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作为先前的研究，在2003年，MC5E试图在大肠杆菌和酵母菌中产生棕色藻类，但无法检查其活性，因为两者都被表示为不溶性蛋白质11）。但是，在棕色藻类MC5E的功能分析的分析中没有进步。同时，自2000年代以来，已经开发了一种新的藻酸的用途。由于大多数应用都需要特定的藻酸序列，因此预计将持续的藻酸供应，其序列适合其预期用途。为此，它已成为建立“ TALER制造藻酸盐”技术的一种期待已久的方法，该技术使用MC5E人为地控制藻酸盐的序列。作者开始通过RT-PCR从Macomb孢子体中编码多个MC5E候选蛋白的克隆cDNA，并试图为名为SJC5-VI的蛋白质构建异源细胞表达系统，该蛋白估计具有最高的表达水平。 12）使用大肠杆菌和酵母进行细胞内表达，但不可能作为可溶性蛋白获得。接下来，当我们试图将其表达为分泌的蛋白质时，我们发现，尽管枯草芽孢杆菌和酵母根本没有分泌细胞外的靶蛋白，但使用昆虫细胞时发现它是很好的分泌，并且使用该表达系统产生了重组SJC5-VI，并检查了其功能及其功能。当主要由M组成的聚合物增加了Ca 2+产生的底物凝胶量，这表明G的比率增加了。此外，1 H-NMR分析表明，具有连续M（-mmmmmm-）的序列被转换为交替的M和G（-gmgmg-）的序列。该表达系统对于其他棕色藻类中的MC5E也有效，并且还可以研究COC5-1的酶活性，COC5-1是Okinawa Mozuku的MC5E的候选蛋白。 13）COC5-1的表达模式与SJC5-VI不同，发现G主要产生五个连续序列的平均序列。有趣的是，SJC5-VI和COC5-1的热稳定性存在显着差异，而前者在50°C下治疗后完全停用了30分钟，而后者即使在相同条件下处理后仍保持活跃。尽管作者只进行了两项研究，以研究温度对棕色藻类中MC5E的影响，但MC5E的热稳定性在棕色藻类之间似乎有所不同，棕色藻类的温度适合性不同。所使用的酶的稳定性也是人为控制藻酸盐序列的重要因素，因此，生活在温暖环境中的南部棕色藻类可能是酶的吸引人。
高机能アルギン酸分解酵素の発见と...
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