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新型的交联剂简化活细胞中的蛋白质复合物分析
蛋白质通过构象变化和相互作用在细胞中具有特定的生物学功能。因此,精确的原位分析蛋白质复合物变化对于理解细胞功能,揭示疾病机制并识别潜在的药物靶标至关重要。
来源:英国物理学家网首页蛋白质通过构象变化和相互作用在细胞中具有特定的生物学功能。因此,精确的原位分析蛋白质复合物变化对于理解细胞功能,揭示疾病机制并识别潜在的药物靶标至关重要。
体内交联质谱法(XL-MS)已成为研究活细胞中蛋白质复合物的强大技术。然而,在富集交联肽的过程中,复杂的步骤会导致相当大的样本损失,这限制了有限样品的分析,并阻碍了定量分析中的可重复性。
质谱在一项由Angewandte Chemie International Edition发表的研究中,由中国科学院达利安化学物理学研究所(DICP)的Zhang Lihua教授领导,开发了一个新型的基于二甲基吡啶胺的交叉链接,可实现蛋白质复合物的一步和定量分析。
定量分析使用二甲基哌啶作为富集手柄,研究人员设计了一个交联的2,6-二甲基二甲基二酰胺二酰胺二酰亚胺三甲苯二烷酸酯(DPST)。 DPST表现出细胞膜的通透性,富集能力和定量功能。
通过利用串联质量标签抗体,DPST实现了一步富集和可逆的交联肽的可逆洗脱,从而消除了传统多步骤过程中的样本损失。这允许在体内XL-MS分析使用少于10,000个细胞。
蜂窝级 生物医学研究 更多信息: doi:10.1002/anie.202501845期刊信息:Angewandte Chemie International Edition
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