分析化学中的校准曲线:原理、程序和应用

校准曲线是分析化学、生物化学和药物分析中必不可少的工具。它们有助于了解对分析物的仪器响应并准确预测未知样品的浓度。这...分析化学中的后校准曲线:原理、程序和应用首先出现在《科学笔记》上。

来源:科学笔记

校准曲线是分析化学、生物化学和药物分析中必不可少的工具。它们有助于了解对分析物的仪器响应并准确预测未知样品的浓度。本文提供了详细且适合学生的校准曲线指南,包括原理、准备、绘图和应用。

什么是校准曲线?

校准曲线是将仪器信号(响应)与标准分析物的已知浓度联系起来的图表。通过测量几种标准溶液,建立一种关系,然后可用于确定未知样品的浓度。

制备不同浓度的标准溶液,覆盖未知样品的预期范围。

重复测量可以计算误差线,帮助估计实验变异性。

通常,响应是线性的,但如果函数已知,也可以使用非线性函数。

校准曲线原理

矩阵注意事项:理想情况下,标准样品应在与未知样品相同的矩阵中运行。基质包括除分析物之外的所有成分,例如盐、蛋白质或溶剂。当无法精确匹配时,可以使用近似矩阵(例如人造尿液或人造脑脊液)。

线性:许多校准曲线遵循线性方程:

y = mx + b

m:斜率(测量的灵敏度)

b: y 轴截距

线性回归提供 R² 值,指示数据与直线的拟合程度(R² > 0.95 是理想的)。

线性范围和灵敏度:斜率代表灵敏度。陡峭的斜率表明仪器对浓度的微小变化反应强烈。线性范围是仪器给出可靠线性响应的范围。超出此范围,响应可能会趋于稳定。

限制:

程序:准备校准曲线

1. 使用连续稀释制定标准品

2. 测量仪器响应