f i g u r e 1 vwf和VWFPP静止血小板的定位。(a,b)静止的血小板被染色为α-微管蛋白(洋红色),vWF(红色,小鼠单克隆抗VWF,clb-rag20)和(a)vwfpp(green)或(b)纤维化(a)。(c)为α-微管蛋白(洋红色),vWF(红色,兔多克隆抗VWF,dako)和sparc(绿色)染色的静止血小板。成像是通过SIM进行的,显示了代表性的高分辨率单平面,宏伟的图像。黄色正方形内包含单个颗粒的区域在右侧(黄色正方形)上放大。比例尺表示1μm。 (d,e)VWF与α颗粒蛋白VWFPP,SPARC和纤维化的共定位分析。(d)Pearson的共定位系数(PCC)和(E)对单个血小板图像(VWF-VWFPP n = 239,VWF-SPARC N = 199,VWF-FIBLIN N = 73)的成对曼德斯的共定位系数(MCC),与VWF相比,VARC与VWF相比,vwf-fibrin n = 199,vwf-sparc n = 199,vwf-fibrin n = 73)bars表示为95%顺式的平均值,平均PCC和MCC值在图的顶部。SIM,结构化照明显微镜; Sparc,分泌的蛋白质酸性和富含半胱氨酸; vwf,von Willebrand因素; VWFPP,VWF丙肽。
图4:管道生产的工作台场景,以评估注册和掩盖精度。分别通过细绿色和蓝色线条显示了自由表面的白色和曲面。ASL体积脑面膜轮廓显示在洋红色中。白色盒子表示ASL获取的视野,转变为ASL网格的T1W空间。青色线(在矢状视图中在小脑的底部看到)表示位于视野外的ASL脑面膜的一部分。Greyscale中的基本图像是完整335
图1:实验概述。音符表示听觉刺激。(a)每个听觉序列由每个持续时间为200 ms的四个音调,分别为400毫秒的间隔间隔。从第一个音调开始到第四音的偏移,整个序列的持续时间为2000毫秒。在测试阶段,每个序列的第四个音调各不相同。在每种条件下进行跨试验的平均值后,我们分析了第一个音调开始之前的200 ms,到第四个音调偏移后的1000毫秒(总持续时间为3200 ms)。(b)对于胎儿录音,预期的母亲必须将腹部放置在传感器阵列的凹陷内,并在她的身体和萨拉设备之间放置一个声音,以传达听觉音调。(c)胎儿MEG信号对听觉音调无创记录。要纠正胎头方向和大小对MEG信号振幅的影响,相对于早期暴露阶段记录的最大振幅,所有信号均标准化为最大响应百分比(PMR)。分别以洋红色和灰色显示了全球和标准差异试验的所有录音的平均值。(d)出生后,作为新生儿的一部分受试者返回实验室,并在被放置在面向摇篮的头上后,朝向Sara设备的Squid磁力计阵列。为了安全地将听觉刺激传递到新生儿大脑中,新生儿戴着对婴儿友好的耳机。请注意,B和D从(28)改编。(e)Sara设备记录了新生儿无创的皮质信号;同样,所有全球差异试验的平均值均显示在洋红色中,所有Gloabl标准试验的平均值均以灰色为单位。
与区域A的联排别墅开发项目相关的街道访客停车位为67个空间(在蓝色和洋红色区域内),超过了需要51个空间的停车政策中规定的最低要求。在与Procinct B和Superlot H的连接之间的主要街道上有38个街道空间,在北部的北部有20个空间,通过区域的长度分配了停车位。在中央停车场区域内提出了另外15个停车位,以供联排别墅的任何其他访客停车位要求,以及与外部游客使用公共开放空间相关的停车位 - 这需要10个停车位
图 1. (A) 起始 DNA 序列,其中包含目标碱基对 (A:T)。(B) 腺嘌呤碱基编辑器 (ABE) 由进化的 TadA* 脱氨酶 (淡紫色) 和部分失活的 CRISPR-Cas 酶 (灰色) 组成。碱基编辑器与与向导 RNA (洋红色) 互补的目标序列结合,并暴露一段单链 DNA。(C) 脱氨酶将目标腺嘌呤转化为肌苷 (DNA 聚合酶将其读取为鸟嘌呤),Cas 酶切口 (▲) 另一条链。(D) 切口链被修复,完成从 A:T 到 G:C 碱基对的转换。
封面图片。上图:Thy1-GFP 标记的透明化鼠脑(CLARITY)。采用 ZEISS Lightsheet Z.1 采集,在 arivis Vision4D 中处理。使用 5 倍物镜成像,使用来自两侧的 6x7 瓷砖。插图:皮质区域的数字变焦,显示可以识别和分析单个神经元。图片由 Douglas S Richardson 拍摄;经 ZEISS 许可复制。中间左侧:有丝分裂中的 HeLa 细胞的 3D 渲染。来自 300 个时间点图像系列的快照。染色体标记为绿色(mCherry-H2B),线粒体标记为黄色(mitotracker - 深红色),内质网标记为洋红色(mEmerald-calnexin)。细胞器结构清晰可见。由 Wesley Legant 和 Eric Betzig 使用晶格光片显微镜采集。图片来自 Chen 等人Science 2014;346:1257998。经美国科学促进会许可转载。中间右侧:海洋甲壳类动物 Parhyale hawaiensis 六天大胚胎的 3D 渲染体积数据集。七天延时拍摄的一个时间点。使用 ZEISS Lightsheet Z.1 采集,数据在斐济处理和融合。图像由 Tassos Pavlopoulos 拍摄。底部:斑马鱼视网膜的发育过程,在出生后 1.5 天至 3.5 天内,每 12 小时在光片显微镜下拍摄一次。标签:视网膜神经节细胞与 Ath5:RFP(洋红色),无长突细胞和水平细胞与 Ptf1a:YFP(黄色),光感受器和双极细胞与 Crx:CFP(青色)。图片由德累斯顿马克斯普朗克分子细胞生物学和遗传学研究所(MPI-CBG)的 Norden 实验室提供(根据知识共享署名 - 相同方式共享 4.0 国际许可证授权 https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/deed.en)。
图 2:芯片上嵌入 hMO 的明场图像 (A)。沿施加的流动方向排列的神经胶质和神经元突起:TH(红色)、GFAP(绿色)、MAP2(洋红色)(B)。芯片上中脑微组织的生长曲线。通过混合效应分析和 Tukey 检验确定的统计学意义 *p<0.033、**p<0.002、***p<0.001(n=8-10,来自 3 个独立的类器官代)(C)。静态(上图)和动态(下图)培养的 hMO 的明场图像描绘了神经突生长的差异(左图)(D)。静态和动态培养的 hMO 的最大神经突生长率的箱线图。通过 Mann-Whitney 检验确定的统计学意义 *p<0.033、**p<0.002、***p<0.001。 (n >= 3,来自 3 个独立的类器官代)(F)。显微照片和 hMO 免疫组织化学染色切片的相应定量分析显示分化 35 天后凋亡标志物 caspase 3 存在显著差异。通过 Welch t 检验确定统计学意义 *p<0.033、**p<0.002、***p<0.001。柱状图和误差线表示平均值 ± SEM(n >= 3,来自 3 个独立的类器官代)(E、G)。分化 60 天后的完整中脑类器官:TH(红色)、GFAP(绿色)、MAP2(洋红色)、细胞核(蓝色)(H)。放大 60 倍的完整 hMO 核心的放大细节(H)(I)。MAP2 阳性神经元的免疫荧光染色(J)。 GFAP 阳性星形胶质细胞的免疫荧光染色 (K)。TH 阳性多巴胺能神经元的免疫荧光染色 (L)。中脑类器官中神经黑色素聚集体的明场图像 (右图) 和相应的 Fontana Masson 染色显示细胞内和细胞外神经黑色素聚集 (左图) (M)。
图1:热点模拟方法。我们通过将其应用于Musashi-1的RRM1域来证明这种方法。(a)MSI1 / RNA复合物的结构。RNA(棍棒)围绕蛋白质包裹(球形)。将两个相邻的碱基A106和G107(洋红色)埋在蛋白质表面的浅口袋中。(b)通过收集涉及分子间氢键的深埋碱(洋红色)和原子(以黄色显示的供体,绿色供体显示),从复合物中的RNA产生了相互作用图。(c)相互作用图的组成部分聚集在空间中,不参与氢键的原子将其恢复为碳原子。这会产生“热点药理”。 (d)通过与荧光标记的RNA竞争确定的带有单个无碱性位点与原始同源RNA序列的RNA之间结合自由能的差异。正值表明当给定基碱被无碱位点替换时,结合减少,表明A106和G107对这种相互作用的结合亲和力的贡献大于附近的其他碱基。(e)热点药效团是基于配体筛选的模板,寻找可以模仿药效团的三维特征的化合物。屏幕导致化合物R12的鉴定,该复合R12模拟了环的几何形状,并提供了四个所需的氢键组中的三个。(F)R12与荧光素标记的RNA竞争MSI1结合,如通过荧光极化测定所观察到的。这些数据不允许确定结合亲和力。(g)热点药效团回到蛋白质结构上的叠加说明了应由理想配体捕获的相互作用:针对三个芳族侧级堆叠,以及四个分子间氢键。(H)R12在蛋白质结构上的叠加表明,该化合物有望保留芳香族堆积,并概括了四个氢键中的三个。
图4手动分割蒙版的示例由两个评分者在原始版本(红色和绿色,第二列)和应用后处理清洁步骤的版本(浅蓝色和洋红色,第三列)中获得的版本。在第四列中显示了原始病变面膜和清洁病变面膜之间的变化(橙色=在原始面膜和清洁蒙版中共有的素,黄色=通过清洁步骤添加的黄色=素,蓝色=通过清洁步骤移除的素=素=素)。白色箭头表示评估者在病变轮廓上显示较大差异的区域。引入清洁步骤时,这些差异会减少(浅绿色箭头)。
图5。TARDIS启动子库。a)概述两个分裂的着陆垫及其相关的启动子插入向量。正确整合后,选择性标记和荧光团表达都会恢复。b)从单个TARDIS阵列线的单个热轴(PX819)中回收了9个基因的转录记者。集成到单个McSarlet-I /Hygr着陆垫中。主图像显示了指定的报告基因的MSCARLET-I表达,而插图显示同一区域的极化图像。c)示例同时,从单个TARDIS阵列中的双重整合到带有害虫的双降落垫菌株中。ceh-10p :: mneongreen :: pest是假彩色绿色和ceh-40p :: mcarlet-i :: pest是假彩色的洋红色。所有比例尺均代表20µm