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琼脂糖凝胶电泳：原理、程序和应用
琼脂糖凝胶电泳是分子生物学中用于根据大小分离 DNA 片段的基本实验室技术。它广泛应用于遗传研究、诊断、克隆和 DNA...后琼脂糖凝胶电泳：原理、程序和应用首先出现在《科学笔记》上。
来源:科学笔记琼脂糖凝胶电泳是分子生物学中用于根据大小分离 DNA 片段的基本实验室技术。它广泛应用于基因研究、诊断、克隆和DNA测序。本教育指南以清晰易懂的方式解释了琼脂糖凝胶电泳的原理、分步程序、组件、优点和应用。
什么是琼脂糖凝胶电泳？
琼脂糖凝胶电泳是一种通过多孔琼脂糖凝胶基质施加电流来分离不同长度 DNA 片段的方法。 DNA 分子带负电，当施加电场时，DNA 分子会向正极迁移。较小的 DNA 片段比较大的 DNA 片段通过凝胶孔的速度更快，从而可以按大小进行分离。
这种技术通常用于需要 DNA 片段分离和可视化的地方。
琼脂糖凝胶电泳原理
该技术遵循三个关键原则：
1. 凝胶基质
琼脂糖形成半固体多孔凝胶。孔径取决于琼脂糖浓度并决定可以有效分离的 DNA 片段大小。
2. 电场
当施加电压时，DNA 片段通过凝胶向正极迁移。在相同时间内，较小的碎片比较大的碎片传播得更远。
3. 荧光可视化
DNA 使用溴化乙锭进行可视化，溴化乙锭是一种荧光染料，可嵌入 DNA 并在紫外 (UV) 光下发出橙色荧光。
琼脂糖凝胶电泳的优点
与蔗糖密度梯度离心等旧方法相比，琼脂糖凝胶电泳具有：
DNA 带的直接可视化
使用 DNA 梯子准确估计大小
操作简单、快速、经济高效
高再现性和多功能性
琼脂糖凝胶浓度和 DNA 大小范围
琼脂糖凝胶制备为重量/体积 (%) 溶液。浓度取决于要分离的 DNA 片段的大小：