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提高国产基因组编辑工具“锌指-ND1”的功能性......
修改目标 DNA 的基因组编辑工具是基因和细胞治疗的有力工具。目前主要的基因组编辑工具是CRISPR-Cas，应用最为广泛；其次是TALEN；最后是ZFN，应用最少。其中CRISPR-Cas和TALEN的基本专利将持续到2030年甚至更晚，因此在医疗领域使用需要高额的授权费用。另一方面，ZFN的基本专利已于2020年到期，它是一种可免许可使用的基因组编辑工具。通过将识别DNA的Zinc Finger与切割DNA的FirmCutND1 Nuclease（由广岛大学自主开发）相结合，可以制作出名为“Zinc Finger-ND1”的纯国产基因组编辑工具。然而，构建功能性ZFN并提高其基因组编辑效率极具挑战性。 [研究成果总结] 传统上，创建ZFN的主流方法是从随机重排的ZF中筛选与目标DNA结合的ZF。然而，创建功能性 ZFN 大约需要两个月的时间，这需要大量的时间和精力。另外，人们设计了一种称为“模块化组装”的方法，用于将 ZF 在基因上连接起来，但在制作三指 ZFN（三个 ZF 连接在一起）时，获得功能性 ZFN 的概率约为 5%，由于生产效率低，该方法无法使用。我们假设，手指数量少导致可识别的碱基数量减少，从而导致产生功能性 ZFN 的效率降低。因此，在本研究中，我们采用模块化组装的方式构建了一个6指ZF-ND1（图1），以增加其识别的碱基数量。结果，我们构建的10个ZF-ND1中，有两个被证实具有基因组DNA切割活性，这意味着我们以20%的概率成功获得了功能性ZFN。为了进一步完善ZF-ND1的功能，我们使用结构建模技术（AlphaFold、Rossetta和Coot的分子建模）来模拟ZF和DNA之间的相互作用（图2）。通过与 Zif268（一种与 DNA 结合的天然 3 指 ZF）的 DNA 相互作用模型进行比较，确定了五种候选突变。此外，通过比较与 Zif268 的 DNA 糖磷酸骨架结合的氨基酸，确定了四个突变候选者。当将这九个候选突变逐一引入功能性 ZF-ND1 时，发现其中三个突变（图 3）可提高基因组 DNA 切割活性。 V109K突变使裂解活性提高了5%，并且我们成功在结构建模的基础上增强了ZF-ND1的功能。
分析和预测饱和砂中地铁屏蔽隧道的长期沉降
通常10〜20mm，沿隧道的沉降相对稳定。但是，东部部分的沉降相对较大，其中大多数高于30mm，并且有沉降凹陷。理性分析：沿线西部的地面上有大量建筑设施，这会在隧道所在的层上造成额外的压力，巩固和压缩土壤层。更重要的是，额外的压力的存在等同于埋葬深度的增加，使位置层具有更高的外壳。东部沿线的地面主要位于宽敞的地区，并且没有密集的地面建筑物（例如，沿着东北沿线的地面是一个果园），周围的
模块化紧凑型高输出混合动力技术研究
考虑到动力协调控制系统的耐久性能最为重要，需要进行充分的分析和评估，并设定有余量的性能目标值。此外，关于设定燃油效率的目标，除了目前用于评估的一般驾驶模式之外，还希望创建和评估适合车辆实际方面的驾驶模式。
关于金属3D打印机质量的研究（第三次报告）
Akihiro Terasawa，Daisuke Suzuki，Yoshihito Hagihara，Akira Yoneyama，Chiaki Sakamoto，
供应链高膨胀柱填料 | 汉高
高膨胀支柱填料可减少包装体积并大幅减少运输过程中的二氧化碳排放量。汉高的高膨胀支柱填料在未固化状态下高效地包装在托盘桶中，使用后膨胀率超过 500%，通过减少补给汽车生产厂所需的往返次数，可大幅减少运输过程中的二氧化碳排放量。它还可减少运输人工费用、设备成本和一次性包装浪费。在装配线上，机器人应用可将挡板的手动定位人工减少多达 15%。* 与尼龙挡板相比，可泵送支柱填料的固化重量也可提供汽车轻量化优势。相比之下，注塑尼龙挡板在一次性包装中以 100% 的成品形式运输，最终运往垃圾填埋场。除了节约环境成本外，使用可泵送支柱填料还有显著的好处，包括减少补给行程、降低运输燃料消耗和增加每辆卡车的产量。*基于可泵送支柱填料替代尼龙挡板的总百分比、汽车生产线和劳动力分配。
国立台东高级中学112 学年度第2 学期期末考高一生物(全) 试卷
(A)神创说（自然神学论、创造论）认为物种皆适应于其生存环境，不随时间而改变各性状之特征(B)林奈认为物种皆由演化而来，其分类系统中，他并非神学论或创造论的支持者(C)拉马克认为亲代及其后代持续锻炼某一器官，此器官会发生适应性的改变(D)居维业提出灾变说，认为地球经历数次大灭绝，每次大灭绝都有新的生物被创造出来(E)达尔文发现雀鸟物种在加拉巴哥群岛与同纬度海岛不同，与环境有关而与演化无关。 ACE
开发具有优良保健功能的高油酸油菜籽
图 1 植物中脂肪酸和三酰甘油合成途径的示意图。虚线显示三酰甘油合成中脂肪酸的流动。ACC，乙酰辅酶 A 羧化酶；ACP，酰基载体蛋白；CoA，辅酶 A；DGAT，二酰甘油酰基转移酶；FAB2，脂肪酸生物合成 2；FAD2，脂肪酸去饱和酶 2；FAD3，脂肪酸去饱和酶 3；FAE1，脂肪酸延长酶 1；FATA，脂肪酰基-ACP 硫酯酶 A；FATB，脂肪酰基-ACP 硫酯酶 B；KAS，β-酮酰基-酰基载体蛋白合酶；LMAT，丙二酰辅酶 A/ACP；PC，磷脂酰胆碱； PDCT，磷脂酰胆碱：二酰甘油胆碱磷酸转移酶。
高机能アルギン酸分解酵素の発见と...
作为先前的研究，在2003年，MC5E试图在大肠杆菌和酵母菌中产生棕色藻类，但无法检查其活性，因为两者都被表示为不溶性蛋白质11）。但是，在棕色藻类MC5E的功能分析的分析中没有进步。同时，自2000年代以来，已经开发了一种新的藻酸的用途。由于大多数应用都需要特定的藻酸序列，因此预计将持续的藻酸供应，其序列适合其预期用途。为此，它已成为建立“ TALER制造藻酸盐”技术的一种期待已久的方法，该技术使用MC5E人为地控制藻酸盐的序列。作者开始通过RT-PCR从Macomb孢子体中编码多个MC5E候选蛋白的克隆cDNA，并试图为名为SJC5-VI的蛋白质构建异源细胞表达系统，该蛋白估计具有最高的表达水平。 12）使用大肠杆菌和酵母进行细胞内表达，但不可能作为可溶性蛋白获得。接下来，当我们试图将其表达为分泌的蛋白质时，我们发现，尽管枯草芽孢杆菌和酵母根本没有分泌细胞外的靶蛋白，但使用昆虫细胞时发现它是很好的分泌，并且使用该表达系统产生了重组SJC5-VI，并检查了其功能及其功能。当主要由M组成的聚合物增加了Ca 2+产生的底物凝胶量，这表明G的比率增加了。此外，1 H-NMR分析表明，具有连续M（-mmmmmm-）的序列被转换为交替的M和G（-gmgmg-）的序列。该表达系统对于其他棕色藻类中的MC5E也有效，并且还可以研究COC5-1的酶活性，COC5-1是Okinawa Mozuku的MC5E的候选蛋白。 13）COC5-1的表达模式与SJC5-VI不同，发现G主要产生五个连续序列的平均序列。有趣的是，SJC5-VI和COC5-1的热稳定性存在显着差异，而前者在50°C下治疗后完全停用了30分钟，而后者即使在相同条件下处理后仍保持活跃。尽管作者只进行了两项研究，以研究温度对棕色藻类中MC5E的影响，但MC5E的热稳定性在棕色藻类之间似乎有所不同，棕色藻类的温度适合性不同。所使用的酶的稳定性也是人为控制藻酸盐序列的重要因素，因此，生活在温暖环境中的南部棕色藻类可能是酶的吸引人。
Konezumi，Dajin，帮助创建高质量基因组编辑的小鼠...
Kuno，A.，Ikeda，Y.，Ayabe，S.，Kato，K.，Sakamoto，K.，M.，M.，A. div>dajin使多重基因分型同时验证预期和意外的目标基因组编辑结果。 div>PLOS Biology，20（1），E3001507。 div>
一种新型的GIS-SWMM-ABM方法，用于数据砂城市排水系统中的洪水风险评估
摘要：城市化和气候变化对雨水管理构成了关键的挑战，尤其是在迅速发展的城市中。这些城市经历了越来越不透水的表面和更激烈的降雨事件。这项研究调查了巴基斯坦拉合尔现有排水系统的有效性，这是受到快速城市化和气候变化影响的大型挑战。解决缺乏预定义的风暴模式和有限的历史降雨记录，我们采用了公认但适应能力的方法。此方法利用Log-Pearson III型（LPT-III）分布和交替的块方法（ABM）在各个返回期间创建设计射击图。本研究将雨水管理模型（SWMM）应用于2.71公里2的代表社区，以评估其排水系统的容量。此外，将地理信息系统（GISS）用于洪水风险映射的空间分析，以识别容易发生区域。结果表明，为期2年的回报期设计的当前排水系统不足。例如，一场2年的风暴产生的总洪水量为070万加仑，淹没了研究区域约60％。这项研究确定了洪水风险区，并强调了系统在处理未来，更激烈的降雨事件中的局限性。这项研究强调了迫切需要改进基础设施，以处理增加径流量的增加，例如低影响力开发实践的整合。这些基于自然的解决方案可以增强渗透，减少径流并改善水质，从而提供可持续的方法来减轻洪水风险。重要的是，这项研究表明，整合LPT-III和ABM为洪水风险评估提供了强大而适应性的方法。这种方法在数据稀缺和多样化的降雨模式可能阻碍传统风暴建模技术的发展中国家中特别有效。我们的发现表明，当前的排水系统不堪重负，一场2年的风暴超过了其容量，导致洪水泛滥，影响了该地区一半以上。LPT-III和ABM的应用，通过为数据划分区域创建更现实的设计射击图，从而改善了洪水风险评估，从而更准确地识别了容易洪水的区域。