high s chool f ield t撕裂了DNA学习中心(DNALC)是一种独特的教育资源,是美国第一个致力于改善DNA科学教育的设施。在我们的现代教学实验室中,DNALC员工强调了一种互动方法,将发现过程与学习相关联。学生执行遗传工程师使用的关键技术。实验室协议是由冷泉港实验室的DNA素养计划制定的,已由成千上万的老师和学生进行。将为2024 - 2025年提供以下实验室经验。DNA指纹实验室是一个入门实验室,适用于想要使用DNA但几乎没有分子生物学经验的类的类。作为高级安排生物学课程的一部分,教育测试服务需要DNA限制分析和细菌转化,并为许多级别的学生提供丰富的动手实验室经验。检测跳跃基因,人类线粒体测序和法医DNA分析实验室,使学生能够查看自己的DNA。DNA指纹(实验室时间:2小时)人DNA比不同的DNA更相似,那么我们如何找到差异?限制性酶是识别特定DNA序列的蛋白质,可用于确定是否存在特定的DNA序列。在本实验室中,将使用限制酶摘要和琼脂糖凝胶电泳比较“证据”和“可疑”的DNA。DNA分析将与犯罪现场数据相结合,以得出有关每个嫌疑人的结论。DNA限制分析(实验室时间:3½小时)DNA限制分析实验表明,可以用识别并切割特定靶序列的酶来精确地操纵DNA。在该实验室中,限制酶(分子生物学的剪刀)用于从噬菌体lambda中消化DNA。切割后,通过琼脂糖凝胶电泳可视化DNA片段,使学生可以通过与对照组进行比较来识别“神秘”酶。细菌转化(实验室时间:2½小时)细菌转化实验说明了生物体的遗传补体(基因型)及其可观察到的特征(表型)之间的直接联系。两个用于抗生素耐药性和发光的基因被引入大肠菌大肠杆菌中。过夜孵化后,将转化的细菌与未转化的细菌进行比较,其在氨苄青霉素存在下生长的能力并在暴露于紫外线时发光。检测跳跃基因(以前是人DNA指纹识别)(实验室时间:4小时,需要监护人同意*)此实验室检查了16号染色体的DNA区域,该区域可以包含一个短的核苷酸序列,称为Alu在染色体的非编码区域内。alu插入是基因组中“跳跃”的DNA段。学生将从盐水漱口水获得的细胞中制备自己的DNA样品,使用PCR扩增靶向基因座,然后使用琼脂糖凝胶电泳来确定该ALU的存在或不存在,该ALU跳入了数万年前的染色体。回到学校,类数据可以用作探索等位基因频率和人口遗传学的一部分,并确定相关的同学。人类线粒体测序(实验室时间:4小时,需要的监护人同意*)对控制区域内的对照区域的比较表明,人们具有单核苷酸多态性(SNP)的独特模式。这些序列差异反过来是对人类DNA多样性和人类演变的高度研究的基础。在这个实验室中,学生从通过盐水漱口水获得的细胞中准备了自己的DNA样本,使用PCR扩增自己的线粒体DNA和琼脂糖凝胶电泳的一部分,以确认结果。DNA进行测序,并将结果上传到DNALC的Bioservers网站。回到学校,学生可以对自己的DNA序列进行生物信息学分析,以探讨现代人类如何发展的理论以及他们与世界各地的同学和人的关系。法医DNA分析(实验室时间:4小时,需要的监护人同意*),该实验室检查了一个称为D1S80的染色体上的高度可变的串联重复多态性,类似于FBI创建遗传特征的方法。学生将从盐水漱口水获得的细胞中准备自己的DNA样品。通过PCR扩增后,DNA芯片的大小分辨率提高使学生可以识别其基因型,而传统的琼脂糖凝胶电泳是不可能的。这是一个先进的实验室,适用于具有分子生物学和遗传学的背景的类别。
本研究旨在证明可重复使用的电化学传感器在溶液中检测猪肉DNA的潜在用途。该方法基于电化学原理,其中DNA和氧化还原物种之间的静电相互作用在引入电荷时会产生可检测的信号。在这项研究中,将五烷六胺(RUHEX)用作氧化还原物种,结果基于输出电流。再加上为猪肉DNA设计的高度特异性聚合酶链反应(PCR)引物,该研究成功证明了拟议的新型检测方法的可靠性,这些方法利用可重复使用的电化学传感器,并有可能将其发展成为清真和kosher食品工业的快速检测工具。索引术语:猪肉DNA,清真,洁食,电化学传感器,PCR,唯一己胺1。引言“清真”和“犹太洁食”的概念分别被穆斯林和犹太人付诸实践。这两个术语在其各自的经文中经常提到,并且通常在穆斯林和犹太人中进行作为食品法的一部分。当适用于食品法时,“清真”一词指的是穆斯林消费的允许食品,其中不包含任何违禁成分。1 PCR是一种基于DNA的技术,已成功地进行了检测猪肉和脂肪。它也被认为是最有效,最可靠的检测方法之一。2,3通常,随后进行琼脂糖凝胶电泳以检测PCR扩增子。然而,这种检测方法具有耗时耗时的PCR样品准备,高压,笨重的仪器的要求,并且可能产生相当模糊的定性结果。此外,与可重复使用的传感器的成本相比,使用琼脂糖的长期成本相对昂贵,并且该方法也是
本实验室检查了16染色体的DNA区域,该区域可以在染色体的非编码区域内包含称为ALU的短核苷酸序列。学生将从盐水漱口水获得的细胞中制备自己的DNA样品,使用PCR扩增靶向基因座,然后使用琼脂糖凝胶电泳来确定该ALU的存在或不存在,该ALU跳入了数万年前的染色体。类数据被用作探索等位基因频率和Hardy-Weinberg平衡的一部分,并使用模拟服务器来建模人口遗传学原理。实验室长度:6小时建议的前LAB教学
1尼日利亚纽约州尼日利亚大学尼日利亚大学植物科学与生物技术系。2 Inqaba Biotec West Africa Ltd.,尼日利亚伊巴丹Moniya的IITA巴士站对面。通讯作者:isuosuo chinyere chioma。由于成本,速度和安全性,可以使用几种商用套件代替常规提取方法。因此,使用Zymo Research Mini植物/种子DNA提取试剂盒来确定86种非洲treculia Africana品种的DNA提取物的产量和纯度。Nanodrop Thermo Scientific™Nanodrop™一种微型紫外线分光光度计用于确定提取的DNA的质量和数量。使用内部转录的间隔1和2(其1和2)通过聚合酶链反应扩增提取的DNA。在1%琼脂糖凝胶电泳上运行扩增子。记录了A260/280和A260/230的浓度(NG/µL)和样品的A260/230。配件之间的浓度和纯度值各不相同。A260/280的纯度分别在1.5到2.18之间,分别从B22和B43获得,而A260/230的比例分别为0.93至39.56,分别从CANSKIONS C46 - AB6获得。在A260/280比率和A260/230比率下得出的值主要在1.8 - 2.0的可接受范围内,这表明ZR试剂盒可以消除污染物。因此,可以方便地进行下游应用,例如PCR和测序。在琼脂糖凝胶图像上揭示了使用Zymo Research Mini Prep作为DNA提取试剂盒的适用性和效率。Zymo Research DNA提取试剂盒适合于从treculia物种的种子中提取DNA。
功能活性(粘性终端连接):20μl含有0.5 µL快速T4 DNA连接酶,12μgHindiii消化的lambda DNA和1x T4 DNA连接酶在37°C下孵育37°C,过夜,由Agarose gelorophoresis确定的片段,在> 95%的片段中,> 95%的片段。重新消化的连接产物,50μl反应,其中含有6μg连接的片段,40个单位Hindiii和1x的Nebuffer 2在37°C下孵育2小时,导致未检测到的未检测到的未发现的片段,因为琼脂糖凝胶电基果实确定。
放大。PCR扩增被完全抑制。用于每个PCR的DNA,然后在2.0%(w/v)琼脂糖/tae/etbr凝胶中分析等效量的反应。梯子是100 bp的DNA标记(Zymo Research)。使用Zymotaq Premix(Zymo Research)进行热门PCR。使用OnESTEP™试剂盒或竞争对手去除PCR抑制剂后DNA恢复的比较。1KB梯子(Zymo Research)被稀释至各种浓度,并用QCR抑制剂去除套件或MN公司或Company MN的套件进行处理。DNA浓度,以计算每个试剂盒的恢复%。
72 ˚C,10 分钟 4 ˚C, PCR 混合物 10 x PCR 缓冲液 II (Life technologies) 2.0 l MgCl 2 (25 mM) 1.2 l dNTP 混合物 (每种核苷酸 25 mM) 0.16 l Cre FW (100 M) 0.1 l Cre REV (100 M) 0.1 l AmpliTaq Gold (5 U/ l) 0.13 l DNA 模板 ( 0.5 g 尾部 DNA) 1.0 l H 2 O 15.31 l 20 l PCR 后分析 1.5% 琼脂糖凝胶。预期模式为 Tg:250bp
(T7E1)] 可以检测靶向基因组编辑并评估其效率。该方法具有能够快速简单地进行分析的优点。在 T7E1 检测中,通过 PCR 扩增目标基因组区域,并将 PCR 产物变性并重新退火以产生异源双链 DNA。T7E1 识别异源双链 DNA 并在错配 5´ 处的第一、第二或第三个磷酸二酯键处切割。结果可以通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。这是一种通过凝胶带的强度来测量基因组编辑效率并获得一致数据的可靠方法。应用
提供: - 存储:25°C - 12个月-20°C - 用于在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上加载DNA标记和样品的长期存储说明。它包含三种染料 - 橙色G,二甲醇FF和Bromophenol Blue。这允许在电泳过程中更好地视觉跟踪DNA迁移。6x DNA载荷染料0.15%橙色G 36%甘油0.03%溴酚蓝10mm 10mm Tris-HCl(pH 7.4)0.03%xylene Cyanol ff 50mm EDTA(pH 8.0)备注1与5份DNA样品的染料溶液的一部分混合。
实际上,2022年的分子纸表明,Thermo Fisher的Invitrogen E-Gel琼脂糖预制凝胶可以通过单个基于电泳的分析3。此方法大大简化了曾经是劳动密集型过程的内容。凝胶电泳中的创新增强了其可用性,使其更安全,更容易获得。预制凝胶消除了对危险化学物质和广泛准备的需求,使研究人员能够在几分钟而不是小时内获得准确的结果。Palaima指出,在其他用于Circrna分析的电泳工作流中,“如果您自己制作,则必须处理甲醛和其他真正令人讨厌的化学物质,因为您必须预防RNases
