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真菌鉴定是真菌研究的基础,但传统的分子方法难以在现场快速准确地鉴定,特别是对于近缘物种。为了解决这一挑战,我们引入了一种通用的鉴定方法,称为全基因组分析(AGE)。AGE 包括两个关键步骤:生物信息学分析和实验实践。生物信息学分析在真菌物种基因组内筛选候选靶标序列,称为 Targets,并通过将它们与其他物种的基因组进行比较来确定特定 Targets。然后,使用测序或非测序技术的实验实践将验证生物信息学分析的结果。因此,AGE 为子囊菌门和担子菌门中的 13 个真菌物种中的每一个获得了超过 1,000,000 个合格 Targets。接下来,测序和基因组编辑系统验证了特定 Targets 的超特异性性能;尤其值得注意的是首次展示了来自未注释基因组区域序列的鉴定潜力。此外,通过结合快速等温扩增和硫代磷酸酯修饰引物以及无需仪器的可视化荧光方法,AGE 可以在 30 分钟内通过单管测试实现定性物种鉴定。更重要的是,AGE 在识别近缘物种和区分中药及其掺假物方面具有巨大潜力,尤其是在精确检测污染物方面。总之,AGE 为基于全基因组的真菌物种鉴定的发展打开了大门,同时也为其在植物和动物界的应用提供了指导。

全基因组分析有助于快速准确地鉴定真菌种类

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