca@usda.gov(m.v.b); douglas.gladue@usda.gov(d.p.g.);电话。: +631-323-3131(M.V.B.); +631-323-3035(D.P.G.)
Abkowitz, JL、Persik, MT、Shelton, GH、Ott, RL、Kiklevich, JV、Catlin, SN 和 Guttorp, P. (1995)。大型动物造血干细胞的行为。美国国家科学院院刊,92 (6),2031–2035。https://doi.org/10.1073/pnas.92.6.2031 Brinkman, EK、Kousholt, AN、Harmsen, T.、Leemans, C.、Chen, T.、Jonkers, J. 和 Van Steensel, B. (2018)。模板引导的 CRISPR/Cas9 编辑的简易量化。核酸研究,46 (10),e58。 https://doi.org/10.1093/nar/gky164 Le, QA, Hirata, M., Nguyen, NT, Takebayashi, K., Wittayarat, M., Sato, Y., Namula, Z., Nii, M., Tanihara, F., & Otoi, T. (2020)。使用不同浓度的 Cas9 蛋白和靶向肌肉生长抑制素 (MSTN) 基因的 gRNA 进行电穿孔处理对猪受精卵发育和基因编辑的影响。动物科学杂志,91 (1),e13386。 https://doi.org/10.1111/asj.13386 Li, R.、Liu, Y.、Pedersen, HS、Kragh, PM 和 Callesen, H. (2013)。猪单性生殖胚胎去除透明带后的发育和质量。Theriogenology,80 (1),58–64。https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2013.03.009 Meurens, F., Summerfield, A., Nauwynck, H., Saif, L., & Gerdts, V. (2012)。猪:人类传染病的模型。微生物学趋势,20 (1),50–57。Nishio, K., Tanihara, F., Nguyen, T.-V., Kunihara, T., Nii, M., Hirata, M., Takemoto, T., & Otoi, T. (2018)。电穿孔过程中电压强度对体外生产的猪胚胎发育和质量的影响。家畜繁殖,53 (2),313–318。https://doi. org/10.1111/rda.13106 Peng, H., Wu, Y., & Zhang, Y. (2012)。通过电穿孔将 DNA 和吗啉代诺西酮有效递送到小鼠植入前胚胎中。PLoS One,7 (8),e43748。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0043748 Peura, TT, & Vajta, G. (2003)。绵羊和牛核移植中现有方法与新方法的比较。克隆干细胞,5 (4),257–277。 https://doi.org/10.1089/153623003772032772 Qin, W., Dion, SL, Kutny, PM, Zhang, Y., Cheng, AW, Jillette, NL, Malhotra, A., Geurts, AM, Chen, Y.-G., & Wang, H. (2015). 通过合子电穿孔核酸酶在小鼠中实现高效的 CRISPR/Cas9 介导基因组编辑。遗传学,200 (2), 423–430。 https://doi.org/10.1534/ Genetics.115.176594 Remy, S., Chenouard, V., Tesson, L., Usal, C., Ménoret, S., Brusselle, L., Hes- lan, J.-M., Nguyen, TH, Bellien, J., Merot, J., De Cian, A., Giovannangeli, C., Concordet, J.-P., &Anegon, I. (2017). 通过使用电穿孔将 CRISPR/Cas9 蛋白和供体 DNA 递送到完整受精卵中来生成基因编辑大鼠。科学报告,7 (1),16554。https://doi.org/10。 1038/s41598-017-16328-y Tanihara, F.、Hirata, M.、Nguyen, NT、Sawamoto, O.、Kikuchi, T.、Doi, M. 和 Otoi, T. (2020)。通过将 CRISPR/Cas9 系统电穿孔到体外受精的受精卵中有效生成 GGTA1 缺陷猪。BMC Biotechnology,20 (1),40。https://doi.org/10.1186/s12896-020-00638-7
山梨醇三油酸酯 聚山梨醇酯 80 氯化钾 磷酸氢二钠二水合物 磷酸二氢钾 注射用水 灰白色乳液。可能会出现灰色乳状液和沉淀。摇晃后乳液均匀。 3.临床信息 3.1 目标物种 猪(用于育肥) 3.2 每种目标物种的使用指征 用于猪的主动免疫,以减少: - 病毒血症、肺和淋巴组织中的病毒载量、猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 感染引起的病毒脱落, - 肺炎支原体感染引起的肺病变严重程度, - 体重增加损失。 免疫开始时间: PCV2:接种后 2 周 猪肺炎支原体:接种后 3 周 免疫持续时间: PCV2:接种后 23 周 猪肺炎支原体:接种后 23 周
这项研究的目的是研究饮食补充芽孢杆菌的影响(B.)淀粉菌对断奶猪的生长性能,腹泻,全身免疫和肠道菌群的实验感染了F18肠毒素大肠杆菌(ETEC)。单独容纳50只断奶猪(7.41±1.35 kg bw),并随机分配给以下五种治疗方法之一:假控制(con-),Sham B. amyloliquefaciens(bam-)(BAM-),受到挑战的控制(con +),受到挑战的B. amyloliquefiquefaciens(B. amyloliquefiquefaciens)(BAM +)(BAM +)和挑战Carbadex(agp)(agp + carbadex)。实验持续了28天,适应7天,第一次ETEC接种后21天。ETEC挑战减少(P <0.05)猪的平均每日增益(ADG)。 与CON +,AGP +增强(p <0.05)ADG相比,而B. amyloliquefaciens的补充趋于(p <0.10),以将猪的ADG从接种后第0天增加到21天(PI)。 ETEC挑战在第7和21 pi上增加了(p <0.05)白细胞(WBC),而BAM +猪在第7天PI的WBC趋于较低(p <0.10),并且与CON +相比,在第21天PI的WBC较低(P <0.05)WBC。 与AGP +粪便菌群相比,BAM +在第0天的Lachnospileaceae的相对丰度较低(P <0.05),在第21 pie PI和梭状芽孢杆菌科的相对丰度较低(P <0.05),但较高(p <0.05)的相对丰度在0。ETEC挑战减少(P <0.05)猪的平均每日增益(ADG)。与CON +,AGP +增强(p <0.05)ADG相比,而B. amyloliquefaciens的补充趋于(p <0.10),以将猪的ADG从接种后第0天增加到21天(PI)。ETEC挑战在第7和21 pi上增加了(p <0.05)白细胞(WBC),而BAM +猪在第7天PI的WBC趋于较低(p <0.10),并且与CON +相比,在第21天PI的WBC较低(P <0.05)WBC。与AGP +粪便菌群相比,BAM +在第0天的Lachnospileaceae的相对丰度较低(P <0.05),在第21 pie PI和梭状芽孢杆菌科的相对丰度较低(P <0.05),但较高(p <0.05)的相对丰度在0。在回肠摘要中,BAM +中的香农指数高于AGP +中的div>。bray-curtis pcoa在第21 pi pi中从假猪与ETEC感染的猪收集的卵植物中显示了细菌群落组成的不同。但是,用BAM +中的猪的富度(p <0.05)的相对丰度更大,但在卵形 +猪中,放线菌和杆菌的相对丰度(p <0.05)的相对丰度低于AGP +中的猪。iLeal Digesta具有比BAM +中的Pig较高(p <0.05)的塞梭菌strictu stricto 1,但比猪更低(p <0.05)。总而言之,补充淀粉芽孢杆菌倾向于增加ADG,并且对ETEC感染的猪腹泻的影响有限。
背景:异种抗原是种间异种移植成功的主要问题。GGTA1 编码 α 1,3-半乳糖基转移酶,该酶对半乳糖基-α 1,3-半乳糖的生物合成至关重要,而半乳糖是导致超急性排斥的主要异种抗原。因此,GGTA1 修饰猪是猪对人异种移植的有希望的供体。在本研究中,我们开发了一种通过电穿孔将 CRISPR/Cas9 系统引入体外受精猪受精卵以生成 GGTA1 修饰猪的方法。结果:我们设计了五种针对 GGTA1 中不同位点的向导 RNA (gRNA)。通过电穿孔将 Cas9 蛋白与每一种 gRNA 一起引入后,评估了受精卵发育成的囊胚中的基因编辑效率。使用基因编辑效率最高的 gRNA 生成 GGTA1 编辑猪。在用 Cas9/gRNA 复合物转移电穿孔受精卵后,两头受体母猪产下六头仔猪。深度测序分析显示,六头仔猪中有五头在 GGTA1 的目标区域携带双等位基因突变,没有脱靶事件。此外,用异凝集素 B4 染色证实了 GGTA1 双等位基因突变猪的 GGTA1 功能缺陷。
背景:日本脑炎病毒(JEV)是一种蚊子 - 裔人的人畜共患病毒病毒,是亚洲太平洋地区小儿脑炎的主要原因。传输周期主要涉及Culex spp。蚊子和Ardeid鸟类,家养猪(Sus scrofa housea)是从自然流行传播周期进入人口的JEV溢出的传染病来源。尽管许多研究得出的结论是,家猪在JEV的传播周期和人类感染中起着重要作用,但野猪在JEV传播中的作用尚不清楚。由于国内和野性猪是同一物种,并且由于在美国的野猪种群在地理上增加和扩展,因此目前的研究旨在检验以下假设:如果将JEV引入美国,则野猪可能在传输周期中起作用。材料和方法:表现出野性表型的Sinclair微型猪被JEV基因型IB内接种。这些猪是从与四个野猪菌株的交叉杂交家用猪中得出的,并且由于无法获得野猪而被使用。结果:Sinclair微型猪开始了病毒,并显示出与家养猪相似的病理结局。结论:基于这些发现,我们得出结论,如果将JEV引入美国,野猪种群可能有助于建立和维持JEV的传播周期,并可能导致该病毒在美国流行。
•牛ch 4 - 0.15(Difford等,2018)•猪进料转化率 - 0.20(Aliakbari等,2022)•猪后脂肪–0.40(He等2022)•羔羊活重 - 0.33(Hess等,2023)
尽管经过多年研究,爆炸引起的冲击波与头部相互作用是否会对人脑造成损伤仍是未知数。填补这一空白的一种方法是使用动物模型建立“缩放定律”,将观察到的动物脑损伤投射到人类身上。这需要实验室实验和动物头部的高精度数学模型,以建立实验观察到的爆炸引起的脑损伤与模型预测的生物力学反应之间的相关性。为此,我们对哥廷根小型猪进行了实验室实验,以开发和验证小型猪头部的三维 (3-D) 高精度有限元 (FE) 模型。首先,我们对哥廷根小型猪进行了实验室实验,以获得脑血管网络的几何形状,并表征脑组织和血管材料在爆炸暴露典型的高应变率下的响应特性。接下来,我们利用详细的脑血管信息以及物种特异性脑组织和血管材料特性,开发了小型猪头部的 3-D 高精度 FE 模型。然后,为了验证模型预测结果,我们进行了实验室冲击波管实验,即将哥廷根小型猪置于实验室冲击波管中 210 kPa 的爆炸过压下,并比较两个位置的脑压。我们观察到模型预测的压力与实验测量值之间有很好的一致性,最大压力的差异小于 6%。最后,为了评估脑血管网络对生物力学预测的影响,我们进行了模拟,比较了有和没有血管的 FE 模型的结果。如预期的那样,加入血管可以减轻脑部压力,但不会影响脑压的预测。然而,我们观察到,在模型中加入脑血管后,血管与脑组织界面附近区域的应变分布发生了高达 100% 的变化,这表明血管不仅会降低应变,还会导致剧烈的重新分布。这项工作将有助于建立观察到的脑损伤与预测的生物力学反应之间的相关性
摘要 菌毛介导的初始粘附是产肠毒素大肠杆菌 (ETEC) 感染所需的初始和关键步骤。因此,已经开发出针对这些菌毛并诱导特异性抗菌毛抗体以阻断 ETEC 初始粘附的候选疫苗。虽然这种疫苗可以有效预防 ETEC 相关的断奶后腹泻 (PWD),但由于这些抗原之间的免疫异质性,开发一种广泛有效的针对 ETEC 初始粘附的疫苗仍然是一个具有挑战性的问题。在这里,我们应用多表位融合抗原 (MEFA) 技术构建了 FaeG–FedF–FanC–FasA–Fim41a MEFA,使用主要菌毛 K88 和 F18 的粘附亚基作为骨架,它还整合了来自稀有菌毛 K99、987P 和 F41 的粘附亚基的表位;然后我们生成了一个 MEFA 计算模型并在免疫小鼠中测试了这种 MEFA 蛋白的免疫原性。接下来我们通过体外评估其抗菌毛、抗体导向的细菌粘附抑制作用,评估了针对菌毛的 MEFA 作为疫苗候选物有效预防 PWD 的潜力。计算模型表明,所有相关表位都暴露在 MEFA 表面,并且用 MEFA 蛋白皮下免疫的小鼠产生了针对所有五种菌毛的 IgG 抗体。此外,MEFA 蛋白诱导的抗菌毛抗体显著抑制了 K88 + 、F18 + 、K99 + 、987P + 和 F41 + ETEC 菌株对猪小肠 IPEC-1 和 IPEC-J2 细胞系的粘附。综合起来,这些结果表明 FaeG–FedF–FanC–FasA–Fim41a MEFA 蛋白诱导了针对五种目标菌毛的特异性抗菌毛中和抗体。至关重要的是,这些结果显示了菌毛靶向 MEFA 的潜力,并表明它们有望成为一种广泛有效的 PWD 疫苗。关键词:ETEC、PWD、菌毛、MEFA、疫苗
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此预印本版的版权持有人于2024年8月1日发布。 https://doi.org/10.1101/2024.08.01.606235 doi:biorxiv preprint