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靶向眼镜蛇毒素细胞毒素:基于40-mer ssDNA的线性ssDNA抗毒剂赋予了针对眼镜蛇毒液诱导的细胞毒性的中和电位
靶向眼镜蛇毒素细胞毒素:基于40-mer ssDNA aptamer的线性抗蛇毒剂赋予了针对眼镜蛇毒液诱导的细胞毒性吸收毒素(CTX)的中和潜力,这是对毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性毒性的主要COBRA成分之一。然而,当前基于抗体的抗体对CTX诱导的皮肤症的中和作用有限。这项研究的重点是发现基于适体的抗蛇毒抗性,该抗蛇毒特异性地针对CTX,使用基于重复的离心型通过指数富集(SELEX)选择方法和Illumina Amplicon下一代测序对配体的系统演变。总共进行了12个基于重复的基于离心的选择回合,包括第7轮和8轮之间的负选择。接下来是Amplicon下一代测序和测序生物信息学工作流程,以分析CTX结合候选者的丰度和持久性。 log10读数计数为2-3的序列为3-4的圆形表示为最终候选者。发现了线性和单链DNA 40T,它表现出高结合亲和力和对CTX的特异性,其离解常数(KD)为0.33-0.41 µm,如直接和竞争性酶链接的APTAMER APTAMER ASSAY(ELAA)所证明。 40T在功能表位上获得了与CTX结合的“三明治”配置。它表现出对CTX诱导的细胞毒性的中和效力,EC50为0.47 µm。到Mimi
来源:Arácnido细胞毒素(CTX)是由于其细胞毒性而导致皮肤成分的主要眼镜蛇成分之一。然而,当前基于抗体的抗体对CTX诱导的皮肤症的中和作用有限。这项研究的重点是发现基于适体的抗蛇毒抗性,该抗蛇毒特异性地针对CTX,使用基于重复的离心型通过指数富集(SELEX)选择方法和Illumina Amplicon下一代测序对配体的系统演变。总共进行了12个基于重复的基于离心的选择回合,包括第7轮和8轮之间的负选择。接下来是Amplicon下一代测序和测序生物信息学工作流程,以分析CTX结合候选者的丰度和持久性。 log10读数计数为2-3的序列为3-4的圆形表示为最终候选者。发现了线性和单链DNA 40T,它表现出高结合亲和力和对CTX的特异性,其离解常数(KD)为0.33-0.41 µm,如直接和竞争性酶链接的APTAMER APTAMER ASSAY(ELAA)所证明。 40T在功能表位上获得了与CTX结合的“三明治”配置。它表现出对CTX诱导的细胞毒性的中和效力,EC50为0.47 µm。为了模仿实际的毒化情况,使用Naja putatrix,Naja siamensis和Naja Sumatrana的毒液诱导实验性的模型,用于使用40T治疗。 40T在低微摩尔比下对这些毒液表现出显着的细胞活力恢复效应。这些发现提出了修改的选择和测序工作流程,以发现40T作为适体抗蛇毒的潜力来减轻毒液诱导的皮肤分析。
10 k d 50 naja putatrix naja siamensis, naja sumatrana Arch Toxicol (2025)。 https://doi.org/10.1007/s00204-025-04211-z https://doi.org/10.1007/s00204-025-04211-z