该系统具有通用性,为以有用的效率引入点突变和小插入/缺失提供了几乎无限的可能性,而无需共同传递修复模板。该系统的进一步改进应侧重于提高主要编辑效率,主要通过测试不同的 RT 和 pegRNA 设计。为了克服编辑窗口的限制,使用具有不同 PAM 要求的不同 Cas 蛋白将允许将复合物带到正确的位置以引入所需的修改。此外,需要详细分析该技术在植物中的特异性,并与其他可用的植物基因组修饰方法在脱靶编辑方面进行比较分析。最后,为了提高主要编辑技术的多功能性,有必要改进引入的插入/缺失的大小并减少编辑副产物。
摘要 随着反向遗传操作平台的建立,柔嫩艾美耳球虫已成为研究原虫生物学和免疫学的宝贵模式生物。本文介绍了利用CRISPR(成簇的规律间隔的短回文重复序列)/Cas9(内切酶)系统对柔嫩艾美耳球虫进行高效基因编辑的应用,表明CRISPR/Cas9系统可通过一条向导RNA介导位点特异性的双链DNA断裂。利用该系统,我们成功地将红色荧光蛋白插入内源性微线体蛋白2(EtMic2)的C端,对其进行了标记。我们的研究结果将CRISPR/Cas9介导的基因改造系统的应用扩展到柔嫩艾美耳球虫,为针对性地研究顶复门寄生虫的基因功能开辟了一条新途径。
● 温度:温度通常在25°C至30°C之间。发酵罐中使用的大多数微生物在这个温度范围内表现出最佳生长。如果温度过高或过低,那么微生物就会死亡。● pH值:需要保持pH值以确保最佳生长。不同的微生物具有不同的最佳pH值。如果pH值过酸或过碱,微生物就会死亡。● 氧气:微生物的有氧呼吸需要氧气。发酵罐通过搅拌液体培养基将这种氧气均匀分布。● 营养供应:微生物生长需要营养。这也使它们能够繁殖。● 废物:应控制废物的数量,因为废物的积累会限制生长。
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摘要 玛丽·雪莱的著名小说《弗兰肯斯坦》经常被誉为第一部真正的科幻小说。在我的论文中,我使用《弗兰肯斯坦》中对生命创造的预示性视角来评估儿童基因改造的道德性。CRISPR-Cas9 正迅速成为我们这个时代再生技术中最重要的发展,许多人认为它是一种设计我们孩子的方法。我反对这种“设计婴儿”的趋势,特别是对修改未来儿童非疾病特征的合理性提出了质疑,并鼓励科学界和哲学界采取更谨慎的态度。
在本文中,我断言,基因革命,即一系列极具变革性和颠覆性的基因技术的出现,将在未来几年内发生。鉴于这一历史事件的重要性,我认为我们必须提前思考这场革命可能带来的社会伦理动态。为此,我首先探讨了这场基因革命可能展开的方式,以及它将面临的社会伦理问题。然后,我以厄瓜多尔为例,描述了后基因革命情景中可能出现的社会动态。厄瓜多尔是一个多民族社会,经历了一场突然的社会和基因变革,在某些方面可能类似于基因革命可能带来的变革。关键词:基因技术;生物伦理学;人类增强;不平等;集体行动问题
摘要:维生素 A 缺乏症是一个全球性的健康问题,对发展中国家的人们影响尤为严重。它会导致严重的健康问题,例如免疫系统虚弱和视力受损。转基因技术已成为解决这一问题的一种可能方法,通过增加大米、玉米和土豆等主食作物中的 β-胡萝卜素含量。大米、玉米和土豆是全球重要的主食作物,但缺乏维生素 A 等必需营养素。因此,科学家已成功地利用各种基因工程技术(如 CRISPR-Cas 基因编辑、基因枪转化和农杆菌介导的转化)将增强 β-胡萝卜素所需的基因插入这些作物中,从而为维生素 A 缺乏和营养不良提供了解决方案。
结果:使用 CRISPR-Cas,我们能够生成直接选择的敲除 TIL,其基因编辑效率高达 95%,PDCD1 基因位点的效率为 70%。基因编辑和未编辑样本之间的快速扩增或活力没有显著变化。PD1 敲除 TIL 的记忆表型没有改善;然而,其他基因靶标(靶标 X 和 Y)的消融导致中枢记忆群体增加。PD1 敲除 TIL 和测试的其他靶标中的多功能细胞因子分泌均得到改善。在连续杀伤试验中,PD1 KO TIL 表现出与模拟和未编辑 TIL 相似的细胞溶解,而靶标 X 的敲除在没有细胞因子支持的情况下表现出增强的细胞溶解。此外,与选定的肿瘤反应性模拟 TIL 相比,肿瘤细胞与自体选定的肿瘤反应性靶标 X 敲除 TIL 共培养导致肿瘤细胞裂解半胱天冬酶 3 的表达增加。
潜力不确定的克隆造血 (CHIP) 与心血管疾病 (CVD) 风险增加有关,据推测是通过炎症小体激活实现的。我们对 424,651 名英国生物银行参与者进行了炎症基因修饰扫描,以寻找 CHIP 相关的 CVD 风险。我们使用血液 DNA 的全外显子组测序数据确定了 CHIP,并将其作为一个复合模型进行建模,将所有驱动基因一起考虑,也分别考虑常见的驱动基因( DNMT3A 、 TET2 、 ASXL1 和 JAK2 )。我们为 26 个炎症小体相关基因开发了预测基因表达评分,并评估了它们如何改变 CHIP 相关的 CVD 风险。我们确定 IL1RAP 是跨基因 CHIP 相关 CVD 风险的潜在关键分子,并且 AIM2 基因表达增加导致 JAK2 和 ASXL1 相关的 CVD 风险增加。我们发现,CRISPR 诱导的 Asxl1 突变小鼠巨噬细胞对 AIM2 激动剂的炎症反应特别强烈,与 DNA 损伤反应增强以及 IL-10 分泌增加有关,反映了 ASXL1 CHIP 中 IL10 表达的 CVD 保护作用。我们的研究支持炎症小体在 CHIP 相关 CVD 中的作用,并提供了证据来支持针对 CHIP 相关 CVD 风险的基因特异性策略。