此预印本版的版权持有人于2023年9月18日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.09.14.557734 doi:Biorxiv Preprint
CRISPR/Cas9 技术彻底改变了原代细胞的基因工程。尽管它在 CD8 + T 细胞生物学研究中的应用势头迅猛,但 CRISPR/Cas9 对 CD8 + T 细胞体内功能的影响程度仍不清楚。在这里,我们优化了基于核转染的 CRISPR/Cas9 基因工程,用于幼稚和体外激活的小鼠原代 CD8 + T 细胞,并测试了它们的体内免疫反应。幼稚 CD8 + T 细胞的核转染保留了它们体内抗病毒免疫反应,其程度与未核转染的细胞没有区别,而体外激活的 CD8 + T 细胞的核转染导致在过继转移后的早期时间点扩增/存活率略有受损,收缩更为明显。值得注意的是,不同的靶蛋白在基因编辑后显示出不同的衰减率。这与完成基因失活所需的相当一段时间形成了鲜明对比。因此,为了实现最佳实验设计,确定靶基因产物丢失的动力学以适应基因编辑后的潜伏期至关重要。总之,基于核转染的 CRISPR/Cas9 基因组编辑可高效、快速地生成突变 CD8 + T 细胞,而不会对其体内功能造成不利限制。
标题:下丘脑脑切片中的多峰阵列记录跑步头:穿孔多电极阵列记录作者:Mino D. C. Belle 1,2,BeatrizBaño-Otalora 1和Hugh D.Piggins 1