腹部超声检查未发现器官肿大。颈部-胸部-腹部计算机断层扫描 (CT) 未发现淋巴结肿大或恶性肿瘤证据。骨髓活检无法诊断,也没有发育不良的迹象。由于 2 个月后仍持续发烧、出汗和双血细胞减少,因此进行了骨髓穿刺活检和流式细胞术检查,以鉴别诊断感染事件,包括结核分枝杆菌和急性白血病。在骨髓穿刺中观察到高达 36% 的细胞,这些细胞具有稀少的细胞质、大而均匀的细胞核和原始形态。此外,流式细胞术和骨髓活检结果与 AML 相符。
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对于表观遗传汇集筛选,对具有强力霉素诱导的 Cas9 等位基因 (KH2/iCas9;杰克逊实验室,库存编号 029415) 的 8 至 12 周龄小鼠实施安乐死,并对总共 100 万个 Lin – Sca-1 + c-Kit + (LSK) 细胞进行分选并用含有表观遗传 sgRNA 文库的慢病毒进行体外转导 (补充表 1) 14,然后移植到 B6/129 受体小鼠中 (有关更多详细信息,请参阅补充材料)。简而言之,LSK 细胞在 96 孔圆底微孔板中培养,培养基为 StemSpan 无血清扩增培养基(StemCell Technologies),其中添加了 100 ng/mL 重组鼠干细胞因子 (rmSCF)、10 ng/mL rm 白细胞介素-11 (IL-11) 和 5 ng/mL rmFlt3l (R&D Systems),并以低感染复数共转导,慢病毒表达 Tet2 sgRNA (Tet2_e10.1;完整序列见补充表 1) 和表观遗传 sgRNA 文库,以实现 ~50% 的感染效率。24 小时后,将培养的细胞汇集、洗涤
SELLAS Life Sciences 宣布其在急性髓系白血病中的关键性 3 期 GPS REGAL 试验的中期分析结果为阳性
摘要 个性化医疗对于急性髓系白血病 (AML) 患者来说是一个挑战。在几项 AML 试验中发现了几种基因突变,这促成了一种个性化预后评分算法的创建,即知识库 (KB)。在本研究中,我们评估了该算法对 167 名真实 AML 患者队列的预后价值。我们将 KB 预测的结果与真实结果进行了比较。对于 60 岁以下的患者,有利和中等 ELN 风险类别的 OS 相似。然而,KB 算法无法预测不利 ELN 风险类别中的年轻患者的 OS 以及有利 ELN 风险类别中 60 岁以上患者的 OS。这些差异可以通过几种新的治疗选择的出现以及异基因干细胞移植 (aHSCT) 结果和支持性护理的改善来解释。个性化医疗是一项重大挑战,预测模型是预测患者结果的有力工具。然而,在 AML 领域增加新的治疗选择需要对这些评分系统进行前瞻性验证,以包括最近的治疗创新。
图 1 吖啶黄 (ACF) 对 K562 细胞生长和存活的影响。A,用不同浓度的 ACF 或未用 ACF (PBS) 处理 K562 细胞 72 小时。通过 MTT 和台盼蓝染料排斥试验确定细胞活力(数据以三次独立实验的平均值 ± SD 表示)。标明了 IC 50 值。B,用不同浓度的原黄素处理细胞,通过 MTT 试验确定活细胞百分比(数据以三次独立实验的平均值 ± SD 表示)。显示了原黄素和台盼蓝的化学结构。C,用未用 ACF (PBS) 或用浓度增加的 ACF 培养 72 小时的细胞用 AnnexinV 和 APC 染色,通过流式细胞术确定凋亡细胞百分比。显示了一个代表性实验(左图)。数据以三次独立实验的平均值 ± SD 表示。使用双向方差分析和 Holm-Sidak 多重比较检验来检验 ACF 处理对细胞凋亡的重要性 (* P < 0.05; *** P < 0.0001)。D,使用所示抗体 (n = 3) 通过蛋白质印迹法分析培养 48 小时或 72 小时且 ACF 浓度不断增加的 K562 细胞的蛋白质提取物。肌动蛋白作为上样对照
NRAS 和 KRAS 激活点突变存在于 10 – 30% 的髓系恶性肿瘤中,并且通常与增殖表型相关。RAS 突变具有等位基因特异性结构和生化特性,具体取决于热点突变,从而导致不同的生物学后果。鉴于它们在大多数髓系恶性肿瘤中的亚克隆性质,它们的克隆结构以及与其他驱动基因改变的协同模式可能会对髓系恶性肿瘤的预后和治疗产生直接的因果影响。总体而言,RAS 突变往往与慢性和急性髓系恶性肿瘤的不良临床结果有关。最近的几种预后评分系统已纳入 RAS 突变状态。虽然 RAS 突变并不总是作为独立的预后因素,但它们会显著影响疾病进展和生存。然而,它们的临床意义取决于突变类型、疾病背景和所采用的治疗方法。最近的证据还表明,RAS 突变会导致对靶向治疗产生耐药性,尤其是 FLT3、IDH1/2 或 JAK2 抑制剂以及维奈克拉-阿扎胞苷组合。研究针对 RAS 通路内多个轴(包括上游和下游成分)的新型治疗策略和组合是一个活跃的研究领域。直接 RAS 抑制剂在实体瘤患者中的成功应用,让人们重新燃起希望,相信这一进展将转化为血液系统恶性肿瘤患者的治疗。在这篇综述中,我们重点介绍了过去十年间骨髓恶性肿瘤中 RAS 突变的关键见解,包括其流行率和分布、协同遗传事件、克隆结构和动态、预后意义和治疗靶向性。
摘要:急性髓系白血病 (AML) 是一种克隆性疾病,其特征是髓系原始细胞 (母细胞) 的基因畸变,导致其成熟/功能缺陷以及在受影响个体的骨髓 (BM) 和血液中增殖。目前的强化化疗方案可使 50% 至 80% 的 AML 患者完全缓解,具体取决于他们的年龄和所涉及的 AML 类型。虽然钙信号传导的改变已在实体肿瘤中得到广泛研究,但对于钙在大多数血液系统恶性肿瘤(包括 AML)中的作用知之甚少。我们发表本综述的目的是提高人们对这一问题的认识并介绍 (i) 钙信号在 AML 细胞增殖和分化以及造血干细胞静止中的作用;(ii) 线粒体、代谢和氧化应激之间的相互作用;(iii) BM 微环境对 AML 细胞命运的影响;最后 (iv) 化疗治疗改变 AML 细胞中钙稳态的机制。
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