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抽象的舌头拭子(TS)采样与定量PCR(QPCR)结合检测结核分枝杆菌(MTB)DNA是痰液测试结核病(TB)诊断的有希望的替代方法。在先前的研究中,擦拭舌头的敏感性通常低于痰液。在这项研究中,我们评估了两种提高灵敏度的策略。一方面,用于从2 ml悬浮液中浓缩舌头细菌,这些悬浮液从高容量的泡沫拭子样品中洗脱。将沉淀重悬于500 µL悬浮液中,然后在双目标qPCR之前机械裂解以检测MTB插入元件为6110,为1081。分级实验表明,可沉积分数中存在临床拭子样品中的大多数MTB DNA信号(99.22%±1.46%)。当适用于从124个具有推定性结核病的南非人收集的存档泡沫拭子时,该策略表现出83%的敏感性(71/86)和100%特异性(38/38),相对于痰液微生物学参考标准(MRS; Sputum; Sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum; sputum》;第二种策略使用了序列特异性磁捕获(SSMAC)来浓缩从MTB细胞释放的DNA。该方案是在存档的Copan floqswabs蜂拥而至的木材样品上进行了评估,这些拭子样品是从128个具有推定性结核病的南非参与者中收集的。将洗脱为500 µL缓冲液的材料机械裂解。通过蛋白酶K消化悬浮液,与生物素化的双靶寡核苷酸探针杂交,然后使用磁分离浓缩约20倍。在对浓缩物的双目标qPCR测试后,该策略相对于痰液MRS表现出90%的敏感性(83/92)和97%的特异性(35/36)。这些结果指向了用于检测TS中MTB DNA的可自动性高敏性方法的道路。

高敏性检测舌头样品中结核分枝杆菌DNA

高敏性检测舌头样品中结核分枝杆菌DNAPDF文件第1页

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