摘要:p53 基因 (TP53) 替代疗法在癌症基因治疗中显示出良好的效果。然而,它的发展受到了阻碍,主要是因为所选的基因传递载体。CRISPR-Cas9 技术 (成簇的规律间隔的短回文重复序列/CRISPR 相关蛋白 9) 可以敲除突变的 TP53 (mutTP53),但由于其体积较大,许多病毒载体并不适合或需要实施降低治疗效率的策略。在这里,我们介绍了一种具有靶向癌细胞能力的噬菌体或基于噬菌体的载体,旨在研究使用该载体在人肺腺癌细胞中传递 CRISPR-Cas9 转基因的可行性。首先,我们制作了一种携带 CRISPR-Cas9 转基因盒的肿瘤靶向噬菌体。接下来,我们通过定量聚合酶链式反应 (qPCR) 和菌落形成琼脂平板研究了对载体滴度的任何负面影响。最后,我们结合蛋白质印迹分析和免疫荧光染色来证明体外细胞转导。我们表明,针对肿瘤的噬菌体可以包装包含 CRISPR-Cas9 序列的大型载体基因组 (~10 kb),而不会对活性或总数的噬菌体颗粒产生任何负面影响。然后,我们以有针对性和有效的方式检测了 Cas9 在人肺腺癌细胞中的表达。最后,我们证明了当 p53 gRNA 被整合到 CRISPR-Cas9 噬菌体 DNA 构建体中时,p53 蛋白表达会丧失。这些概念验证结果支持使用工程噬菌体进行肺癌的 TP53 替代疗法。
过去几十年来,药理计量学方法从分析科学和计算机科学的进步中受益匪浅,如今在新型药物的临床开发中发挥着核心作用。现在是时候将这些方法通过治疗药物监测 (TDM) 转化为患者护理了,TDM 将成为精准医疗的支柱,其作用不亚于基因组学方法,可控制药物反应的变化并提高治疗的有效性和安全性。在本综述中,我们围绕五个一般性问题构建 TDM 开发:1) 相关药物是否适合 TDM?2) 该药物浓度的正常范围是多少?3) 该药物浓度的治疗目标是什么?4) 如何调整药物剂量以使浓度接近目标?5) 有证据支持 TDM 对该药物有用吗?我们通过概述对第一种靶向抗癌药物伊马替尼的 TDM 开发来举例说明这种方法。我们表达了我们的立场,即类似的故事也适用于此类药物,以及对控制各种危及生命的疾病至关重要的多种治疗方法。尽管仍然存在阻碍 TDM 进展的障碍,但毫无疑问,即将到来的技术进步将塑造和促进许多创新的治疗监测方法。
水合:全天至少喝64盎司的水。您甚至可以将新鲜的柠檬/酸橙挤入其中以获得风味并添加维生素C。放松:晚上11点之前上床睡觉,获得7-8小时的声音睡眠。它有助于使用噪声机或睡眠面膜(遮住眼睛)。拔出插头:至少在睡觉前30分钟关闭手机和计算机。如果您正在查看手机,笔记本电脑或平板电脑,屏幕上的光将使入睡更加困难。根据研究,屏幕在手机,计算机,片剂甚至电视上发出的蓝光限制了褪黑激素的产生(控制您的睡眠/唤醒周期或昼夜节律的激素)。和减少褪黑激素会使跌倒和入睡更加困难。低CAL/高营养素:即使您今天消耗的卡路里很低,营养素也很高。如果在一天的任何时候您感到饥饿,请尝试喝3-4盎司。温水。温水。
必须将屋顶计划添加到被屋顶覆盖的每个楼层。例如,覆盖二楼的屋顶必须添加到二楼。如果主楼层没有二楼覆盖的车库区域,则必须在主楼层添加屋顶部分以覆盖该区域。您可以分别添加这些屋顶区域,也可以使用多层屋顶命令在区域上添加屋顶。
IPB:一种系统的理解战场IPB的系统方法是一个连续的过程,涉及分析特定地理区域中的威胁和环境,以支持员工的估计和军事决策。 它由四个步骤组成,每次进行IPB时都会执行:定义战场环境,描述其效果,评估威胁并确定威胁的行动方案。 在进行操作之前,进行了IPB来确定战场的关键特征,例如地形,天气和后勤基础设施。 G2/S2识别这些特征,并建立了关注领域(AOI)的限制,以集中分析工作。 此步骤有助于集中命令的初始情报收集工作,并确保IPB流程的其余部分集中于重要领域。 G2/S2还确定了当前情报持有物中的空白,并与其他分支机构进行了协调,以开发填补这些空白的建议。 定义战场环境有助于确定需要特定情报的领域,这对于明智的决策至关重要。 IPB是一个连续的过程,涉及对威胁和环境的持续分析和评估。 只要产品在整个任务中得到指挥官的完成并为下一个操作做准备,该过程就必须有效。 智能过程首先确定命令的初始要求,这些要求是由环境和威胁情况塑造的。 这些模型用于决策和定位过程。IPB:一种系统的理解战场IPB的系统方法是一个连续的过程,涉及分析特定地理区域中的威胁和环境,以支持员工的估计和军事决策。它由四个步骤组成,每次进行IPB时都会执行:定义战场环境,描述其效果,评估威胁并确定威胁的行动方案。在进行操作之前,进行了IPB来确定战场的关键特征,例如地形,天气和后勤基础设施。G2/S2识别这些特征,并建立了关注领域(AOI)的限制,以集中分析工作。此步骤有助于集中命令的初始情报收集工作,并确保IPB流程的其余部分集中于重要领域。G2/S2还确定了当前情报持有物中的空白,并与其他分支机构进行了协调,以开发填补这些空白的建议。定义战场环境有助于确定需要特定情报的领域,这对于明智的决策至关重要。IPB是一个连续的过程,涉及对威胁和环境的持续分析和评估。只要产品在整个任务中得到指挥官的完成并为下一个操作做准备,该过程就必须有效。智能过程首先确定命令的初始要求,这些要求是由环境和威胁情况塑造的。这些模型用于决策和定位过程。第2步评估环境对友好和威胁力的影响,考虑到一般能力,地形,天气和地理位置。此评估重点介绍了整体情况,直到在此过程中稍后开发行动方案为止。分析包括对基础设施,人口统计,政治和当地人口的检查,及其对运营的影响。此步骤中的产品可能包括人口状态叠加,天气分析矩阵和集成产品(例如改良的组合障碍覆盖物)。步骤3涉及分析情报控股,以了解威胁通常如何组织战斗并在类似情况下进行操作。G2/S2使用历史数据并开发了威胁模型来描绘威胁的正常行为,通常通过图形模板,矩阵或简单的叙述来描绘。在面对新的或不太知名的威胁时,可能需要同时发展智能数据基础和威胁模型。在步骤4中,通过开发描述威胁可用选项的敌方行动模型,将上一步的结果集成到有意义的结论中。G2/S2还准备事件模板和矩阵,以将情报集的重点集中在识别威胁将执行的过程中。G2/S2无法有效地产生这些模型来预测威胁的行动方案,除非他充分分析了友好任务,并确定了物理限制,并考虑了所有可能影响整个过程中运营的环境特征。战场环境是综合生产过程(IPB)的关键方面,它指导美国陆军各个级别的决策。为了使IPB有效,它必须在前三个步骤中建立坚实的基础,以确保敌方COA模型有效且相关。虽然单位成员可以非正式地应用IPB,如步枪手对地形和天气的考虑所证明的那样,正式IPB需要更详细的分析,并生产有价值的产品,例如地形分析报告和威胁评估。随着单位大小的增加,IPB中所需的细节水平会显着扩展。部门工作人员可以生产诸如气候摘要,详细的威胁分析和COA模型之类的全面产品,而较小的单位只能对敌人的可能行动产生欣赏。G2/S2对命令级IPB负有主要责任,但是每个指挥官和工作人员都必须理解并应用IPB来支持决策。有效的IPB确定了有关战场和威胁的关键事实和假设,并告知员工计划和战争过程。指挥官和参谋长必须考虑环境因素如何影响友好和敌人的行动。为了履行其职责,每个官员都应准备与其功能领域相关的量身定制的IPB产品,例如电子战或工程。它涉及确定假设并分析敌人发展行动方案(COA)的能力。IPB过程包括五个步骤:任务分析,敌方COA,友好的COA,分析和比较COAS,并开发行动方案。IPB的重点转移到物流支持,增强污染策略IPB过程改进了敌方COA模型,告知NBC侦察支持计划的情报准备战场(IPB)过程是军事行动决策过程的至关重要组成部分。每个步骤都建立在上一个步骤上,最终结果是被整合到操作计划或订单中的选定COA。IPB流程是动态且连续的,需要持续适应战场上不断变化的情况。指挥官的初始规划指南为IPB流程设定了阶段,这有助于确定知识中的关键差距并确定情报要求。IPB过程的第一步是任务分析,工作人员评估了有关战场环境的事实,并假设友好和敌军的互动方式。此分析确定了对潜在友好COA的限制,并揭示了隐含的任务。第二步涉及评估敌人的能力和脆弱性,以告知友好的COA开发。在此步骤中开发的敌方COA模型为制定潜在友好的COA提供了基础。在行动阶段的发展过程中,工作人员使用IPB的结果来创建友好的COA,以利用环境和威胁情况提供的机会。分析和比较COAS步骤涉及在一场战斗会议上与敌人的COA进行“战斗”,以评估其有效性。智能估算中传达的IPB产品是此过程的重要元素。最后,在结论阶段,工作人员总结了战场环境对友好和敌方COA的影响,列出了可能的威胁COA,并确定了可剥削的脆弱性。在整个过程中,指挥官和员工都使用决策框架来选择COA并制定实现其实现的操作计划或订单。IPB流程针对潜在的友好COAS IPB流程涉及分析每个潜在的友好COA针对敌方COA模型,以识别支持友好COA的高付费目标(HPTS)。 这是通过战斗会议来实现的,该会议将选定的HVT精制成HPT。 定位过程需要特定的信息要求,指挥官通过在命令COA的每个阶段同步收集工作来计划。 如果需要BDA来支持COA,则收集计划会相应调整。 馆藏经理会在可能的情况下直接将目标智能从收集者到定位单元或相关的FSE进行直接传播。 提供可行的情报,IPB结构分析,使G2/S2能力向指挥官和消防人员提供指挥官执行轮胎支撑计划。 有关对目标过程的全面理解,请咨询FM 6-20-10。 收集管理协调组织和系统的活动,为指挥官提供COA和针对性努力的必要情报。 在IPB期间,指挥官根据任务分析过程中确定的关键差距确定了他的初始情报要求。 IPB在决策中起关键作用。IPB流程针对潜在的友好COAS IPB流程涉及分析每个潜在的友好COA针对敌方COA模型,以识别支持友好COA的高付费目标(HPTS)。这是通过战斗会议来实现的,该会议将选定的HVT精制成HPT。定位过程需要特定的信息要求,指挥官通过在命令COA的每个阶段同步收集工作来计划。如果需要BDA来支持COA,则收集计划会相应调整。馆藏经理会在可能的情况下直接将目标智能从收集者到定位单元或相关的FSE进行直接传播。提供可行的情报,IPB结构分析,使G2/S2能力向指挥官和消防人员提供指挥官执行轮胎支撑计划。有关对目标过程的全面理解,请咨询FM 6-20-10。收集管理协调组织和系统的活动,为指挥官提供COA和针对性努力的必要情报。在IPB期间,指挥官根据任务分析过程中确定的关键差距确定了他的初始情报要求。IPB在决策中起关键作用。员工战斗通过模拟敌方COA并确定每个决定所需的特定情报来完善这些要求。选择了友好的COA时,指挥官批准并优先考虑支持情报要求。IPB通过确定哪些活动满足每个要求以及预期发生的时间/时间来支持进一步的需求开发。事件模板查明NAI位置,而事件矩阵描述了相关的指示器和发生时间。这些工具构成了有效的情报收集计划的基础。此外,IPB有助于员工同步工具开发,例如DSTS和BOS同步矩阵(图1-4)。由此产生的ISM(图1-5)说明了COA支持的收集策略。有效的智能同步超出了单纯的系统操作;它涉及指导情报系统,处理信息,产生有价值的情报并及时传播它以支持指挥官决策。FM 34-2提供了有关智能同步和收集管理的详细讨论。IPB将G2/S2配备了用于快速评估传入信息和有效定位工作的工具。与命令的集成系统模型(ISM)和数据驱动策略(DST)有关,这有助于执行持续操作(COA)期间指挥官的决定,并实现迅速验证或否定COA开发过程中使用的假设。在参与期间,指挥官和员工监视DST和ISM反对即将到来的报告。当他们接近每个决策点(DP)时,他们会咨询G2/S2以支持情报以告知该决定。偶尔,这场战斗可能会以最初的计划,简报和游戏(IPB)和战争制定的意外方向发展。对手正在遵循他自己的时间表;因此,员工必须利用IPB,战争和智能同步作为动态工具而不是单一事件。随着行动的进展和敌人的意图,请根据需要重新启动IPB和决策过程。这需要关键工作人员从事“迷你沃格梅”或“ huddling”,以审查和完善初始的IPB。G2/S2然后进行战争制定,以根据最新的IPB预测确定最佳的友好响应或先发制人的措施。新的决策和COA会导致更新和完善收集计划,智能同步和新的决策支持工具。集成计划是智能周期的重要组成部分。IPB产品至关重要,因为它们会极大地影响员工计划工作。G2/S2利用IPB产品来处理系统智能系统(ISO)的大量信息。这些产品还使员工通过聚焦收集系统来利用现代ISO技术来利用现代的ISOS技术,从而提供了直接定位的近实时准确性。指挥官监督IPB的工作,而全体员工执行了这项工作。MI单位指挥官支持其命令的IPB,但也支持其在其控制下的ISOS资产来满足独特的计划要求。
用作汽油中的辛烷值助推器,可以通过与甲醇(𝑪𝑯𝑪𝑯𝑶𝑯)反应(𝑪𝟒𝟖)反应来制作。如果32.8 g甲基丁基醚的甲烷的产量百分比百分比是多少,从26.3 g的异丁基反应(异丁基80%的纯度)中获得了足够的甲醇?
评估姜黄素临床前有效性(Curcuma long L.)与Piperin(Piper nigrum L.)针对自闭症类型的表型相关的(Piper nigrum L.)以及与动物谱系模型中与神经播放相关的变化
复旦微电是一家从事超大规模集成电路的设计、开发、测试,并为客户提供系统解决方案的专业公司。公司目前建立了健全安全与识别芯片、非扩散芯片、智能电表芯片、FPGA芯片和集成电路测试服务等产品线,产品广泛涉及金融、社会保障、防伪溯源、网络通讯、家电设备、汽车电子、工业控制、信号处理、数据中心、人工智能等领域。