理由:干扰素基因(STING)激活肿瘤中的刺激剂不可避免地增强了吲哚胺2,3-二氧酶(IDO)的活性。然而,IDO会将色氨酸(TRP)转换为kynurenine(Kyn),这可以抑制对TRP敏感的T细胞的功能活性并诱导免疫抑制作用。很少探索用于刺激性激动剂和IDO抑制剂组合的有效纳米药物。方法:将二嵌段聚合物多生产与IDO抑制剂1-甲基丁字传(1-MT)合成,该二烷基键(1-MT)由硫代键和光敏剂5,10,15,15,20-四磷酸苯基孢子蛋白(TPP)以及氢孢子骨(TPP)以及氢孢子骨(4-METH)的替代(4-METH)替代(4-METH)(ER) - METHERMETERMESTRIMSILIM级别(ER)磺酰胺在亲水块中。在水溶液中自组装后,可以以高载荷效率形成胶束加载刺激性激动剂SR-717(SR@et-PMT)。细胞内在化后,胶束可以靶向ER。在暴露于650 nm的光照射后,可以生成活性氧(ROS)以打破硫代键并将胶束解离以释放1-MT和Sting Agonist。伴随着光动力疗法(PDT),同时实现了STING激活和IDO抑制作用。结果:体外观察揭示了PDT效应,ER靶向和光活化的药物释放。体内动物模型的结果表明,可光活化的免疫调节剂多生产胶束表现出极好的肿瘤积累和有效的免疫激活能力可抑制实体瘤。PDT效应,STING激活和IDO抑制作用协同激活体内抗肿瘤免疫。最后,由于有效的免疫治疗疗效,SR@et-PMT可以达到88%的实体瘤抑制率。结论:可将光活化的免疫调节剂多塑料成功准备好同时提供刺痛激动剂和IDO抑制剂,这代表了一种有希望的纳米医学,用于协同抗体免疫的时空激活。
通过DNA吸收紫外线是细胞氧化损伤的主要来源,引发了一系列对生物体的可能非常有害结果的分子事件(DNA突变,凋亡和癌症)。1 - 3,因此,巨大的效果已致力于表征多核苷酸的光活化动力学。归功于时间分辨(TR)光谱技术4 - 6的发展以及量子机械(QM)计算的限制,已经取得了7 - 10个重要的进步,尤其是在模型多核苷酸序列的研究中。7 - 9,11 - 13他们的光活化动力学非常复杂,结合了超高过程,其特征是亚匹克秒(PS)中的时间常数多达几个PS,而其他过程则以较低的时间尺度出现,最高为纳米秒(NS)(NS)及以后。最快的过程通常与单体样衰减过程有关,即类似于孤立基地中发生的,而,而
单分子定位概念minflux引发了对流体浮动器的特征的重新评估,以实现纳米尺度分辨率。minflux纳米镜检查受益于时间控制的荧光(“ on”/“ o实易”)的照片处理。与不可逆的切换行为结合在一起,预计本地化过程将简单地转化为高度效率和定量数据分析。最近报道的光活性黄酮(PAX)染料的电势被认为扩展了Minflux所用的分子开关列表,其561 nm激发量超过了荧光蛋白mmaple。通过分析内源标记的核孔复合物的有效标记效率,在定量比较了PAX 560,PAX + 560和MMAPLE的MINFLUX定位成功率。PAX染料被证明优于mmaple,并且与通常用于单分子定位显微镜的最佳可逆分子开关相提并论。此外,引入了理性设计的PAX 595,用于补充基于光谱分类的双色561 nm minflux成像,以及在快速实时的cell Minflux Imflux Imflux Imflux Imflux Imaging中展示了基于光谱分类的PAX分类和pax光化的确定性,不可逆性和不依赖性的pax光化性质。PAX染料满足了Minflux对每个标签位置的强大读数的需求,并填充了专用于561 nm Minflux成像的可靠的流体团。
大型天然产物衍生分子,无法通过合成获得或处理。对于激酶靶标,另一种方法建立在对多种细胞激酶具有广泛特异性的亲和珠上。使用这些珠子与不同浓度的游离目标激酶抑制剂竞争可以实现靶标 ID。[6,7] 这种方法的一个缺点是它仅限于激酶抑制剂。较新的蛋白质组学方法,如热蛋白质组分析 (TPP) 和有限蛋白水解-小分子图谱 (LiP-SMap) 不需要化合物标记或固定。[8,9] 然而,这些方法需要对蛋白质组样本进行深度表征,因此需要较长的质谱测量时间。因此,基于 TPP 和 LiP-SMap 的靶标 ID 研究通常仅限于单一化合物。无向光交联是一种将小分子固定在亲和基质上的有吸引力的替代方法。 [10–14] 光交联反应具有化学和位点非选择性,因此无需事先衍生化即可为每个小分子分配不同的标记产物。这使得可以同时并行地以阵列形式固定多个小分子。这种阵列可以用单个标记蛋白质(分离的或全细胞蛋白质提取物)进行探测,以评估其与多个小分子(多种化合物,一种候选靶蛋白)的相互作用。[15] 光固定化小分子还可用于在全细胞蛋白质提取物中寻找相互作用伙伴,然后进行无偏靶标鉴定。[16–18] 然而,由于区分特定靶标蛋白质和非特定污染物具有挑战性,因此此类靶标鉴定实验迄今为止仅限于单一化合物(一种化合物,多种靶标蛋白质)。据我们所知,尚未描述无定向光交联用于并行高通量鉴定多种化合物(多种化合物,多种候选靶标蛋白质)的靶标。定量亲和纯化与质谱联用(q-AP-MS)利用定量来区分特定
DNA修复需要对局部染色质结构进行重组,以促进并修复DNA。研究特定染色质结构域中的DNA双链断裂(DSB)修复已通过使用序列特异性核酸内切酶产生焦油的断裂来帮助。在这里,我们描述了一种结合Killerred的新方法,该方法是一种光敏剂,该光敏剂在暴露于光线时会产生活性氧(ROS),以及CRISPR/CAS9系统的基因组侵蚀性。将Killerr的融合到催化无效的CAS9(DCAS9)产生DCAS9-KR,然后可以将其靶向具有适当的指导RNA的任何所需的基因组区域。用绿光激活DCAS9-KR会产生活性氧的局部增加,从而导致“聚集”的氧化损伤,包括DNA断裂和碱基损伤。迅速(几分钟之内)激活DCAS9-KR会增加γH2AX和KU70/80复合物的募集。重要的是,这种损害在终止光线暴露后的10分钟内修复,表明DCAS9-KR产生的DNA损伤既快速又瞬时。此外,维修是专门通过NHEJ进行的,没有基于HR的机制可检测到的贡献。令人惊讶的是,修复的DNA损伤区域的测序没有发现目标区域中突变或indels的增加,这意味着NHEJ在低水平的条件下具有高忠诚度,损害有限。DCAS9-KR用于产生靶向损伤的方法与使用核酸内切酶相比具有很大的优势,因为可以通过控制光线暴露来控制DNA损伤的持续时间和强度。此外,与进行多个切割修复周期的核核酸酶不同,DCAS9-KR会产生一系列的损害,更类似于在急性暴露于活性氧或环境毒素中急性暴露时造成的损害类型。DCAS9-KR是一个有前途的系统,可在聚类的DNA病变上诱导DNA损伤并测量位点特异性修复动力学。