c。当愈伤组织或外植体暴露于细胞分裂素的正确组合,有时是低的生长素浓度时,射击诱导开始形成。芽可能像植物或愈伤组织上的小芽一样出现。在此阶段,植物细胞开始分化为芽分生组织,这些分生组织成长为功能性芽。d。射击伸长一旦形成不定的芽,就需要将其拉长并发展成可行的植物。这通常涉及将新形成的芽转移到低细胞分裂素和高营养含量的培养基中。e。芽伸长后生根,将植物体转移到可能含有生长素的生根培养基中,以鼓励根部形成。在将植物性转移到土壤或适应外部条件之前,必须建立根。
摘要:在巴基斯坦,棉花作物占国内生产总值的 23%,其大量出口为贸易业务提供了 60% 的总利润。不幸的是,双子病毒以惊人的速度摧毁了棉花作物。现在,CLCuV 导致棉花作物发生棉花卷叶病毒病并降低其产量。这种病毒对棉花植物的攻击给巴基斯坦造成了 50 亿美元的损失。在这方面,使用了一些传统方法,如植物育种和特定的 RNA 编辑。同时,生物技术引入了一些非常有吸引力的技术,这些技术具有根除这种疾病的巨大潜力。这些技术包括 ZFN、TALEN 和 CRISPR/Cas9。在我的研究中,采用 CRISPR 方法是因为其具有出色的位点特异性诱变效率。不同 CLCuV 的 rep 基因的保守位置被确定为靶位点。这些特定位点为 3 个 gRNA 的建立提供了信息。克隆了具有多个引导RNA和1Cas9的单一表达载体pHSE-401。使用了特定的棉花品种coker-312。通过切除棉花植株的下胚轴并通过农杆菌EHA-105菌株进行传递感染来进行载体的转化。然后,将1000个感染性下胚轴转移到具有各自抗生素的MSB上,然后转移到将下胚轴边缘转化为愈伤组织的再生培养基上。仅获得两个转基因愈伤组织,转基因愈伤组织的百分比为0.02%,通过PCR筛选并在凝胶上进行电泳。200bp的条带证实了棉花愈伤组织中存在CRISPR/Cas9构建体。关键词:CRISPR/Cas9,多重载体,3gRNA和Cas9,农杆菌,转化,愈伤组织。版权所有 © 2020 作者:这是一篇开放获取的文章,根据知识共享署名 4.0 国际许可(CC BY-NC 4.0)分发,允许在任何媒体中无限制地使用、分发和复制,用于非商业用途,前提是注明原作者和出处。 1. 引言 巴基斯坦的经济主要依靠农业部门。其在 GDP 中的百分比为 19.82%,但农业部门的参与度从 1950 年的 50% 下降到 2014 年的 21% 左右。农产品、林业劳动力、牲畜养殖和农作物转化所赚取的收入养活了巴基斯坦 64% 的乡村人口。据统计,66% 的巴基斯坦人在农业部门就业。在 20 世纪的十年里,农产品的年增长率为 2.5%。在 1997 年的农业一揽子计划中,农作物产量增长了 5.9%。为了提高农业生产力,年产量从 2010 年的 0.2% 增加到 2015 年的 2.9%(匿名,2014-2015 年)。
值得注意的是,可以识别出开放骨折治疗的问题。在某些木乃伊夹板上发现了裂缝侧的血迹和没有任何愈伤组织形成的没有任何愈伤组织的裂缝,这表明事故发生后27人死亡。直到20世纪,开放的骨折主要是致命的,即使到今天,有时还没有解决这些开放性裂缝中伤口和感染问题的方法,这使截肢不可避免。直到今天,开放的裂缝仍然是一个谜!(在许多世纪以来,截肢是开放骨折的唯一可能治疗方法)。在古希腊医学中,骨折治疗被施加在希波克拉底语料库中6。在此期间,夹板和绷带也用作基本断裂稳定技术。较小的出血被捕捉并截肢开放裂缝(脱节)。在接下来的几个世纪中,希腊医师认识到伤口的传染性综合征和
从 T8 到 L5,连续椎骨支撑的体重百分比相对稳定地增加(约 3%)。头部和颈部占体重的 9%。躯干上半部分的重量部分由下背部区域承担并传递到下背部区域,通过髋臼顶部髂骨的明显增厚,骶骨传递到下肢。据此,他们计算出各种椎骨的损伤概率/风险曲线。校正因子用于得出特定年龄的骨折风险概率。关于弹射性脊柱损伤的文献表明,从战斗机弹射时,T11 至 L2 椎骨最容易发生骨折 [2][3][4]。Henzel 等人 [1] 提出的断裂载荷(单位为 G)证实了这一事实,这些椎骨的断裂载荷最低(22.7 至 24.1)
摘要 在本研究中,我们评估了水杨酸在减少枣椰树体外培养中真菌污染方面的作用以及水杨酸对茎尖上形成的愈伤组织再生体细胞胚的影响。最常见的真菌是链格孢菌(37%)、镰刀菌(25%)、烟曲霉(18%)和扩展青霉菌(6%)。使用马铃薯葡萄糖琼脂,水杨酸限制菌丝生长,浓度较高时则延缓菌丝生长。与对照(12.3%)相比,将浓度为 1.5 和 2.0 mM 的水杨酸添加到含有 2iP 和 NAA 的 MS 培养基中,可显著提高愈伤组织外植体的胚胎发生率,分别达到 64.9% 和 56.7%。与对照相比,水杨酸还使胚胎的幼苗发育速度提高了约 27%。水杨酸促进了根系和茎部的生长,提高了叶绿素含量。结果表明,在MS培养基中添加1.5mM水杨酸,叶片中IAA和ABA的浓度显著增加,IBA的浓度降低。关键词:初始培养,体细胞胚胎发生,小植株发育,生长调节剂含量
摘要 植物原生质体是利用基因编辑对所需性状进行遗传操作的可靠实验系统。尽管如此,突变原生质体的选择和再生仍具有挑战性,而随后恢复成功编辑的植物是先进植物育种技术的一个重要瓶颈。为了缓解与原生质体转基因表达和原生质体再生相关的障碍,开发了一种新方法。结果表明,线性化 DNA 可以有效转染马铃薯原生质体,而来自各种植物的 UBIQUITIN10 启动子可以有效地指导转基因表达。此外,还对转染原生质体的卡那霉素抑制浓度进行了标准化,新霉素磷酸转移酶 2 ( NPT2 ) 基因可用作富集转染原生质体的有力选择标记。此外,BABYBOOM ( BBM ) 转录因子的瞬时表达促进了原生质体衍生愈伤组织的再生。总之,这些方法显著增加了对表现出高转基因表达的原生质体的筛选,从而显著提高了原生质体衍生愈伤组织中基因编辑事件的发生率,达到 95%。本研究开发的方法促进了四倍体马铃薯植物的基因编辑,并为多倍体生物中的复杂基因操作开辟了道路。
抽象的人群物种,尤其是trichocarpa,长期以来一直是基因组研究的模型树,这是由于完全测序的基因组。然而,高杂合性和重复区域的存在,包括丝粒和核糖体RNA基因簇,剩下了59个未解决的间隙,占三分法P. trichocarpa基因组的3.32%。在这项研究中,改进了愈伤组织诱导方法,以从P. ussuriensis花药中得出双倍的单倍体(DH)愈伤组织。利用长阅读测序,我们成功地组装了一个几乎没有间隙的,端粒到telomere(T2T)P。ussuriensis基因组,跨越了412.13 MB。该基因组组件仅包含7个间隙,其重叠n50长度为19.50 MB。注释显示该基因组中有34,953个蛋白质编码基因,比trichocarpa多465个。值得注意的是,中心区域的特征是高阶重复序列,我们在所有DH基因组染色体中鉴定了和注释的中心粒区域,这是杨树的第一个。衍生的DH基因组表现出与毛thocarpa的高共线性,并显着填补了后者基因组中存在的空白。此T2T P. ussuriensis参考基因组不仅会增强我们对基因组结构的理解,并在杨树属内的功能增强了我们的功能,而且还为杨树基因组和进化研究提供了宝贵的资源。
3. 所有提交给征集证据的意见和证据都经过评估,并用于指导和协助对法规的审议。根据法定要求,一份关于审查结果的报告副本将交存于议会,这些利益相关者的意见可在报告中引用。一份单独的高级别回应文件涵盖了征集证据的回应,该文件应与本报告一起阅读。
《空军杂志》(ISSN 0730-6784)2017 年 12 月(第第 100 期,第第 12 期)每月出版一次,除了 4 月/5 月和 10 月/11 月的两期双期刊外,由空军协会出版,地址为 1501 Lee Highway, Arlington, VA 22209-1198。电话 (703) 247-5800。定期邮资在弗吉尼亚州阿灵顿支付,并额外邮寄冰块。会员费:每年 45 美元;电子会员 30 美元;三年会员 110 美元。终身会员(不可退款):单次付款 600 美元,延期付款 630 美元。订阅费:每年 45 美元;邮寄到国外地址每年需额外支付 29 美元(加拿大和墨西哥除外,每年需额外支付 10 美元)。常规发行每期 8 美元。美国空军年鉴发行每期 18 美元。地址变更需要提前四周通知。请附上邮寄标签。邮局局长:将地址变更寄至空军协会,1501 Lee Highway,Arlington,VA 22209-1198。出版商对未经请求的材料不承担任何责任。空军协会注册商标。版权所有 2017 空军协会。